灵芝酸的研究进展

马友龙， 张学成， 祁海艳， 胡大为

(承德医学院附属医院， 河北 承德 067000)

灵芝［Ganodermalucidum(Curtis：Fr)Karst］是一种珍贵的药用真菌，属于担子菌门(Basid iomycoya)，灵芝科(Ganodermataceae)，灵芝属(Ganoderma P.karst)。其中以灵芝(G.lucidum)(又名红芝、赤芝等)和紫芝(G.japonicum)(即中国灵芝)的药理价值最高，被视为珍贵的中药材［1］。直至20世纪80年代，Kutoba等［2］首次从灵芝中分离得到三萜类灵芝酸A、B以来，有关灵芝酸的分离、纯化及药理活性研究一直是灵芝研究的重要内容，研究表明灵芝酸有强烈的药理活性，有止痛、镇静、抑制组织胺释放、解毒、保肝、毒杀肿瘤细胞等功能，是灵芝的主要有效成分之一。本文仅对其组成、结构、药理活性等作一综述。

1 灵芝酸的组成、结构

Kutoba等［2］在1982年首次从灵芝的子实体中分离得到三萜类灵芝酸A(ganoderic acid A)和灵芝酸B(ganoderic acid B)，1988年从灵芝属中分离得到103种三萜类新化合物。灵芝酸的前体物质是由二分子的焦磷酸合欢酶(FPP)尾接尾缩合成前鲨烯酯，经闭环转位成各种三萜类化合物，为高度氧化的羊毛甾烷类衍生物，按分子中碳原子数可分为C24，C27，C30三大类。灵芝酸的结构中，环上的双键大多位于△8(9)位，大部分在C11和C21位有羰基，而且在C3、C7和C15位也大多被羰基或羧基所取代。而在三萜醇、醛和过氧化物的结构中环上大多存在两个不饱和双键，其位置在△7(8)和△9(11)位，C11和C23位也不存在羰基且环上的取代基明显减少。根据所含功能团和不同侧链可分为灵芝酸(Ganodericacid)，赤芝酸(Lucidericacid)，灵芝醇(Ganoderiol)，灵芝内酯(Ganolactone)等其基本骨架。

2 灵芝酸的药理活性

2.1 降低胆固醇：灵芝酸可抑制胃肠道吸收食物中的胆固醇，同时抑制胆固醇合成过程中的限速酶－3－羟－甲戊二酸单酰辅酶A(HMG－CoA)还原酶，并因此而抑制胆固醇合成。

2.2 护肝排毒作用：Hirotani等［3］的药理学实验认为G.capense中的灵芝酸提取物能增强肝功能，加强其解毒作用，促进肝炎小鼠肝的再生，降低甘油三酯的合成;杨依珍等研究证明，灵芝三萜类化合物对小鼠急性肝障碍的排除有促进作用。

研究表明［4］，灵芝总三萜GT和其组分GT2均可明显降低模型动物的血清ALT和肝脏TG含量，对动物肝损伤具有不同程度的减轻，表明灵芝三萜类化合物GT和GT2均有明显的保肝作用。章国良和林志彬(1998)报道，肝细胞在体外可经特异性细胞因子及脂多糖(LPS)协同诱导，持续大量地生成NO。灵芝三萜类可能由于抑制了这种诱生型NO的生成而抑制了ALT活力，提示灵芝三萜类成分的肝保护作用可能与其抑制NO生成有关。

2.3 抑制组胺释放：Kohda等［5］报道灵芝酸C和灵芝酸D在体外对Con A诱导的大鼠肥大细胞释放组胺有抑制作用，药物浓度在0.4μg/mL时抑制率分别为30%和15%。

2.4 镇静、止痛：Koyama等［6］经分离提纯得到4个具有镇痛活性的灵芝三萜类化合物：灵芝酸A，B，G和H。能够减少由乙酸引起的小鼠扭体反应，按剂量3－5mg/kg给药可产生较好的镇痛效果。

2.5 抗艾滋病病毒作用：EI－Mekkawy等［7］从灵芝子实体甲醇提取物中分离得到一种高度氧化的三萜类化合物，命名为Canodericacid α，同时得到的12种三萜类化合物中部分具有抗人获得性免疫缺陷综合症病毒(艾滋病病毒)HIV－1型病毒的特性。Min等［8］从灵芝孢子中分离出 Canodericacid β，Canodericacid β 与灵芝酮二醇(Ganodermanondiol)、灵芝酮三醇和赤灵芝酸A均能显著抑制HIV－1型蛋白酶的活性。

2.6 抗肿瘤作用：Gao等［9］从灵芝子实体中分离出十种羊毛甾烷型三菇类化合物，经药理证实，lucialdehydes B，lucialdehydes C，ganodermanonol和 ganodermanondiol对Lewis型肺癌细胞(LLC)，T－47D细胞以及恶性毒瘤5180细胞具有细胞毒作用;其中lucialdehydes C 对 LLC，T－47D，S－180 细胞和 Meth－A 肉瘤细胞的杀伤力最强，Wu等［10］从灵芝子实体乙醇提取液分离出六种三菇类化合物，药理学实验表明，lucidenic acid N，lucidenic acid A和灵芝酸(ganoderic acid)E对肝癌细胞Hep G2和Hep G2.2.15及肿瘤细胞P－338具有显著的细胞毒作用。

结合文献，已知灵芝酸抗肿瘤作用机制通过以下途径：①免疫调节作用，现代研究表明［11］，机体抗肿瘤机理主要依赖于细胞免疫功能，而担负细胞免疫功能的细胞主要是体内的T细胞和NK细胞。NK细胞是一种不依赖胸腺、抗体和补体就能直接杀伤肿瘤的细胞，其活性的增加可抑制肿瘤生长和转移。NK细胞在机体防御及肿瘤监视中起重要作用。NK细胞对敏感靶细胞的杀伤效应不受靶细胞是否表达MHC的影响。当予以生物反应调节剂全身或局部治疗或在病毒感染期间，实体组织中NK细胞明显增多，在监视体内微环境并干涉肿瘤的发展起到重要作用。灵芝酸发酵液抗肿瘤作用与激活NK细胞有着密切关系。许多因子如IL－2、IFN－γ可激活NK细胞杀伤肿瘤靶细胞，活化的NK细胞可释放许多细胞因子如 IFN－γ、IL－2、TNF－α、GM－CSF，呈正性调节作用，调节巨噬细胞的功能扩大抗瘤谱。另外，NK细胞是获得性细胞免疫的核心调节细胞，肿瘤浸润的NK细胞(TNK)对产生肿瘤特异的CTL至关重要。②抑制拓扑异构酶的活性，陈陵际等［12］最近研究表明，灵芝精粉和孢子粉混合物(MLGLGS)对拓扑异构酶(topoisomerases，TOPO)Ⅰ和Ⅱ有明显的酶活性抑制作用，由于DNA的超螺旋程度影响着机体的活动，而拓扑异构酶的作用正是调控DNA的空间构型，由此DNA拓扑异构酶已成为抗肿瘤药物作用的重要靶点。因此MLGLGS对TOPOⅠ和TOPOⅡ的抑制可能是其抑制肿瘤细胞生长的作用机制之一。③对蛋白金合欢酯转移酶的抑制作用，位于ras癌蛋白羧基末端四肽中的半胱氨酸残基，可在蛋白金合欢酯转移酶(FPT)的催化下实现蛋白翻译后的金合欢酯化修饰，该过程为ras癌蛋白的细胞转化和细胞膜连接的必需步骤。已证实FPT抑制剂能抑制ras依赖的细胞转化。Ras原癌基因家族编码Mr21000蛋白质，野生型和突变型ras需要定位在质粒膜上才能表现出相应的生物学活性，这一过程伴随有金合欢酯残基的附着。许多蛋白质包括很多小分子的GTP结合蛋白的羧基末端表现为戊二烯酯化修饰，但是 ras基因家族成员(ki－ras，Ha－ras和 N－ras)，rho B，核纤层蛋白A和B，转运蛋白和其他几种蛋白却表现为金合欢酯化修饰［13］。Lee等分离出灵芝酸A和C，它们是FPT的底物法尼基焦磷酸的竞争性抑制物，因此对FPT有抑制作用。④诱发细胞凋亡，细胞凋亡又称程序性细胞死亡(programmed cell death，PCD)，是细胞受到生理或病理信号刺激后通过启动自身内部机制，主要是通过内源性核酸内切酶激活而发生的细胞死亡过程［14］。是一种不同于细胞坏死的，由细胞内的基因编制程序控制的细胞生理性死亡方式。灵芝能提高机体免疫功能，灵芝多糖和灵芝总提取物都能够刺激机体产生干扰素－γ(IFN－γ)和肿瘤坏死因子α，诱导癌细胞凋亡［15］。⑤抑制癌细胞端粒酶，端粒是染色体末端的一段特殊结构，随着细胞的不断分裂，端粒逐渐缩短。端粒长度一旦缩短到一定水平，细胞就会衰老死亡，这是正常的细胞生命周期。癌细胞中含有一种叫做端粒酶的核糖核蛋白，它能保护端粒在细胞分裂过程中不被损耗，使癌细胞具有无限增殖能力。上海大学生命科学院用聚丙酰胺凝胶电泳检测端粒酶活性，结果表明，“中华灵芝宝”对肝癌细胞端粒酶具有明显抑制作用。

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