不同浓度的臭氧对损伤的小鼠坐骨神经的影响

王俭 张瑛 张利苹 姬勇

坐骨神经痛是目前临床上常见多发病，主要症状为坐骨神经通路及其分布的疼痛，也就是在臀部大腿后侧、小腿后外侧和足外侧部位的疼痛。疼痛往往反复发作，时间长了会出现患侧下肢肌肉萎缩，甚至会出现跛行，腰椎间盘突出是最常见的病因［1］。臭氧具有抗炎和镇痛的作用，臭氧疗法应用于临床也已有较长的一段时间，但臭氧对坐骨神经痛是否有治疗作用还未见有人报道。本研究通过观察不同浓度的臭氧对损伤的小鼠坐骨神经热刺激收缩反应期的差别，以此探讨臭氧对坐骨神经痛的治疗效果。

1 材料与方法

1.1 材料 健康的雌性BALB/c小鼠购自山东大学医学院动物研究所;小型臭氧发生器JT-XB-5(济南景天环境科技有限公司);热辐射刺激仪(东西仪(北京)科技有限公司)。

1.2 慢性松结扎小鼠造模 将BALB/c小鼠用1%的戊巴比妥按35 mg/kg的计量进行腹腔麻醉，常规消毒铺巾后于左后肢大腿中段钝性分离股二头肌，以便暴露坐骨神经干，用4-0铬肠线对坐骨神经进行结扎，使坐骨神经外膜轻度缩窄又不阻断神经外膜表面的血流。

1.3 方法 将30只造模成功的雌性BALB/c小鼠随机分为3 组：对照组、臭氧 10 μg/ml治疗Ⅰ组、臭氧 30 μg/ml治疗Ⅱ组，每组各10只，在造模7 d时，分别给予对照组、臭氧10 μg/ml治疗Ⅰ组和臭氧30 μg/ml治疗Ⅱ组：生理盐水、10 μg/ml臭氧、30 μg/ml臭氧1 ml注射到小鼠损伤的坐骨神经处。应用热辐射刺激仪分别在手术前和手术后1 d、3 d、7 d、10 d、14 d测定所有小鼠热刺激收缩反应期［2］。

1.4 统计学方法 采用SPSS 12.0软件进行统计学处理。组内比较行配对t检验，组间比较采用单因素方差分析。检验水准α=0.05。

2 结果

手术造模后3 d起，小鼠开始出现热痛敏症状，造模7 d时开始注射臭氧治疗，手术前30只小鼠热刺激收缩反应期差别无统计学意义;手术后3 d、7 d各组小鼠的热刺激收缩反应期差别与手术前明显增强，P＜0.05差异有统计学意义;手术后10 d 和14 d，臭氧30 μg/ml治疗组与对照组、臭氧 10 μg/ml治疗组相同时间点比较差异有统计学意义，P＜0.05;臭氧10 μg/ml治疗组与对照组相同时间点比较差异没有统计学意义，P＞0.05，见表1。

表1 不同浓度的臭氧在不同时间对小鼠坐骨神经热刺激收缩反应期的影响(± s，d)

表1 不同浓度的臭氧在不同时间对小鼠坐骨神经热刺激收缩反应期的影响(± s，d)

3 d 7 d 10 d 14 d对照组 10 0±0.12 -4.22±0.04 -6.42±0.13 -6.32±0.12 -组别 例数 手术前6.35±0.13Ⅰ组 10 -0.03±0.14 -4.12±0.03 -6.28±0.11 -6.25±0.17 -6.26±0.15Ⅱ组 10 0.13±0.34 -4.27±0.04 -6.32±0.14 -3.12±0.03 -3.15±0.23

3 讨论

臭氧是一种不稳定的气体，具有很强的氧化能力，它的药理效应的基础就是氧化和氧饱和作用，其氧化作用比氧气强，更易溶于血液和组织液中，臭氧被用于治疗疾病已有几十年了，最早被用于腰椎间盘突出症［3］，随着对臭氧作用机制的进一步研究，臭氧被进一步应用到其他疾病的治疗中，像关节炎、肩周炎、偏头痛及周围血管缺血性疾病的治疗，其临床疗效比较确切。在其安全性方面，有研究表明，副作用率只为十万分之七，未有伤残、死亡报道［4］。但蚕豆病患者应禁忌臭氧治疗。

本研究模型是损伤性的，坐骨神经损伤会释放大量的炎性因子，引起周围组织的炎症，臭氧有抗炎作用，它的机理是释放免疫抑制性细胞因子、刺激NO和血小板源性生长因子生成，扩张血管，局部微循环得到改善，从而减轻水肿和提高局部氧浓度，有利于有氧代谢。坐骨神经损伤后会使神经末梢释放前列腺素、P物质、缓激肽和磷脂酶A等致痛物质［5］，从而引起疼痛。而臭氧不仅可以抑制病变部位合成与释放以上致痛复合物而产生镇痛作用;还可以刺激机体释放阻断有害信号向中枢传递的物质，如内啡肽等，从而使镇痛作用更强。

虽然臭氧的安全性良好并且具有多作用的特点，它在临床疼痛领域也受到了广泛的关注，但事实上目前临床上并没有得到普遍的应用。臭氧本身的细胞毒性特点在传统观念中受到束缚，使临床疼痛医生有所顾忌;没有系统的疼痛学基础研究也是臭氧应用方面受限制一个原因;再者就是臭氧剂量浓度目前尚不能精确调控。但随着对臭氧作用机制的进一步研究，基础研究及临床经验的大量积累和生产技术的进步，臭氧在临床疼痛领域会有广阔的前景。

［1］陈裕光，李佛保，黄承达，等.牵引下腰椎间盘突出的椎间距及间盘内压测量研究.中华理疗杂志，1994，17(2)：86．

［2］Wang LX，Wang ZJ.Aninal and cellularmodels of chronicpain.Adv Drug Deliv Rev，2003，55：949-965．

［3］王助英，姜才美，王执民.经皮椎间盘医用臭氧注射术治疗腰椎间盘突出症及适应证研究.介入放射学杂志，2006，15(2)：78-80．

［4］Bocci Velio.OZONE-A New Medical Drug.Netherlands：Springer，2005：20-28，75-83，198-208．

［5］吴闻文，侯树勋.腰椎间盘组织中磷酯酶A2活性水平与神经根性疼痛的关系.中国脊柱脊髓杂志，1996，6(1)：5．