犀牛感染停乳链球菌病例

刘 燕，应月青，夏茂华，赵 京，杨明海，原 蕾，张成林

（1.北京动物园，北京 西城100044；2.北京市产品质量监督检验所，北京 朝阳100026）

2009年底，本园1只独角犀牛出现跛行。大约两个月后，卧地不起。两周后死亡。剖检见关节腔内有大量积液。积液涂片染色见到成链排列的革兰阳性球菌。后经培养鉴定为停乳链球菌类马亚种（Streptococcusdysgalatiae），具体情况介绍如下。

1 发病情况

2009年10月初发现该独角犀牛“邦蒂”行走时双后肢明显异常，表现为双蹄抬起时不能正常向前而是朝对侧运步，导致双蹄互相磨蹭，且站立时后躯不稳，左右摇晃，后肢收于腹下。到10月24日站立时疼痛表现非常明显，经常因后肢不能负重，转弯时致后躯卧倒。双前肢也逐渐出现疼痛现象，不能正常迈步，卧地后起立困难。从11月初起病情急剧恶化，很难站立，几乎每走一步都会摔倒，长时间卧地。浑身皮肤多处在地面磨损出血，很难自行吃食。几日后已经不能站立，总是左侧卧，偶尔前肢能把身体前半部抬起，但不能完全站立起来，头部大部分时间靠在地上，呼吸急促。试图采取输液等积极治疗措施，但由于头部活动幅度较大，人员不能靠近，输液没有成功，仅采血检查。次日凌晨死亡。

2 剖检变化

胃黏膜出血，肝囊肿，心肌坏死，肾脏坏死，阴道黏膜肿瘤，子宫黏膜肿瘤，陈旧性下颌瘘，双后肢趾间皮肤破损并出血。四肢肌肉筋膜下有淡黄色胶冻样组织和大量清亮透明液体；部分肌肉颜色较淡。右前肢肘关节关节面凸侧软骨粗糙不完整；左侧股骨头局部磨损严重；双后肢跗关节关节囊内有浑浊的液体。

3 病原菌分离与鉴定

3.1 分离培养 抽取死亡犀牛关节腔液，经革兰染色并镜检。病料接种于血液琼脂平板，于37℃条件下培养24～48h。关节腔液经革兰染色见到大量成链革兰阳性球菌。该菌经培养形成圆形、光滑、凸起、有β溶血环的菌落，镜检为阳性球菌，成双、单个或者短链排列。

3.2 生化特性鉴定 挑取纯化的细菌的单个菌落分别做氧化酶、触酶、糖发酵等试验，鉴定其生物学特性。触酶（－），CAMP（－），β葡萄糖醛酸苷酶试验（＋），马尿酸钠（－），6.5%耐盐试验（－），杆菌肽耐药试验（－），V－P（－）。根据该生化试验结果初步判定为停乳链球菌。

3.3 半自动鉴定系统鉴定 根据染色结果、氧化酶和触酶试验结果，选择合适的法国梅里埃公司API细菌鉴定系统试剂条进行鉴定。本菌株为触酶阴性的阳性球菌，选择APISTREP鉴定试纸条进行鉴定。鉴定结果为停乳链球菌类马亚种（Streptococcusdysgalatiae），鉴定百分率为98%。

3.4 动物试验 将本菌培养24h的新鲜肉汤培养液，调整菌浓度至109CFU/mL。选取0.1mL、0.2 mL和0.5mL 3种浓度，分别腹腔注射体重20g左右的小鼠，每种浓度注射3只小鼠。对照组的3只小鼠注射0.2mL无菌肉汤。除对照组小鼠外，其余均于48h内死亡，。并从死鼠心血分离到该菌。

4 结果与讨论

独角犀牛是世界上濒临灭绝的动物，现全球仅存2 200余头，大部分生活在印度。本园独角犀牛“邦蒂”，雌性，1978年10月出生，现年31岁。由于其年龄偏大，跗关节感染链球菌后导致左侧股骨头局部坏死引起痛疼，伴随年老造成运动减少，卧地时间过长、体重过大压迫呼吸循环系统功能不畅，最终导致死亡。停乳链球菌属于兰氏C群链球菌，较多地感染兽类，可以导致猪、牛、马、犬、禽脓肿、心内膜炎及乳腺炎等等。从珍稀野生动物体内分离到停乳链球菌的病例比较少见。