茸鹿细管冻精人工输精技术操作规程

修德军

(抚顺市农业科学研究院,辽宁 清原 113300)

1 适用范围

本规程适用于全国各地茸鹿人工输精点结合实际条件应用。

2 人工输精的要求

2.1 输精员必须具有鹿生殖解剖基础理论知识,熟练掌握细管冻精人工输精的各个主要技术环节。输精员应保持个人卫生,指甲剪短磨光,工作服干净整齐,工作期间禁止吸烟,禁止酒后操作。梅花鹿输精员应选择手掌围度小于17cm的人员进行培训。

2.2 人工输精点应设有输精准备室进行细管冻精的保存、解冻操作和质量检验。准备室面积不小于10m2,室温不低于15℃。准备室应保持无尘、无烟、无味、无蚊蝇和无直射阳光,所需设备保持清洁。准备室不宜与兽医室、库房等混用。

2.3 输精准备室应配齐显微镜、恒温载物台、恒温水浴箱、干燥箱、高压灭菌锅、载玻片、盖玻片、细管剪子、镊子、细管输精器、液氮罐等仪器设备。

2.4 对使用器械应及时清洗、消毒,并保存在干净的橱柜内。消毒方法:先用温肥皂水刷除污物,然后用清水冲洗干净,再用蒸馏水冲洗,最后放入纱布袋中蒸汽灭菌30min,亦可用75%酒精棉球擦拭消毒。

2.5 发情母鹿输精前要进行麻醉保定,保定后排除宿粪,清洗外阴部。

2.6 对输精用过的废弃用品(一次性塑料输精手套、输精器外套等)集中收集,严格按照环保要求处理。

3 细管冷冻精液解冻及质检

3.1 鹿细管冻精要求在输精前几分钟内解冻并立即输精。最多不超过15min。

3.2 从液氮罐中迅速取出细管冻精,时间不超过5s,投入恒温水浴箱38℃水中解冻10s,取出后用干净纱布擦去水珠,用手撮动几下使细管中精液混匀、排除气泡备用。

3.3 解冻后的细管冻精应检查精子活力,镜检温度37℃,放大倍数160～400倍。检查活力须在解冻3～5min后精子完全复苏时进行,活力评定应取多视野、多液层平均值。精子活力低于0.3的细管冻精不得使用。

3.4 质检合格的细管冻精装入细管输精器,准备输精。

4 人工输精

4.1 输精时机:发情母鹿在接受试情公鹿爬跨后,经多次试情,至拒绝接受试情公鹿爬跨时,即可麻醉保定输精。同期发情的梅花鹿在取栓后58～60h麻醉保定一次输精。

4.2 输精方法:输精应采用直肠把握子宫颈深部输精法。输精动作要柔和、快捷,做到“轻插、适深、缓注、慢出”。输精枪应用消毒毛巾包裹,防止精液受冷打击。

4.3 输精器必须在无污染的情况下通过阴道进入子宫颈,每输精一次必须更换一只输精器外套或消毒后再用。

5 建立育种档案

建立育种档案有利于规范茸鹿人工授精工作。母鹿配种记录表应每头鹿登记1张,配种时及时认真逐项填写,并长期保存,按时进行统计整理归档。

母鹿配种记录表见下表

母鹿配种记录表

6 受胎率

评定鹿细管冻精配种受胎效果,主要以第一情期受胎率的高低为标准,一般我们也以平均情期受胎率为标准。发情母鹿受精20～25天后不返情即可初步认为受孕。

第一情期受胎率=第一情期受胎母鹿数/第一情期受精母鹿数×100%

平均情期受胎率=总受胎母鹿数/总受精母鹿数×100%

不返情率=不返情数/受精母鹿数×100%