妥布霉素滴眼液中抑菌剂含量分析

(重庆市药品检验所，重庆 401121)

滴眼液中的抑菌剂有细胞毒性，长期使用可造成眼表组织损伤，并降低眼睛对滴眼液的耐受性。但为了保持药效的稳定性和控制反复使用时微生物的污染，大多数滴眼液中都含有抑菌剂，其中最常见的是羟苯乙酯和苯扎氯铵。为考察市场上妥布霉素滴眼液中抑菌剂的添加情况，我所于2009年收集到国内生产的妥布霉素滴眼液54批、复方妥布霉素滴眼液1批，并用高效液相色谱法测定其抑菌剂含量。现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent1100型高效液相色谱仪。妥布霉素滴眼液54批、复方妥布霉素滴眼液1批(分别来源于信谊药厂等18家生产企业);羟苯乙酯、羟苯丙酯、苯扎氯铵对照品(中国药品生物制品检定所);苯扎溴铵对照品(用重庆渝生药厂提供的原料代替，含量为98.5%);乙腈(色谱纯)，其他试剂(分析纯)。

2 方法与结果

根据各厂家提供的处方资料，所含抑菌剂主要有羟苯乙酯、羟苯丙酯、苯扎氯铵和苯扎溴铵。依据有关参考资料，采用高效液相色谱法，色谱柱为C18柱，流动相为70∶30的乙腈－5 mmol/L醋酸铵[含1%三乙胺，用冰醋酸调pH至(5.0±0.5)]，检测波长262 nm，考察了上述4种抑菌剂的出峰分离情况。结果羟苯乙酯、羟苯丙酯、苯扎氯铵和苯扎溴铵均能完全分离(图1)。

由图1可见，苯扎氯铵和苯扎溴铵峰形不是很好。查阅有关标准得知，妥布霉素滴眼液(JX20010404)、布林佐胺滴眼液(JX20010359)、盐酸多佐胺滴眼液(JX20000532)及酮咯酸氨丁三醇滴眼液(JX20010382)等进口注册标准中苯扎氯铵的检测均采用氰基柱，故将色谱柱由C18柱换成氰基柱。结果苯扎氯铵和苯扎溴铵的峰形得到较大改善，但羟苯乙酯和羟苯丙酯出峰时间基本相同(图2)。

图1 色谱柱为C18柱时的高效液相色谱图

图2 色谱柱为氰基柱时的高效液相色谱图

通过考察，最终确定用C18柱进行抑菌剂的初筛以及羟苯乙酯、羟苯丙酯的定量检测，用氰基柱对苯扎氯铵和苯扎溴铵进行定量检测。55批样品的定性和定量考察结果见表1。

表1 妥布霉素滴眼液抑菌剂考察结果表

3 讨论

各生产企业产品的抑菌剂用量均在常规用量范围内。从抑菌剂实际检测量与标示量的偏差来看，按照美国药典，药品生产过程中的抑菌剂含量上限应不超过标签中标示量的20%，生产和分析的允许偏差为±20%。按此要求判断，18家生产企业的绝大部分产品的抑菌剂用量控制得较好，但个别厂家抑菌剂用量波动较大，小部分企业在抑菌剂的加入与否以及加入量的控制上随意性较大，生产过程中的控制管理还是存在一定问题。

过去，我国在药品研发、生产和质量检查全过程中一般很少对滴眼剂的抑菌剂进行研究、评价和控制，2005年版《中国药典(二部)》对部分剂型如注射剂使用抑菌剂作了规定[1]，而英国药典(2007年版)、美国药典30版对滴眼剂中抑菌剂的使用、效力及含量测定均作出了具体规定。滴眼液中抑菌剂对眼表的损害日益引起眼科临床工作者的重视，抑菌剂可破坏泪膜外侧的脂质层，还可损害角结膜细胞。防腐剂的这种负面影响可能会一定程度地抵消药物的治疗作用。因此，有必要通过选择抑菌剂品种和控制用量来减少抑菌剂的不良反应;同时检测滴眼剂中防腐剂，也是判断其生产是否按规范进行的一个有效的补充控制手段。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:化学工业出版社，2005:2.