不同分期糖尿病肾病患者血清IL-18、CRP水平的变化及意义

唐 灵，梁志清*，刘树娇，苏桂兰，甄瑞峰

(1桂林医学院附属医院，广西 桂林 541001;2桂林医学院)

大量研究表明，炎症反应在糖尿病肾病(DN)的发生、发展中起重要作用［1，2］。IL-18 是活化的单核/巨噬细胞分泌的一种前炎症因子，与其他炎症因子一起参与炎症的级联反应［3］。有研究表明，IL-18与糖尿病并发症有关［4］。C反应蛋白(CRP)是一种敏感的、非特异性的炎症标志物，其水平的高低与炎症反应的程度有关［5］。2009年10月 ～2010年5月，我们观察了不同分期DN患者血清IL-18、CRP水平的变化，以期为DN的早期诊断提供一定的理论依据。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择在桂林医学院附属医院住院的2型糖尿病(T2DM)患者97例，均符合1999年WHO制定的糖尿病诊断标准，并排除罹患恶性肿瘤、急慢性感染、糖尿病急性并发症、糖尿病以外的继发性肾脏疾病及长期口服噻唑烷二酮类、调脂类药物者。根据尿白蛋白排泄率(UAER)分为3组:正常白蛋白尿组(A组，UAER＜20 μg/min)35例，男16 例、女19 例，年龄(58.16 ±8.81)岁;微量白蛋白尿组(B 组，UAER 20～200 μg/min)30例，男17例、女13 例，年龄(57.71 ±11.43)岁;大量白蛋白尿组(C 组，UAER ＞200 μg/min)32例，男15例、女17例，年龄(54.25±8.37)岁。同期选择该院健康体检者35例作为对照组，男19例、女16例，年龄(56.51±9.40)岁。各组性别、年龄具有可比性。

1.2 方法

1.2 标本采集 所有受试者空腹8～12 h，晨起抽静脉血5 ml，取2 ml采用罗氏全自动生化分析仪检测空腹血糖(FPG)、血脂、肾功能、糖化血红蛋白(HbA1c)、CRP。其中，FPG测定采用葡萄糖氧化酶法;HbA1c测定采用胶体滤过法;TG测定采用GPOPOD酶法;TC测定采用胆固醇氧化酶法;HDL-C测定采用直接一步法;LDL-C测定采用过氧化氢酶清除法;血肌酐(SCr)测定采用苦味酸法;尿素氮(BUN)测定采用脲酶紫外速率法;CRP测定采用免疫比浊法。以上试剂均采用Roche配套试剂。另取静脉血2～3 ml静置1 h后，3000 r/min离心5 min，分离血清，标记后贮存于－76℃低温冰箱，采用ELISA法测定血清IL-18。试剂盒由上海西唐生物科技有限公司提供。连续3 d收集24 h尿，根据24 h尿量计算UAER，测量3次取平均值。采用高效免疫比浊法检测尿微量白蛋白。

1.3 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件，计量资料以表示，各组指标比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD和SNK检验;相关性采用Pearson相关分析。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组临床资料比较 见表1。

2.2 IL-18、CRP相关影响因素分析 Pearson相关分析显示，IL-18、CRP均与糖尿病病程、收缩压、HbA1c、FPG、TG、TC、LDL-C、BUN、SCr、UAER 呈正相关(rIL-18分别为 0.766、0.628、0.568、0.388、0.375、0.400、0.512、0.516、0.698、0.792;rCRP分别为 0.777、0.701、0.416、0.327、0.308、0.307、0.449、0.611、0.817、0.893，P 均 ＜ 0.01)，与 HDL-C 呈负相关(rIL-18= －0.652、rCRP= －0.546，P 均 ＜0.01)，且两者互呈正相关(r=0.890，P ＜0.01)。

表1 各组临床资料比较()

注:与对照组比较，△P ＜0.01;与 A组比较，▲P ＜0.01;与 B 组比较，★P ＜0.01

组别 n糖尿病病程(年) BMI(kg/m2) 收缩压(mmHg)舒张压(mmHg)FPG(mmol/L) HbA1c(%) TG(mmol/L) TC(mmol/L)HDL-C(mmol/L)对照组 35 — 23.68±1.67 125.28 ±7.03 72.88 ±6.92 4.99±0.38 4.93 ±0.38 1.20 ±0.21 2.99 ±0.43 2.55 ±0.56 A 组 35 2.34±1.19△ 23.16±1.62 127.16 ±7.40 74.63 ±5.39 7.99±1.93△ 8.32±1.29△ 2.58±0.93△ 2.58±0.94△ 2.58 ±0.95△B 组 30 6.56±2.16△▲ 23.27±1.78 130.00 ±9.37 73.88 ±4.89 8.19±2.02△ 8.24±1.58△ 2.62±1.11△ 3.99±1.19△ 1.12 ±0.36△C 组 32 17.41±2.61△▲★ 23.24±1.54 149.47 ±2.05△▲★75.63 ±5.27 8.39±1.93△ 8.37±1.02△ 2.63±0.93△ 4.22±1.05△ 0.98 ±0.33△组别 n LDL-C(mmol/L) BUN(mmol/L) SCr(μmmol/L) UAER(μg/min) IL-18(pg/ml) CRP(mg/L)对照组 35 2.34 ±0.26 5.20 ±0.93 70.27 ±10.89 8.02 ± 2.26 104.24 ±13.56 1.57 ±0.42 A 组 35 2.58 ±0.96△ 2.58 ±0.97 2.58 ± 0.98 2.58 ± 0.99 142.12 ±13.90△ 3.12 ±0.85△B 组 30 4.02 ±0.91△ 5.12 ±0.81 74.65 ± 9.57 92.99 ± 36.29△▲ 170.01 ±15.84△▲ 8.27 ±1.70△▲C 组 32 3.96 ±0.61△ 7.73 ±1.14△▲★ 254.73 ±68.17△▲★539.80 ±120.22△▲★ 212.41 ±15.88△▲★ 16.70 ±2.45△▲★

3 讨论

DN是糖尿病一个重要的微血管并发症，已成为终末期肾病最主要的原因之一。近年来，炎症因子和脂肪细胞因子在DN发生、发展中的作用受到重视。IL-18作为一种前炎症因子，参与了炎症的级联反应，可作为DN进展的一个预测因子。其参与DN发展的机制:①可促进近曲小管上皮细胞转分化，通过NF-κB胞内信号转导途径诱导近端肾小管上皮细胞转分化;②能调节肾小球系膜细胞的有丝分裂，促进其产生和释放前列腺素，进一步引起肾小球微血管改变，在早期肾小球滤过率增高中起非常重要的作用;③可通过巨噬细胞的渗入和活化的另一途径加重肾小球的损伤;④可导致IL-8、IL-1β、细胞间黏附分子-1等其他前炎症因子的产生，且可上调细胞间黏附分子-1及内皮细胞的凋亡。本研究表明，IL-18随着UAER的增加逐渐增高，提示IL-18与DN的发生、发展密切相关;糖尿病患者血清IL-18水平高于对照组，且与病程、收缩压、HbA1c、FPG、TG、TC、LDL-C、BUN、SCr、UAER 呈正相关，与 HDLC呈负相关，这些变量均与胰岛素抵抗有关，可见IL-18与糖尿病的发生及胰岛素抵抗有关，与国外研究结果一致［6］。

CRP是糖尿病时参与炎症反应最主要的蛋白之一，也是最敏感的指标之一。DN是一种低度炎症反应性疾病，慢性炎症反应常通过多种途径致肾脏损伤。Mojahedi等［7］研究发现，DN患者的UAER随病程的增加而升高，血清CRP水平相应升高。其CRP升高的机制可能为:①胰岛素可阻断肝脏合成CRP和纤维蛋白原，出现胰岛素抵抗或胰岛素敏感性降低后，胰岛素的生理作用下降，导致血清CRP水平升高;②胰岛素发生抵抗后，TNF表达和合成明显增加，导致肝脏合成CRP增多，并通过抑制胰岛素酪氨酸激酶活性而加重胰岛素抵抗，进一步促进炎症因子产生。肾脏细胞在病理状态下可产生CRP、TNF和IL-6等多种炎症因子，这些因子相互作用引发机体的氧化应激，使LDL氧化为ox-LDL，后者可直接损伤肾小球内皮细胞。Hotta等［8］认为，糖基化的终末产物结合于肾脏特异性细胞表面受体，诱导IL-6、TNF-α等细胞因子的生成，进而刺激肝脏合成，从而启动慢性炎症反应，造成肾小球系膜过度氧化、刺激细胞增殖、系膜增厚等肾功能损害，而CRP本身可直接作用于肾小球小动脉，加重肾小球高滤过高灌注状态，引起肾脏损伤。本研究结果表明，糖尿病患者血清 CRP水平高于对照组，提示T2DM患者存在低度炎症反应状态;且其血清浓度随着UAER的增加而逐渐增高，提示CRP参与DN的发生、发展有关，与国内外研究结果一致。

综上所述，我们认为血清IL-18、CRP通过促进炎症反应，加速DN的发展，两者联合检测有助于DNA的早期诊断。

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