血透对肾衰患者红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性的影响

苑记清

（天津医科大学总医院代谢病科，天津300052）

钠泵控制细胞许多重要功能，血管平滑肌细胞膜钠泵受抑制后，细胞内钙离子浓度增加，血管平滑肌收缩力增强，血压增高。有报道证实肾功能不全时Na+-K+-ATP酶活性下降，低蛋白饮食可恢复部分钠泵活性。有关血透对钠泵活性影响的报道限于一次血透前后钠泵活性的变化，为此笔者检测了血透、非血透肾功能不全患者红细胞膜钠泵活性，了解血透对钠泵活性的影响及意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 慢性肾功能不全患者共52例，其中慢性肾小球肾炎44例，梗阻性肾病、糖尿病肾病各2例，慢性肾盂肾炎、尿酸性肾病、多囊性肾病、狼疮性肾病各1例。按是否行血液透析治疗分2组，非血透组29例（男21例），平均年龄（40.8±15.2）岁，血肌酐（906.93±284.35）μmol/L；血透组 23例（男 15例），平均年龄(39.4±7.7)岁，血肌酐（432.45±197.36）μmol/L，血透时间（8.3±2.9）月；对照组为健康查体者 26例（男14例），平均年龄(42.7±18.6)岁。

1.2 方法

1.2.1 红细胞膜蛋白的制备 清晨空腹静脉取血6 mL，置于含 625U肝素的抗凝管中，摇匀，以2500r/min离心10min，分离血浆，用滴管吸出血细胞上的白细胞层。剩下的红细胞用生理盐水在同样的条件下洗涤3次。将洗净的红细胞置于8mL10mmol/L Tris-HCl缓冲液（pH:7.4）中溶血，放置 0.5 h后于16000 r/min下离心20 min，可见管底乳白色红细胞膜沉淀，弃去上清的血红蛋白液和管底的硬结，再用同样的缓冲液如此反复洗3次，可得乳白色红细胞膜。将膜悬浮于10 mmol/L Tris-HCl缓冲液中（pH:7.4），使其浓度在1 mg/mL左右。

1.2.2 Na+-K+-ATP酶活性的测定用孔雀绿定磷法测定酶活力，反应自加入ATP开始，于37℃保温10 min后加入定磷显色液1 mL终止酶反应。置于室温30 min后测定吸光度。

1.2.3 酶活力单位 在37℃下每小时每毫克膜蛋白催化ATP水解产生1个nmol无机磷为1个活力单位。

1.3 统计学处理 采用SPSS12.0统计软件进行分析，计量资料以±s表示，组间比较采用q检验，两因素的相关性采用Pearson相关分析。

2 结果

2.1 血透组、非血透组Na+-K+-ATP酶活性测定结果 两组酶活性均低于正常对照组，但血透组酶活力高于非血透组（P<0.005），见表1。

表1 各组Na+-K+-ATP酶活性测定结果（±s）

表1 各组Na+-K+-ATP酶活性测定结果（±s）

与对照组相比:*P<0.005；与血透组相比:#P<0.005

组别非血透组血透组对照组Na+-K+-ATP 酶活性（nmol/mg·h）63.13±22.73*#122.47±58.47*179.75±60.21例数292326

2.2 非血透组Na+-K+-ATP酶活力与肌酐的相关分析 二者呈负相关，回归方程：y赞=106.16-0.052x,r=-0.532，P<0.002。

2.3 血透组Na+-K+-ATP酶活力与血透时间（月）的相关分析 二者呈正相关，回归方程：y=92.64+6.55x，r=0.617，P<0.001。

3 讨论

尿毒症患者红细胞的钾内流减少[1]，并被认为参与血清钾的调节，可引发高血钾。血钾内流减少可能与钠泵活力减低有关，并导致一系列细胞功能失调，包括钠外流下降，细胞水肿等。肾功不全非血透组Na+-K+-ATP酶活力下降，与文献报道一致[2]，并与血肌酐负相关，说明酶的活力可反映肾衰的严重程度。低蛋白饮食可使钠泵活性上升，本文提示血透组钠泵活性较非血透组有所上升，但未至正常。本文结果说明血透治疗确能提高钠泵活性。有报道尿毒症患者体内有钠泵抑制因子，推测尿毒症钠泵活性降低与此有关，并从尿毒症患者的腹透液中提取了这一因子[3-4]，血透能将这一因子清除可能与血透者钠泵活性升高有关。国外资料显示血透病人钠泵活性与正常人无差异[5]，但国外报道仅为长期血透者一次血透后钠泵的活力结果。本文结果还显示血透组钠泵活性与血透时间正相关，说明钠泵的活性与血透的充分性有关。国外透析器仅使用一次，而国内透析器复用，这可能导致了本试验与国外有差异。钠泵是细胞膜上的一个重要的酶，它的活性恢复利于细胞基本功能的恢复，缓解尿毒症的一系列症状，如血管平滑肌细胞膜钠泵活性恢复后，细胞内钙离子浓度由高转低，血管平滑肌收缩力降低，血压下降，红细胞膜钠泵恢复，血钾内流增加，血钾下降等。因此钠泵的活性还可作为血透充分性的又一指标。

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