猪精液稀释和保存试验

王玉祥,谭锡国,金德平,杨开梅

(永胜县畜牧局畜牧站,云南 永胜 674200)

为了更好地推广、普及猪人工授精工作,延长稀释精液的保存时间,2010年 5～9月,笔者选择了 3种稀释液配方和2种保存温度进行猪精液稀释、保存的试验,以供当地生产使用,现将试验结果报告如下:

1 材料和方法

1.1 材料

(1)供试精液:取自永胜县生猪标准化生产核心群种猪场、三川镇希望生态养殖场、三川镇兴旺养殖场、永胜县猪统一供精站(南片)的长白、大约克、杜洛克种公猪。供精猪年龄为 1.5～4.0岁,体质健壮而健康,饲养管理相近,供试鲜精液的活力≥0.8。

(2)稀释液配方:见表 1。

表 1 猪精液稀释液配方

1.2 方法

(1)稀释液配制:稀释液使用前 1 h,用电子秤按500mL蒸馏水剂量分别称量Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ配方中的药品(青、链霉素除外)进行配制。配制好的稀释液分别贴上Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ标签后置于高压灭菌器中进行15 Ib 30min消毒,消毒结束后取出,冷却后加入定量的青、链霉素备用(Ⅲ配方除外)。

(2)精液的采样:从上述猪场(供精站点)中随机抽取种公猪进行采精。

(3)精液的稀释:将采集后的同一公猪精液均匀分成 3份,分别用 3种配方稀释液按 1∶1比例及时进行稀释(一般不超过 30m in),稀释前后精子活力与原精液无显著差异者作保存试验。

采精和精液稀释严格按猪人工授精相关操作技术规程进行。

(4)稀释精液保存:将按各个配方稀释后的精液用一次性精液分装瓶分装,静置 2 h后,分别同时置于常温(15～28℃)和 17℃恒温箱中保存。保存中的稀释精液每间隔12 h轻轻摇动并倒置1次。

1.3 测定项目

(1)精子活力:在 100～200倍镜下观察精液中呈直线运动精子所占的百分比,按 0.1～1.0的十级评分法测定。活力每间隔 12 h测定 1次,测定时需将精液样片置于 37℃的恒温板上。

(2)精子的存活时间:包括精子达 0.5级活力的存活时间和最大存活时间(直至无活动精子为止)。每间隔 12 h观察 1次。

(3)稀释液 pH值:用 pH比色试纸进行测定。

(4)每天作好镜检活力、存活时间、室温等详细记录。

1.4 试验处理

本试验按如下处理进行 8次重复稀释、保存试验。

表 2 各处理保存温度

2 结果与分析

2.1 稀释液 pH值 见表 3。

表 3 稀释液pH值

2.2 存活时间

将 8次重复稀释、保存试验所得的数据进行统计整理后,去掉数值最大和最小 2次试验数据,将其余试验数据整理后进行方差分析,并用SSR(新复极差)法进行差异显著性检验。经检验,T2与 T1间差异极显著,B2与 B1间差异极显著,B2与B3间差异显著,B1与 B3间差异不显著(见表 4)。

(1)稀释保存效果:见表 4、4-1～4-4。

表 4 稀释保存效果 h

(2)0.5级活力存活时间平均数比较:见表 4-1、4-2。

表 4-1 保存温度(T)间平均数比较 h

表 4-2 配方(B)间平均数比较 h

(3)最大存活时间平均数比较:见表 4-3、4-4。

表 4-3 保存温度(T)间平均数比较 h

表 4-4 配方(B)间平均数比较 h

3 结论

(1)在所选的3种稀释液配方中,Ⅱ(B2)配方的稀释液效果最好;保存温度以 17℃保存的效果显著优于常温保存。

(2)Ⅲ(B3)配方系市场上出售的稀释粉成品,虽然取用方便,但成本较高(一般售价在 10元以上),而且每袋开启后需一次性用完,不适于一般的小规模供精站(点)。

(3)试验结果表明:在整个试验处理组中,T2B2的效果最好,即采用Ⅱ(B2)配方稀释后置于 17℃中保存的稀释精液精子存活时间最长,保存 3～4 d仍然可以用于输精,而且费用低廉,比较适合于一般规模的人工供精站(点)使用。