动脉粥样硬化性脑梗死患者血浆脂蛋白相关磷脂酶A 2水平及相关性研究

王 磊 章 莹 费世早 庞洪波 陈观保 储照虎

脂蛋白相关磷脂酶A 2(Lp-PLA 2)作为一种新型炎症标志物,参与了粥样硬化斑块形成的起始、发展和稳定性丧失及最终破裂各个阶段,可能是缺血性脑卒中新型独立危险因素。人循环 Lp-PLA 2以与脂蛋白颗粒结合的形式存在,其中2/3与低密度脂蛋白(LDL)结合,1/3与高密度脂蛋白(HDL)和脂蛋白(a)[Lp(a)]结合。Lp-PLA 2可水解sn-2位含有多不饱和脂肪酰基的氧化磷脂,生成溶血卵磷脂和氧化型游离脂肪酸,后两者为炎症介质,可导致内皮细胞功能和稳定性丧失,从而促进动脉粥样硬化斑块的形成。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2008年12月～2009年8月皖南医学院附属弋矶山医院神经内科住院的急性ACI患者(168例,其中男100例,女 68例)为 ACI组,平均年龄(64.69±9.80)岁。对照组为体检中心体检健康者(72例,其中男36例,女 36例),平均年龄(61.67±6.44)岁。

1.2 ACI组纳入标准 发病后24 h内入院,所有病例均符合1995年全国第4届脑血管病学术会议修订的脑梗死诊断标准;同时参考CISS分型标准进行病因分型;均经详细的神经系统检查及头颅核磁共振、颈部血管彩超、心脏彩超、心电图等检查确诊。排除以下情况：(1)出血性脑卒中,梗死后脑出血;(2)腔隙性脑梗死、无症状性脑梗死、动脉炎性脑梗死;(3)有明确栓子来源的脑栓塞;先天发育异常所致的脑梗死;(4)各种凝血机制异常、血液系统疾病及高粘血症所致的脑梗死;(5)合并有冠心病、周围血管疾病的脑梗死。

1.3 对照组纳入标准 年龄、性别与ACI组相匹配(P＞0.05),经病史询问既往无脑血管病病史,且经头颅核磁共振证实无脑卒中。

1.4 ACI组分组 脑梗死面积分组：按照Adam s分类法,分为大面积梗死组(96例)(面积大于3 cm2累及2个以上脑解剖部位)和小面积梗死组(72例)(面积1.5～3 cm2累及1个脑解剖部位)。神经功能缺损程度分组：按美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)进行神经功能缺损程度评估,分为轻型梗死组(32例)(＜4分)、中型梗死组(116例)(≤4～15分)、重型梗死组(20例)(≥15分)。

1.5 标本采集 ACI组、对照组分别空腹采集静脉血2m l,用EDTA作为抗凝剂,混合10～20 min后离心20 min左右(2 000～3 000 r/m in),仔细收集上清液,将标本放于-80℃冰箱统一保存。为减少批间误差和测量误差,全部标本采集完成后1次性检测。

1.6 Lp-PLA 2水平 应用双抗体夹心法测定标本中人脂蛋白磷脂酶A 2(Lp-PLA 2)水平,操作流程按试剂盒说明书进行。其余常规生化检测指标由皖南医学院附属弋矶山医院检验科完成。

2 结 果

2.1 ACI组与对照组一般资料比较 ACI组与对照组年龄、性别、吸烟史、饮酒史发生率差异无统计学意义(P＞0.05);ACI组高血压病、糖尿病发生率均高于对照组(P＜0.05)(表1)。

2.2 ACI组与对照组常见临床生化指标比较ACI组与对照组 LDLC、TC、TG 、Fib水平差异无统计学意义(P＞0.05);ACI组HDLC水平明显低于对照组(P＜0.01)(表2)。

表2 ACI组与对照组常见临床指标比较(±s)

组别LDLC(mmol/L)HDLC(mmol/L)TC(mmol/L)TG(mmol/L)Fib(g/L)ACI组 2.528±0.564 1.071±0.324 4.341±0.748 1.798±1.144 3.807±2.346对照组 2.547±0.646 1.259±0.306 4.098±1.459 1.471±0.839 3.207±1.267 t-0.147 -2.952 0.948 1.539 1.444 P 0.884 0.004 0.349 0.126 0.151

2.3 ACI组与对照组血浆 Lp-PLA 2水平 ACI组血浆Lp-PLA 2水平明显高于对照组(P＜0.01)(表3)。

表3 ACI组与对照组 Lp-PLA2 水平(±s,μg/L)

表3 ACI组与对照组 Lp-PLA2 水平(±s,μg/L)

组别 例数(n) Lp-PLA 2水平ACI组 168 12.058±7.104对照组 72 7.269±3.112 t 5.136 P 0.000

2.4 血浆Lp-PLA 2水平与脑梗死面积的关系 血浆Lp-PLA 2水平随脑梗死面积增加而呈递增趋势,但不同脑梗死面积血浆Lp-PLA 2水平差异无统计学意义(P＞0.05)(表4)。

表4 血浆 Lp-PLA 2水平与梗死面积的关系(±s,μg/L)

表4 血浆 Lp-PLA 2水平与梗死面积的关系(±s,μg/L)

组别 例数(n) Lp-PLA 2水平(μg/L)大面积脑梗死组 96 13.083±7.981小面积脑梗死组 72 10.151±6.094 t 1.853 P 0.068

2.5 血浆Lp-PLA 2水平与神经功能缺损程度的关系 神经功能缺损程度越重,血浆Lp-PLA 2水平越高,组间差异具有统计学意义(P＜0.05),进一步行SNK-q检验,3组间两两比较轻型梗死组与中型、重型梗死组比较血浆Lp-PLA 2水平差异有统计学意义(P＜0.05)(表5)。

表5 血浆Lp-PLA 2水平与神经功能缺损程度的关系(±s,μg/L)

表5 血浆Lp-PLA 2水平与神经功能缺损程度的关系(±s,μg/L)

注：单因素方差分析(F检验),P＜0.05;SNK-q检验,与轻型梗死组比较,△P＜0.05(P=0.022)

组别 例数(n) Lp-PLA 2水平(μg/L)轻型梗死组 32 7.092±1.606中型梗死组 116 12.493±7.406△重型梗死组 20 14.843±9.096△F 3.757 P 0.028*

2.6 血浆Lp-PLA 2水平与ACI患者常见危险因素的相关性分析 血浆Lp-PLA 2水平与性别,CRP呈正相关;与吸烟、饮酒呈负相关;与年龄、高血压病 、糖尿病 、TC 、TG 、LDLC 、HDLC 、Fib、Lp(a)均无关(表6)。

表6 Lp-PLA2水平与常见危险因素的Spearman相关分析

2.7 男女患者血浆Lp-PLA 2水平比较 男性患者血浆Lp-PLA 2水平明显高于女性患者(P＜0.05)(表7)。

表7 ACI组不同性别间Lp-PLA 2和其他相关生化指标比较

2.8 Lp-PLA2水平对ACI的诊断效用 Lp-PLA2水平在诊断ACI过程中ROC曲线下面积为0.700(P=0.01);95%CI为(0.599～0.800)(图1)。

图1 Lp-PLA 2在诊断ACI过程中ROC曲线

3 讨 论

炎症和氧化应激在动脉粥样硬化形成过程中起着重要作用[1],脂蛋白相关磷脂酶A 2(Lp-PLA 2)作为一种新型炎症标志物,与血管壁周围炎症发生密切相关,与传统炎症标志物如CRP相比,受全身炎症状态影响较小,血浆Lp-PLA 2水平的升高可以特异性地反映血管壁周围炎症状态的存在[2]。Lp-PLA 2不仅参与了动脉粥样硬化斑块的形成,并且与斑块稳定性丧失以及最终破裂相关,对缺血性脑卒中的发病风险和预后具有早期预测价值,其特异性抑制剂已被证明具有抗动脉粥样硬化作用,有望成为缺血性脑卒中的新型治疗靶标[2]。

3.1 血浆Lp-PLA 2水平与ACI的关系 鹿特丹前瞻性病例队列研究表明Lp-PLA 2活性高低与缺血性脑卒中发生风险密切相关[3];Ballantyne等研究表明缺血性脑卒中患者血浆Lp-PLA 2水平明显高于非脑卒中病例[4];瑞典的一项基于人群的前瞻性队列研究表明Lp-PLA 2活性与含量与缺血性脑卒中风险独立相关[5];国内梁江红[6]、王大力[7]等研究结果亦证实ACI患者血浆Lp-PLA 2水平明显升高。本研究结果显示ACI组血浆Lp-PLA 2水平明显高于对照组,与国内外研究结果相似,而LDLC、TC、TG、Fib水平差异无统计学意义;血浆 Lp-PLA 2水平明显低于国内报道结果,推测可能与所使用的试剂盒、检测方法、血浆冷冻保存时间长短有关。本研究结果表明,血浆Lp-PLA 2水平升高可能是缺血性脑卒中发生的危险因素,并且与传统危险因素 LDLC、TC、TG、Fib相比,Lp-PLA 2可能与缺血性脑卒中具有更好的相关性。

3.2 血浆Lp-PLA2水平与脑梗死面积的关系 本研究结果显示,大面积脑梗死组血浆Lp-PLA 2水平高于小面积脑梗死组,血浆Lp-PLA 2水平随梗死面积增加呈递增趋势,但差异无统计学意义,这与国内研究结果[6]相似。本研究结果提示,血浆Lp-PLA2水平不能作为预测梗死面积大小指标,其原因可能是病初梗死面积大小与血管阻塞程度、血管支配区域以及是否存在侧支循环有关,而ACI患者急性期血浆Lp-PLA2水平升高反映的是脑卒中后机体对血小板功能活跃的对应性变化,故不能反映梗死面积大小。

3.3 血浆Lp-PLA 2水平与神经功能缺损程度的关系 本研究结果显示,神经功能缺损程度越高,血浆Lp-PLA 2水平越高,血浆 Lp-PLA 2水平与神经功能缺损程度呈正相关,能够反映病情的严重程度,与国内研究结果[7]相似。神经功能缺损程度的高低与梗死部位(功能区不同)、梗死面积大小、侧支循环供应等情况有关;不管哪种类型梗死,均首先发生微循环障碍,神经细胞、胶质细胞、内皮细胞等脑细胞变性坏死和巨噬细胞、中性粒细胞等炎性细胞浸润。国内章兴甫研究发现,脑梗死神经功能缺损程度与炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β含量呈正相关[8];赵常宝等研究发现神经功能缺损程度与炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、s-ICAM-1 含量呈正相关[9]。因此,本研究推测梗死后微循环障碍,Lp-PLA 2反应性产物经代谢产生众多的炎症介质如白细胞介素、肿瘤坏死因子等炎症因子,它们之间相互促进、相互联系,从而形成一个由Lp-PLA 2介导的炎症信号传导通路而加重缺血性脑损伤。

3.4 血浆Lp-PLA 2水平与ACI常见危险因素的相关性分析 已有研究结果表明,Lp-PLA 2活性主要与LDL[10]、性别[11]、种族、铁蛋白水平以及他汀类药物使用有关;国内吴延华等研究发现Lp-PLA 2活性仅与性别有关[12];王大力等研究认为血清Lp-PLA 2水平与性别、年龄、TC、LDLC呈正相关,与HDLC呈负相关;梁江红等研究发现血浆Lp-PLA 2水平与HDLC呈负相关,与TC、LDLC呈正相关,而与性别 、年龄、TG 、吸烟 、高血压 、CRP 均无关[7];国外Elkind等研究认为hs-CRP与Lp-PLA 2水平呈弱相关性(r=0.09,P=0.045)[13];Brilakis等认为女性Lp-PLA 2与超敏C反应蛋白有关[14]。本研究结果显示,血浆Lp-PLA 2水平与性别呈正相关,与国内外研究结果基本一致,女性血浆Lp-PLA 2水平低于男性可能与雌激素水平有关;血浆Lp-PLA 2水平与吸烟、饮酒呈负相关,与年龄、高血压病、糖尿病 、TC 、TG 、LDLC 、HDLC 、Fib 、Lp(a)均无关,与之前研究结果不同,原因可能与样本含量偏小、人群种族差异、饮食结构不同、可能的药物使用有关。

1 Lavi S,Herrman J,Lavi R,et al.Role of lipoprotein-associated phospholipase A 2 in atherosc lerosis.Cur r A therosc ler Rep,2008,10(3)：230-235.

2 王 磊,储照虎.脂蛋白相关磷脂酶A 2与缺血性卒中.国际脑血管病杂志,2009,6(17)：463-466.

3 Oei HH,van derM eer IM,H ofman A,et al.Lipoprotein-associated phospholipase A 2 activity is associated w ith risk of coronary heart disease and ischem ic stroke：the Rotterdam Study.Circu lation,2005,111(5)：570-575.

4 BallantyneCM,Hoogeveen RC,Bang H,et al.Lipoprotein-associated phospholipase A 2,high-sensitivity C-reactive protein,and risk for incident ischem ic stroke in m iddle-aged m en and w omen in the A therosclerosis Risk in Communities(ARIC)study.A rch In tern Med,2005,165(21)：2479-2484.

5 Persson M,Berglund G,Nelson JJ,et al.Lp-PLA 2 activity and m assareassociated w ith increased incidence of ischem ic stroke：a popu lation-based coho rt study from Malmö,Sw eden.A therosclerosis,2008,200(1)：191-198.

6 梁江红,魏麓云,何亚丽.动脉硬化性脑梗死患者血浆Lp-PLA 2水平及临床意义.实用医学杂志,2009,25(14)：2264-2267.

7 王大力,陈瑞英,郑清纯.急性脑梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A 2水平的变化及其意义.中华老年心脑血管病杂志,2009,11(1)：10-11.

8 章兴甫.脑梗死患者血清中炎症细胞因子含量的变化与临床神经功能缺损程度的关系.中国临床医药研究杂志,2008,10(21)：192：7-9.

9 赵常宝,张建斌,王素芳.脑梗死患者炎性细胞因子变化与神经功能缺损的关系.细胞与分子免疫学杂志,2009,25(7)：640-641.

10 李 宁,顾水明,魏 盟.脂蛋白相关磷脂酶A 2在动脉粥样硬化中的作用.国际心血管病杂志,2008,35(4)：212-215.

11 张绍艳,王滨有.老年人血浆脂蛋白相关磷脂酶A 2活性与其基因型、性别和年龄的关系.中国动脉硬化杂志,2007,15(11)：854-856.

12 吴延华,曹勇军,刘慧慧,等.急性脑梗死患者血清脂蛋白相关磷脂酶A 2活性的变化.中华神经科杂志,2008,41(6)：381-382.

13 The LP-PLA 2 Studies collaboration,Ballan tyne C,Cushman M,et al.Collaborative meta-an aly sis of individ ual articipant data from observational studies of Lp-PLA 2 and cardiovascu lar disease.Eul JCardiovasc Prev Rehabil,2007,14(1)：3-11.

14 Brilakis ES,Khera A,M cguire DK,et al.Influen ce of race and sex on lipoprotein-associated phospholipase A 2 levels：Observation from the Dalls H eart Study.A therosclerosis,2008,199(1)：110-115.