高效液相色谱法测定五海瘿瘤丸中阿魏酸含量

鲁金凤，李立冬，徐显贵

(吉林省吉林市食品药品检验所，吉林 吉林 132001)

五海瘿瘤丸由海藻、海螵蛸、蛤壳、昆布、白芷、木香、海螺、夏枯草和川芎组成，功能软坚消肿，用于痰核瘿瘤、疠瘰、乳核。笔者建立了该制剂中阿魏酸的含量测定方法，现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 1100型高效液相色谱仪;Sartorius Bp211D型电子天平;SB5200型超声振荡器。阿魏酸对照品由中国药品生物制品检定所提供;五海瘿瘤丸(市售品);其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[1]

色谱柱:Apollo C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇－1%冰醋酸(40∶60);检测波长:321 nm。

2.2 溶液制备

精密称取阿魏酸对照品，加70%甲醇溶解并定量稀释制成每1 mL中约含3μg的溶液，作为对照品溶液。取供试品适量，研细，取4.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，密塞，称定质量，加热回流30 min，放冷，再称定质量，用70%甲醇补足减失的质量，摇匀，静置，取上清液滤过，续滤液作为供试品溶液。取不含川芎的阴性样品，按供试品溶液处理方法制备阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

专属性考察:分别精密吸取阴性对照品溶液、对照品溶液和供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果见图1，在该色谱条件下，阴性对照品溶液对测定无干扰。

标准曲线制备:精密称取阿魏酸对照品，加70%甲醇溶解并定量稀释制成每1 mL中约含0.1 mg的溶液，精密吸取上述对照品溶液适量，加70%甲醇溶解并定量稀释制成每 1 mL 中约含 0.5，1，2，4，8μg的溶液，取10 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积为纵坐标(Y)、阿魏酸进样量为横坐标(X)绘制标准曲线，得回归方程 Y=6.3986X+0.7447，r=0.9999(n=5)。结果表明，阿魏酸进样量在5～80μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

精密度试验:取同一对照品溶液，按上述色谱条件连续进样6次，测定峰面积积分值。结果的 RSD=0.72%(n=6)，表明仪器精密度良好。

图1 高效液相色谱图

稳定性试验:取同一供试品溶液，放置 0，2，4，6，8，10 h，按上述色谱条件测定峰面积积分值。结果的 RSD=0.85%(n=6)，表明供试品溶液在10 h内基本稳定。

重现性试验:精密称取同一批供试品6份，按供试品溶液制备方法制备溶液，依法测定含量。结果供试品中阿魏酸平均含量为35.5μg/g，RSD=0.87%(n=6)，表明方法重现性良好。

加样回收试验:取已知含量(含量为35.5μg/g)的供试品约3 g，平行取样6份。另精密称取阿魏酸对照品10.26 mg，置100 mL量瓶中，加70%甲醇溶解并制成质量浓度为0.1026 g/L的溶液。分别精密吸取该对照品溶液适量，加入6份供试品中，按供试品的制备方法制备溶液并依法测定，计算回收率。结果见表1。

2.4 样品含量测定

分别取3批供试品，依法制成供试品溶液，在拟订的色谱条件下测定，计算含量。结果批号为090301，090401和090405的供试品中，阿魏酸含量分别为 35.5，32.1，37.8μg/g。

表1 阿魏酸加样回收试验结果(n=6)

3 讨论

在含量测定中，曾以甲醇－1%冰醋酸(50∶50)作为流动相，发现与本方法采用的流动相甲醇－1%冰醋酸(40∶60)峰形和保留时间均较好。方法学考察结果表明，所建立的方法可靠、灵敏、专属性强、重现性好，可作为五海瘿瘤丸的含量分析方法。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:38，730.