体外累计释放率优化龙牙楤木中物质基础成分齐墩果酸缓释片的工艺研究

陈大忠，于永军，王海龙，王艳红，杨炳友，石朗

(1.黑龙江中医药大学中医药研究院，黑龙江 哈尔滨 150040;2.黑龙江省军区医院，黑龙江 哈尔滨 150001;3.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040;4.黑龙江中医药大学附属第一医院，黑龙江 哈尔滨 150040)

龙牙楤木中物质基础成分齐墩果酸，是在东北道地中药材龙牙楤木中提取、分离后获得的。目前，以胶囊剂剂型在临床上用于治疗黄疸型肝炎、迁延性肝炎、酒精肝和脂肪肝等［1－2］。国内对于齐墩果酸单体缓释制剂有文献研究报道，本实验结合文献对齐墩果酸缓释制剂的研究［3］，采用重复正交实验考察骨架缓释材料的类型、骨架缓释材料的用量、填充剂的种类比例和粘合剂的种类，确定出龙牙肝泰缓释片的最佳工艺。

1 仪器与药品

Waters 600E－2487型高效液相色谱仪(美国);Millennium 32色谱工作站数据处理系统(美国);电子分析天平BS124SGC－06(北京赛多利斯仪器有限公司);乙腈(色谱级);水为重蒸馏水;其他均为分析纯;齐墩果酸对照品(中国药品生物制品检定所);羟丙基甲基纤维素(HPMCK100、HPMCK15、HPMCK4M，上海COLORCON有限公司)。

2 方法与结果

2.1 缓释片累积释放度的测定

2.1.1 色谱条件

色谱柱:Diamonsil C18柱(250mm ×4.6mm，5μm);流动相:乙腈－0.1%磷酸溶液(67∶33)［4］;检测波长:210nm;流速:1.0mL·min－1;柱温:30℃［5］。

2.1.2 累积体外释放度的方法

按照2010年版《中国药典》体外释放度试验法的转蓝法测定，转速100rpm·min－1，释放介质选用0.5%十二烷基硫酸钠溶液［磷酸盐调 pH值为(7.0±0.1)］，温度为(37 ±0.5)℃。分别在 2、6、12h取样5ml(同时补充等体积同温介质)，滤过，精密取续滤液20μl注入液相色谱仪，测定峰面积。再精密称取齐墩果酸对照品适量，加甲醇溶解并稀释制成浓度为0.102mg·mL－1的对照品溶液，精密吸取对照品溶液20μl注入液相色谱仪，外标法测定不同时间的累计释放度。

2.2 正交实验设计重复试验优化缓释片制剂工艺

2.2.1 正交实验设计

根据各单因素对缓释片释放度影响的预考察，针对影响释放度贡献大的4因素，即 HPMC分型(黏度)、HPMC用量、填充剂比例关系和粘合剂的分型，采用3水平正交实验，见表1。

表1 正交实验表因素水平表

表2 缓释片制剂工艺正交实验方案与结果(n=3)

2.2.2 正交实验方案与结果

利用2h、4h和6h三个时间点的累计释放度(Q)作为综合指标，采用公式:Y=Q12h－［(Q2h－30%)2+(Q6h－50%)2］1/2计算综合分值。由于4因素占据了正交实验表L9(34)中的所有列，故9个处方试验中，对每个处方试验进行3次重复试验，对其27次试验数据结果进行统计学分析，结果见表2、表3。

表3 正交实验结果方差分析

根据正交实验分析结果表明，各因素对缓释片制剂释放度影响的大小顺序为:C＞D＞A＞B，由方差分析显著性确定最佳缓释片制剂工艺应为A1B2C3D2，即亲水凝胶骨架材料 HPMCK4M使用量35%，填充剂MCC(微晶纤维素)与乳糖比例为1∶1，粘合剂采用6%PVP(聚乙烯吡咯烷酮)溶液。

3 讨论

3.1 在正交实验设计考察影响缓释片的主要4因素HPMC分型(黏度)、HPMC用量、填充剂比例关系和粘合剂的分型过程中，采用了正交实验表L9(34)试验方案，由于考察的4因素占满了正交表的所有列，误差项空白列缺省。因此，对9个处方试验增加了每个实验重复3次的试验方法，利用误差项SSe作为对照方差分析，结果准确、合理，根据最终确定的最佳制剂工艺，骨架材料的选择与相关文献［6］报道基本一致。

3.2 在正交实验的处方筛选综合评分K值计算参考了法莫替丁缓释片综合评分思想［7］，根据2005版《中国药典》二部的要求，缓释片应在2h释放(Q2)接近30%，6h释放(Q6)接近50%为宜，［(Q2－30)2+(Q6－50)2］1/2反映了2h、6h的释药偏差，二者越小越好;12h释药应大于75%，因此，K=Q12－［(Q2－30)2+(Q6－50)2］1/2越大越好。

［1］杜施霖，迟宝荣.龙牙楤木皂苷对大鼠酒精性肝病防治的作用［J］.吉林大学学报:医学版，2005，31(1):64－67.

［2］吴勃岩，祝司霞，王晶.龙牙楤木叶总皂甙对荷瘤鼠尾变型p53表达的影响［J］.中医药学报，2005，33(1):38－39.

［3］刘亚妮，易以木，陈华庭，等.齐墩果酸缓释片的研制及体外释放度考察［J］.中国医院药学杂志，2008，28(5):345－347.

［4］何文斌，何作民，黄婉锋.HPLC法测定齐墩果酸胶囊中齐墩果酸含量［J］.中国药事，2008，22(6):485－486.

［5］韦建华，李耀华，蔡少芬，等.HPLC法测定柿子中齐墩果酸与熊果酸的含量［J］.中国实验方剂学杂志，2010，16(13):48－50.

［6］祝志贤，梁秋文.苦参碱缓释片的制备及其释放度的研究［J］.广东药学院学报，2008，24(6):569－571.

［7］曾环想，潘三卫，陈济民，等.法莫替丁缓释片的制备工艺及其体外释放特性的研究［J］.中国药学杂志，1997，32(4):213－216.