钩藤总碱缓释滴丸的热稳定性实验

张兆芹，杨雪萍，刘 卫

钩藤总碱有明确的降压作用，是钩藤的主要有效成分。在天麻钩藤饮中，要求钩藤“后下”，这表明钩藤的有效成分对热不稳定。钩藤总碱缓释滴丸是中国人民解放军第88医院研制的抗高血压制剂，为确保其疗效，实验以钩藤总碱为指标，考察了钩藤总碱缓释滴丸的热稳定性。现将结果报告如下。

1 实验材料

钩藤总碱缓释滴丸（080623、080624、080625），第88医院制剂室产品；钩藤碱对照品，异钩藤碱对照品（中药固体制剂制造技术国家工程研究中心）。

高 效 液 相 色 谱 （HPLC）仪 ，Agilent 1200，Hypersil C1825cm×4.6 mm色谱柱。

2 方法和结果

2.1 钩藤总碱的含量测定方法 取钩藤总碱缓释滴丸6粒（相当于钩藤总碱约50 mg），精密称定，研碎，加氯仿使溶解，精确加入25 ml 0.01 mol/L硫酸标准液，在水浴上挥去氯仿，过滤，瓶中残渣用适量蒸馏水洗涤2次，过滤，合并滤液和洗液，加入甲基红-亚甲蓝混合指示剂2滴，以0.02 mol/L氢氧化钠溶液滴定，由樱红色至黄绿色为终点。总碱量以钩藤碱计，每1 ml 0.01 mol/L硫酸溶液相当于7.68 mg钩藤碱。

2.2 钩藤碱、异钩藤碱的含量测定 用高效液相色谱法，流动相∶甲醇-水（60∶40）含 10 mmol/L 三乙胺，HAc调 pH=7.5；流速 1 ml/min；测定波长 254 nm；在所拟色谱条件下，钩藤碱的理论塔板数不低于1500。精密称取钩藤碱或异钩藤碱对照品5 mg，置于25 ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液。分别取对照品溶液1.2、2.0、2.8、3.6、4.4 ml于10 ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在上述色谱条件下，进样20 μl，做HPLC分析（图1）。以进样量X（μg）为横坐标，峰面积A为纵坐标绘制标准曲线。

A（钩藤碱）=11.132x－1.232，R=0.9998

A（异钩藤碱）=21.243x－2.081，R=0.9991

根据此标准曲线（线性范围0.48～1.76 μg）取钩藤总碱缓释滴丸3粒 （相当于钩藤总碱约25 mg），用甲醇溶解后滤过，25 ml定容，进样量20 μl。测定钩藤总碱中钩藤碱和异钩藤碱的含量。

2.3 钩藤总碱缓释滴丸的稳定性考察 将钩藤总碱缓释滴丸置密闭、避光容器，25℃环境中，每隔90 d测定钩藤总碱、钩藤碱和异钩藤碱含量，结果见表1。

表1 钩藤总碱缓释滴丸中各成分（占提取物%）的热稳定性考察（n=3）

图1 钩藤总碱的HPLC

2.4 钩藤总碱缓释滴丸的热加速试验 将钩藤总碱缓释滴丸置密闭、避光容器，分别在40℃和60℃（烘箱）环境中，每隔90 d测定钩藤总碱、钩藤碱和异钩藤碱含量，结果见表1。结果表明，钩藤总碱缓释滴丸中，异钩藤碱不稳定，在40℃和60℃中180 d以后，其含量的降低有显著意义。

3 讨 论

早在20世纪50年代，有文献报道钩藤煎煮20 min其降压有效成分就有部分破坏，导致其降压作用减弱[1]。钩藤中的生物碱是钩藤降压的主要有效成分，其作用强度顺序是异钩藤碱＞钩藤碱＞钩藤总碱[2]，异钩藤碱和钩藤碱的稳定性是决定其降压作用的主要因素。钩藤碱和异钩藤碱占钩藤总碱的含量分别为28.9%和14.7%[3]，钩藤总碱缓释滴丸中钩藤碱和异钩藤碱约为实际含量的1/2（表1）。钩藤碱和异钩藤碱是同分异构体，在一定条件下可相互转化，例如，在煎煮过程中异钩藤碱转化为钩藤碱[4]，也有报道认为煎煮过程中有新的成分产生[5]。可见，明确钩藤总碱中各成分的变化情况对确保钩藤总碱缓释滴丸的药效有决定性的意义。

钩藤总碱缓释滴丸的热稳定性考察结果表明，制剂在25℃环境中保存270 d，钩藤总碱中各成分的变化均不明显，但随着温度升高，异钩藤碱的含量明显降低。提示钩藤总碱缓释滴丸在常温下稳定，但在较高温度下可致主要有效成分含量降低，所以该制剂宜常温保存，避免高温。

[1]郭协壎，顾雨时.钩藤的降低血压作用（煎法及其降压有效量的测定）[J]. 上海中医药杂志，1959，1（1）：46-47.

[2]王 盟，刘 卫.钩藤总生物碱的研究进展[J].实用医药杂志，2008，25(3):361.

[3]王瑞俭，孙广仁，孙宝民.钩藤碱提取工艺研究[J].吉林林学院学报，1998，14(2):1090.

[4]杜 旭.钩藤的研究(3):钩藤的降压活性成分及提取过程中含量的变化[J].国外医学中医中药分册，2000，26(6):370.

[5]黄卓谦，刘建利，王玉英，等.钩藤煎煮过程中化学成分变化的研究[J]. 西北大学学报，2008，38(10)：787.