绞股蓝皂苷对高脂血症大鼠脂代谢的影响

沈 楠，许文频，李 敏，欧阳琼，马 捷，骆涵之，李卫东

绞股蓝为葫芦科植物绞股蓝（Gynostemma pentaphyllum Makino）的多年生落叶草质藤木。绞股蓝皂苷（Five leaf Gynostemma Herb Saponin，FGHS）是从绞股蓝中提取的有效成分群，具有降血脂、抗氧化等多种作用［1］。本研究旨在从绞股蓝调节血脂代谢。纠正肝脏损伤，抑制脂质过氧化三个方面系统的阐述其治疗高脂血症的机制，为其进入临床提供可靠的理论依据。

1 材料与方法

1.1 动物 健康雄性SD大鼠，体重180g～200g，由北京大学医学部实验动物科学部提供。

1.2 药物和试剂 三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL－C）、低密度脂蛋白（LDL－C）测定试剂盒系浙江东瓯生物工程有限公司；绞股蓝皂苷由安康北医大制药有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 高脂乳剂的配制 参照文献方法制备高脂乳剂［2，3］，含10%胆固醇、20%猪油、2%胆酸钠、1%丙硫氧嘧啶、20%吐温80、20%丙二醇。

1.3.2 动物模型的建立 按文献方法［4］给予大鼠高脂乳剂10 mL／kg，同时正常对照组灌胃等量生理盐水，连续用至第10天时，各组大鼠断尾取血，测血清血脂。

1.3.3 分组及给药方法 将模型动物分为模型对照组、阳性药［非诺贝特（力平之），20mg／kg］对照组、绞股蓝皂苷20mg／kg、36 mg／kg、65mg／kg、117mg／kg和210mg／kg五个剂量组。连续灌胃给药20d。给药过程中，除正常对照组外，其余各组上午继续给予高脂乳剂（10mL／kg）灌胃。

1.3.4 测定指标及方法 末次给药后禁食12h，摘眼球取血观察。

1.3.4.1 血清生化 测定血清 TG、TC、LDL－C、HDL－C、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。

1.3.4.2 肝脏生化 在相同部位取肝脏制成10%匀浆，提取上清液，用酶法测定TG、TC、MDA、SOD含量。

1.3.4.3 组织学病检 取0.5cm×0.5cm×1cm切块，HE染色，做病理组织学观察。

1.3.4.4 肝体重比 摘取动物全肝，称重，肝重／体重即为肝体重比。

2 结 果

2.1 绞股蓝皂苷对高血脂大鼠血清ALT、AST水平的影响与模型组相比，给药后绞股蓝皂苷210mg／kg、117mg／kg剂量组对升高的ALT水平有抑制作用。与正常对照组比较，模型组大鼠AST水平升高不明显。详见表1。

表1 绞股蓝皂苷对高血脂大鼠ALT、AST的影响（±s）

表1 绞股蓝皂苷对高血脂大鼠ALT、AST的影响（±s）

组别 剂量 ALT U／L AST U／L－ 62.50±10.07 155.13±17.46模型组 － 125.50±25.812） 148.13±17.43力平之组 20mg／kg 79.00±15.551） 136.88±64.19绞股蓝皂苷组210mg／kg 89.25±28.411） 139.75±25.82 117mg／kg 102.88±7.261） 130.75±19.17 65mg／kg 106.75±26.18 128.75±16.65 36mg／kg 110.38±29.19 136.75±14.71 20mg／kg 108.00±16.46 130.63±13.24与模型组比较，1）P＜0.05；与正常对照组比较，2）P＜0.05正常对照组

2.2 绞股蓝皂苷对高血脂大鼠血清血脂水平的影响 与模型组比较，绞股蓝皂苷210mg／kg、117mg／kg剂量组可使TC和LDL－C明显降低（P＜0.05）。绞股蓝皂苷210mg／kg、117mg／kg剂量组还有升高HDL－C趋势（P＞0.05）。详见表2。

表2 绞股蓝皂苷对高血脂大鼠血清血脂水平的影响（±s）mmol／L

表2 绞股蓝皂苷对高血脂大鼠血清血脂水平的影响（±s）mmol／L

TC TG HDL－C LDL－C正常对照组组别 剂量8.89±1.48 1.74±0.75 0.63±0.09 0.27±0.10模型组 － 14.70±1.382） 6.78±2.032） 0.46±0.15 1.15±0.132）力平之组 20mg／kg 8.90±1.081） 1.63±0.331） 0.59±0.20 0.76±0.141）绞股蓝皂苷组 210mg／kg 7.62±1.361） 1.61±0.321） 0.65±0.17 0.64±0.111）117mg／kg 11.43±2.211） 1.90±0.681） 0.63±0.19 0.78±0.051）65mg／kg 12.49±4.75 1.70±0.201） 0.56±0.20 1.37±0.45 36mg／kg 13.16±3.73 1.86±1.00 0.50±0.16 1.30±0.75 20mg／kg 15.36±5.04 2.25±0.96 0.44±0.16 1.35±0.41与模型组比较，1）P＜0.05；与正常对照组比较，2）P＜0.05－

2.3 绞股蓝总皂苷对高血脂模型大鼠血清MDA、SOD的影响

与模型组比较，绞股蓝皂苷210mg／kg剂量组可使MDA血清含量降低（P＜0.05），绞股蓝皂苷各剂量组则均可明显升高SOD水平（P＜0.05）。详见表3。

表3 绞股蓝总皂苷对高血脂模型大鼠MDA、SOD的影响（±s）

表3 绞股蓝总皂苷对高血脂模型大鼠MDA、SOD的影响（±s）

mL正常对照组组别 剂量 MDA nmol／mL SOD U／9.11±1.14 362.90±22.72模型组 － 10.57±2.132） 265.10±59.832）力平之组 20mg／kg 8.80±0.521） 318.20±35.741）绞股蓝皂苷组210mg／kg 8.82±0.501） 316.09±46.441）117mg／kg 10.49±1.14 323.55±82.351）65mg／kg 11.97±1.57 317.91±35.191）36mg／kg 10.74±1.11 314.83±27.371）20mg／kg 11.56±2.08 345.35±37.651）与模型组比较，1）P＜0.05；与正常对照组比较，2）P＜0.05－

2.4 绞股蓝皂苷对高血脂大鼠肝体重比的影响 与模型组相比，绞股蓝皂苷各剂量组均可降低用药组大鼠肝体重比（P＜0.05）。详见表4。

表4 绞股蓝皂苷对高血脂大鼠肝体重比的影响（±s）

表4 绞股蓝皂苷对高血脂大鼠肝体重比的影响（±s）

组别 剂量 肝体重比（mg／g）正常对照组 － 32.46±1.66模型组 － 45.04±3.622）力平之组 20mg／kg 39.91±4.181）绞股蓝皂苷组 210mg／kg 36.42±2.551）117mg／kg 37.86±3.321）65mg／kg 39.46±3.061）36mg／kg 37.98±3.581）20mg／kg 38.62±3.661）与模型组比较，1）P＜0.05；与正常对照组比较，2）P＜0.05

2.5 绞股蓝皂苷对高血脂大鼠肝脏组织学的影响 与模型组相比，除低剂量组外，中高剂量组的绞股蓝皂苷均可减轻大鼠肝脂肪病变程度，呈剂量相关。

3 讨 论

近年来高脂血症有年轻化的趋势。高脂血症容易导致脂肪肝［5－7］、动脉粥样硬化［8－12］等其他严重疾病。目前临床应用 的 降脂西药主要有他汀类、烟酸类、贝特类、胆酸螯合剂类、多稀类等。但是上述药物具有明显的不良反应，如横纹肌溶解、体内代谢障碍、胃肠道反应等，严重的甚至导致肝肾功能的损伤［13］。因而在临床应用中它们是一把双刃剑。而绞股蓝皂苷作为一种中药成分，经许多动物和临床实验证实，除了具备与主流治疗高脂血症药物相似的降脂效果以外，无明显毒性反应［14］。

本研究发现，高剂量绞股蓝皂苷能明显下调血清TC和LDL－C含量；高、中剂量则可使血清中TG水平显著降低。高脂血症能够引起肝脏氧化损伤，影响正常肝脏形态和功能。在本实验中，同时还观察绞股蓝皂苷在逆转实验性高脂血症大鼠肝脏损伤中的作用。发现绞股蓝皂苷各剂量组均可降低大鼠肝体重比，明显改善动物模型大鼠肝脏脂肪变，纠正高脂血症对肝脏的损害。但是，低剂量组药效不如中、高剂量组，提示绞股蓝皂苷的药效存在一定的剂量相关性。目前临床肝功能检查的主要指标是ALT和AST。当肝细胞受损时，上述酶释放入血，含量将显著增高。本实验测定ALT和AST的含量，评价绞股蓝皂苷对抑制实验性高脂血症大鼠肝脏损伤的作用。发现绞股蓝皂苷高剂量组显著降低了血清中ALT的含量，并存在明显的量效关系。而因为本高脂模型对AST影响不大，用药后绞股蓝皂苷对AST几乎无明显影响。

高脂血症引起脂肪肝与脂质过氧化损伤有着密切的关系。SOD是机体细胞中重要的抗氧化酶，是维持生物体自由基产生和过氧化物清除能力平衡的重要物质。而MDA是氧自由基攻击生物膜中的多聚不饱和脂肪酸而形成的脂质过氧化物。当血脂升高时，脂质代谢紊乱，机体产生过多的氧自由基，SOD活性降低，MDA含量增加。本实验发现，在血清中，绞股蓝皂苷在各剂量组则均可明显升高SOD水平，低剂量组可显著下调MDA含量，绞股蓝皂苷具有对抗脂质过氧化的药理作用。

［1］李金青，杨洪军.绞股蓝的药理作用研究进展［J］.中国现代药物应用，2009，3（7）：189－190.

［2］周晓霞，尤翠兰，苏佩清，等.黄芩茎叶总黄酮对高脂血症大鼠脂代谢的影响［J］.中药新药与临床药理，2009，20（2）：99－101.

［3］倪鸿昌，李俊，金涌.大鼠实验性高脂血症和高脂血症性脂肪肝模型研究［J］.中国药理学通报，2004，20（6）：703－706.

［4］Liu M，Dong CR，Su JY.A kind of simple and practical model of big rat with high fat in blood［J］.Chin Pharmacol Bull，1989，5（2）：119.

［5］陈灏珠.实用内科学［M］.第11版.北京：人民卫生出版社，2004：991－1866.

［6］廖华，杜晓锋.高脂血症与脂肪肝的相关性研究［J］.中国误诊学杂志，2002，2（9）：1363－1364.

［7］Steinberg D.Thematic review series：The pathogenesis of atherosclerosis.An interpretive history of the cholesterol controversy，Part I［J］.J Lipid Res，2004，45（9）：1583－1593.

［8］Steinberg D.Thematic review series：The pathogenesis of athero－sclerosis.An interpretive history of the cholesterol controversy，partⅡ：The early evidence linking hypercholesterolemia to coronary disease in humans［J］.J Lipid Res，2005，46（2）：179－190.

［9］Steinberg D.Thematic review series：The pathogenesis of atherosclerosis：An interpretive history of the cholesterol controversy，partⅢ：Mechanistically defining the role of hyperlipidemia［J］.J Lipid Res，2005，46（10）：2037－2051.

［10］Steinberg D.Thematic review series：The pathogenesis of atherosclerosis.An interpretive history of the cholesterol controversy，partⅤ：The discovery of the statins and the end of the controversy［J］.J Lipid Res，2006，47（7）：1339－1351.

［11］Steinberg D.The pathogenesis of atherosclerosis.An interpretive history of the cholesterol controversy，partⅣ：The 1984coronary primary prevention trial ends it－almost［J］.J Lipid Res，2006，47（1）：1－14.

［12］Tannock LR.Advances in the management of hyperlipidemia－induced atherosclerosis［J］.Expert Rev Cardiovasc Ther，2008，6（3）：369－383.

［13］黄雪萍.绞股蓝总苷与辛伐他汀治疗原发性高脂血症的疗效比较［J］.临床医药，2006，15（6）：46.

［14］吴强，彭西，崔恒敏.动物脂肪肝发病机理的研究进展［J］.家禽科学，2006（4）：46－48.