Graves病患者Th1/Th2趋化因子失衡的初步探讨

崔巧丽 樊继援 邱明才

Graves病（GD）是临床常见的自身免疫性甲状腺疾病，确切的发病机制尚不清楚。目前认为GD的发生与Th细胞的增殖和极化异常导致Th1/Th2细胞平衡失调有关，但结论并不一致。趋化因子独特的趋化特性在淋巴细胞向甲状腺组织浸润的过程中发挥了重要作用[1]。因此本研究通过检测血清Th1/Th2趋化因子CXCL10和CCL22水平，从趋化因子角度初步探讨GD患者机体免疫平衡的偏离及其在GD发生机制及病情演变中的作用。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择2009年4月—2010年2月我院内分泌科的门诊患者，按GD诊断标准进行筛选[2]，并除外常见炎症及免疫性疾病后共纳入GD患者76例。根据就诊时的治疗阶段进行分组，包括治疗前组（初发或复发未治疗的患者）34例，男13例，女21例，平均年龄（40±11）岁；治疗缓解组（缓解组）22例，为抗甲状腺药物（ATD）治疗2～6个月，甲状腺功能正常，症状消失的患者，其中男11例，女11例，平均年龄（41±13）岁；治疗平稳组（平稳组）20例，ATD治疗1年半以上未停药，甲状腺功能正常半年以上的患者，男12例，女8例，平均年龄（41± 14）岁。选择同期健康查体者15例作为对照组，男7例，女8例，平均年龄（39±10）岁。各组间性别（χ2=2.27）与年龄（F= 1.713）比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。

1.2 方法 收集相关临床资料并取清晨空腹肘正中静脉血5 mL，其中3 mL送本院检验科用化学发光法测定游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）和游离甲状腺素（FT4），放免法测定甲状腺球蛋白抗体（TGAb）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）和促甲状腺激素（TSH）结合抑制免疫球蛋白（TRAb）。2 mL离心后血清置于-80℃保存，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法成批检测血清CXCL10和CCL22水平，试剂盒购自R&D公司，按照产品说明书进行操作。

1.3 统计学分析 采用SPSS 11.5软件进行资料分析。非正态分布计量资料用M（P25，P75）表示并进行非参数秩和检验。其中2组间比较采用Mann-Whitney U检验；多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验；相关分析采用Spearman秩相关。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同阶段GD患者趋化因子比较 GD患者血清CXCL10和CCL22水平在治疗前组明显高于其他各组，差异有统计学意义（P＜0.001）。治疗缓解组低于对照组（均P＜0.01）。治疗平稳组患者血清CXCL10、CCL22水平与对照组比较差异无统计学意义。GD患者血清CXCL10和CCL22水平的比值在治疗前组亦明显高于治疗后各组（均P＜0.001），治疗后各组这一比值与对照组比较，差异无统计学意义，见表1。

表1 不同病程GD患者血清CXCL10和CCL22比较 [M（P25，P75）]

2.2 治疗前组趋化因子与甲状腺功能、自身抗体的关系 治疗前组34例患者血清FT3、FT4、TRAb、 TGAb及TPOAb水平分别为（25.63±11.00）pmol/L、（72.14±33.93）pmol/L、27.9（9.8，40.0）IU/mL、17.46（2.61，54.12）%及25.8（8.6，50.6）IU/L。血清CX⁃CL10和CCL22均与FT4水平呈正相关（均P＜0.05），其余均无明显相关性（P＞0.05），见表2。

表2 GD患者血清趋化因子及其比值与甲状腺功能、甲状腺抗体的相关分析 （rs）

3 讨论

趋化因子又称趋化性细胞因子，是一类具有趋化活性的蛋白分子，其表达类型和量的差异可反映机体Th1/Th2细胞的免疫平衡。本研究所检测的CXCL10又称干扰素诱导蛋白10（IP-10），主要由干扰素（IFN）-γ诱导表达，与CXCR3特异性结合，是Th1淋巴细胞的强力募集者，参与Th1介导的细胞免疫反应。而CCL22又称巨噬细胞来源的趋化因子（MDC），与Th2细胞表面的受体CCR4结合，是Th2淋巴细胞的募集者，参与体液免疫[3-4]。

GD患者甲状腺组织IP-10与人正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）表达增强，其甲状腺滤泡细胞（TFC）可经IFN-γ诱导表达IP-10的mRNA，且与IFN-γ的mRNA水平呈正相关。于培养TFC的上清液中测得高水平的IP-10蛋白，同时IP-10的结合受体CXCR3在患者甲状腺浸润性淋巴细胞中表达增加，阳性率高于自体外周血[5]。在GD初期外周淋巴细胞CXCR3（Th1细胞特异）表达及血清中其配体CXCL10水平均显著增加，同时CCR4（Th2细胞特异）的配体TARC水平亦升高。而经甲巯咪唑治疗3个月和6个月后均观察到CXCL10和TARC水平的逐渐下降，CXCR3/CCR4比值随病情的进展亦逐渐降低，因此认为他巴唑治疗后免疫平衡优势由Th1向Th2转变[6]。

本研究中GD患者血清CXCL10和CCL22水平在治疗前显著升高，Th1/Th2趋化因子的比值CXCL10/ CCL22也明显高于治疗后患者，提示趋化因子参与了GD发生的免疫调控，Th1、Th2细胞所介导的异常活跃的免疫应答共同参与了GD的发病，在病情活动期以Th1细胞免疫反应占优势。这一结果与目前大多数学者认为的GD Th细胞的偏移有阶段性变化，可能早期向Th1方向极化，后期以Th2极化为主是一致的[1]。

本研究表明，治疗后GD患者血清CXCL10、CCL22水平明显下降，治疗缓解组甚至低于对照组，而随着进一步的治疗，在治疗平稳期患者有所回升，与对照组相近，并未观察到既往研究报道的血清CCL22水平随CXCL10的下降而逐渐升高的趋势[6]，笔者认为可能与治疗方案的不同有关。上述报道中GD的治疗即抗甲状腺药物应用，以糖皮质激素治疗为排除标准，而本研究中，大部分患者依据高代谢症状、甲状腺肿大及突眼程度、合并甲状腺功能亢进性肝损害、白细胞减低等情况而加用口服糖皮质激素的治疗。国外有关GD与毒性结节性甲状腺肿趋化因子水平比较的研究一致认为，血清CX⁃CL10水平取决于自身免疫炎症反应进程而与甲状腺功能高低无关，而糖皮质激素对机体自身免疫反应的影响是毋庸置疑的[7]。因此，糖皮质激素可能通过调节自身免疫平衡，促进机体免疫紊乱的恢复而有利于GD的治疗。

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