李亘松,罗 丹,李 森,邓 欣,王 洋
(中国医科大学1.基础医学院生理学教研室、2.机能实验中心,3.附属第一临床医院神经内科,辽宁沈阳 110001)
我们以前对家兔的研究观察到了静脉输注AngⅡ对心率变异(HRV)的影响,但其具体机制并不清楚,我们推测循环血中的AngⅡ可能是通过其使压力反射发生重调定作用来影响HRV的[1-3]。本研究用苯肾上腺素(PE)产生升压作用所引起的反射性心率降低,检测压力反射的功能,并通过AT1受体阻断剂氯沙坦(LOS)来消除AngⅡ对压力反射的影响,分析AngⅡ对大鼠心率变异的影响机制及与压力反射的重调定作用和AT1受体的关系。
1.1 动物 普通♂Wistar大鼠,体质量300 g,中国医科大学实验动物中心提供。
1.2 实验过程及分组
1.2.1 动物处理 大鼠给予12 h∶12 h光照-黑暗周期,室温,单笼饲养,自由进食,数据采集在8:00~12:00之间进行。
1.2.2 手术 用20%的氨基甲酸乙酯(6.5 ml·kg-1,ip)麻醉,仰卧位固定,沿血管走行方向切开皮肤3~4 cm,用止血钳分离筋膜和肌肉,显露股动静脉。
1.2.3 股动、静脉插管 在外科显微镜下,结扎游离股动脉的远心端,用眼科剪在靠近结扎线处剪开股动脉,将动脉插管向心端插入并结扎和固定动脉与动脉插管,静脉插管操作同上,温度37℃。
1.2.4 压力反射的检测 静脉注射PE分4次剂量为4、10、15、20 mg·g-1。间隔2~3 min/次,第4次注射结束20 min后再进行另一种药物的注射(PE代谢完全需20 min)。取各剂量血压变化的峰值与对应的心率值作线性回归分析,静脉注射前的HR值代入方程式求得的平均动脉压(MAP)就是该药物的压力反射调定点。
1.2.5 分组 ①实验组(n=10),PE注射结束后20 min,股静脉注射5%的葡萄糖(GS)3 ml·kg-120 min,然后股静脉注射AngⅡ(20 ng·kg-1·min-1)15 min时进行压力反射的检测。②AT1受体阻断组(n=10)作为对照组,PE注射结束后20 min,股静脉注射LOS(5 g·g-1)20 min,然后股静脉输注AngⅡ(20 μg·g-1)15 min时进行压力反射的检测。
1.3 血压及心电图(ECG)检测 股动脉逆血流方向用静脉留置针与压力换能器相连,并将压力换能器接入Powerlab 4/25生物信号采集系统,测量血压。采样参数:采样率,1 kHz/s;范围,10mV;低通,2 kHz;高通,直流。每首次注射PE前5 min的ECG数据,用HRV分析软件进行数据分析。
与手术后基础状态相比,对照组,压力反射曲线向右上方移动,其调定点有升高的趋势,但差异无显著性(P>0.05);压力反射性心率曲线斜率的变化差异没有显著性(P>0.05),见Tab 1。然而实验组(静脉输注GS和AngⅡ组)调定点变化的幅度值明显大于静脉输注LOS和AngⅡ组,结果差异有统计学意义(11.50±5.12 vs-5.62±6.04,P<0.05),见Tab 1。
Tab 1 Baroreflex response to AngⅡor LOS injection(±s,n=10)
Tab 1 Baroreflex response to AngⅡor LOS injection(±s,n=10)
*P<0.05,AngⅡ(CG)vs AngⅡ(EG).CG:control group;EG:experimental group;△change parameter.
Group Factor mmHg CG△Slope /beats·min-1·mmHg-1△Setpoint/ infusion -0.25±0.13 11.50±5.12 LOS injection -0.03±0.01 -7.37±4.19 AngⅡinfusion -0.08±0.05 -5.62±6.04* EG GS injection -0.54±0.17 -1.98±2.96 AngⅡ
我们以前的研究结果显示静脉输注AngⅡ时,心率变异(HRV)的SDNN(心动周期的标准差)、RMSSD(心动周期差值的均方根)、TP(总功率)和HF(高频功率谱)较对照组明显降低,而LF(低频功率谱)和LF/HF(低频/高频)的比值明显升高,结果差异有显著性。同时我们也使用神经节阻断剂(溴化六烃季胺)阻断中枢自主神经系统活动,证明了AngⅡ是通过中枢机制影响HRV的(资料没有显示)。
由于AngⅡ使压力反射性心率的重调定作用的中枢作用位点还没有定论[4-5],所以本研究使用能够通过大鼠血脑屏障的LOS来阻断静脉输注AngⅡ对压力反射的影响,观察AngⅡ通过压力反射的重调定作用对大鼠心率的调节作用。我们的结果显示静脉输注AngⅡ后,压力反射的调定点发生了重调定,反映心迷走神经紧张性的HRV指标降低,而注射LOS后,MAP-HR曲线几乎没有发生移动,说明阻断AT1受体后,AngⅡ所致的压力反射重调定作用消失,对HRV的影响也消失。因此,AngⅡ在血循环中对大鼠心率以及心率变异的影响可能是在AT1受体介导下通过对大鼠压力反射性心率的重调定作用实现的。
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