复方雷公藤汤对肾病大鼠血液系统减毒作用的实验研究*

李 波 宋顺鹏 史月君

辽宁省大连市皮肤病医院(辽宁大连116021）

雷公藤治疗作用广泛，疗效独特，毒性甚大。本研究综合中医相杀、解毒、佐制、调和、扶正配伍诸法，结合雷公藤毒性靶标选取药物，组成复方雷公藤汤，拆方实验干预肾病综合征，探讨配伍减毒增效的可行性，筛选最佳药物组合。减毒以血液白细胞（WBC）、血小板（PLT）为考察指标。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选取普通级wistar大鼠110只 (辽宁中医药大学实验动物中心提供），雌雄各半（均为雌性），体质量（200±10）g，7~8周龄,未曾交配。动物合格证号：SCXK（辽）2004-0016。

1.2 药物与试剂 中药：雷公藤（福建）、何首乌（四川）、当归（甘肃）、黄芪（内蒙古）、金钱草（浙江）、甘草（内蒙古），购于沈阳天益堂药房。注射用盐酸阿霉素：10mg/支，浙江海正药业股份有限公司，批号060504。强地松片：5mg/片，天津太平洋制药有限公司，批号060401。20%乌拉坦：辽宁中医药大学临床药理基地提供。

1.3 主要仪器 ES-J系列电子分析天平：沈阳龙腾电子称量仪器公司、SF 3000血细胞分析仪、Sigma冷冻离心机。

1.4 分组与造模 将大鼠完全随机化原则分为11组：其中肾病模型组9组（雷公藤组、雷何组、雷归组、雷芪组、全方组、雷金组、雷甘组、强地松组、模型空白组），空白组2组（正常空白组、正常雷公藤组），每组10只，分笼饲养。参照Fermandez-Llama等［1］方法，一次性尾静脉注射阿霉素复制大鼠微小病变肾病模型,其形态学改变和临床表现与人的微小病变肾病相似。模型组：非麻醉下按6.5mg/kg一次性尾静脉注射2%阿霉素0.65mL。模型评估：造模3d后大鼠逐渐出现食欲减退、行动迟缓、皮毛无光泽、腹水、烦躁厮咬。造模7d后用代谢笼收集24h尿液测尿蛋白定量，呈渐进性增多。与文献报道一致，造模成功。

1.5 给药方法 空白组：同法注射0.65mL生理盐水。6味中药按大鼠-人体表面积换算法确定各药剂量。全方和拆方各药剂量均相同：雷公藤 60g，何首乌 39.2g，黄芪 49g，当归 19.6g，甘草19.6g，金钱草68.6g。各方入水量2000mL，先煎雷公藤1h后下诸药，常规煎煮2次，去药渣后合并药液，浓缩成300mL。各方含生药量分别为：雷公藤方0.2g/mL、雷何方0.33g/mL、雷归方0.264g/mL、雷芪方 0.363g/mL、全方 0.853g/mL、雷金方 0.428g/mL、雷甘方0.264g/mL。各组从造模第15日起开始灌胃2mL，每日1次。强地松组将强地松片按5mg/kg溶成2mL溶液灌胃。

1.6 标本采集与检测 眶静脉取血，毛细采血管沿目外眦快速进入采1滴在EDTA-2Na抗凝，混匀，立即进行血细胞检测。

1.7 统计学处理 应用SPSS 13.0软件，试验结果为正态分布，满足方差齐性，以表示，采用配对t检验和两组独立样本t检验，多组间差异显著性检验用单因素方差分析,组间比较用SNK（q）检验,各处理组与对照组比较用Dunnett t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组大鼠干预前后对尿蛋白的影响 见表1。 全方组、雷芪组、雷甘组治疗24h尿蛋白较模型雷公藤组减少（P＜0.05），起到增效作用。

表1 各组大鼠干预前后24h尿蛋白比较 （mg/24h

表1 各组大鼠干预前后24h尿蛋白比较 （mg/24h

与模型空白组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与本组治疗前比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与模型雷公藤组比较，▲P＜0.05。

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2.2 各组大鼠干预后对白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板的影响 见表2。 全方组、雷何组、雷芪组、雷甘组、雷归组、雷金组较模型雷公藤组WBC、PLT差异显著（P＜0.05），起到减低血液系统毒性作用。各配伍组均有对抗雷公藤血液系统毒性，全方组、雷何组、雷金组较雷芪组、雷归组和雷甘组好。

表2 各组大鼠干预后白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板比较

表2 各组大鼠干预后白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板比较

与模型雷公藤组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

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3 讨 论

对有毒中药实施减毒增效，历代发明了炮制减毒法、配伍减毒法、煎煮减毒法、调节用量减毒法、服法减毒法等。配伍减毒法又派生相杀减毒法、佐制减毒法、解毒减毒法、调和减毒法、扶正减毒法等。复方雷公藤汤据诸法组合而成，含雷公藤20g，制何首乌 20g，炙黄芪 25g，酒当归 10g，金钱草 35g，生甘草 10g，功用解毒化浊，益气养血，利水消肿。以雷公藤活血解毒、消肿除湿为君药。何首乌、黄芪和当归三药补气血，益精血，扶正以防雷公藤戕伐之害，共为臣药。金钱草清热解毒、利水消肿，助君药之力，兼杀其毒，为佐药。甘草补中益气以扶正，解药毒缓君药之性，另可调和诸药，故为使药。

实验结果表明，在减少尿蛋白方面，雷芪组和雷甘组效果优于其他配伍组，推测是黄芪、甘草参与免疫调节和具有皮质激素样作用。正常雷公藤组2周后出现尿蛋白，较正常空白组有统计意义，提示长期服雷公藤对肾脏确有损害。

在降低血液系统毒性方面，防止WBC、PLT下降，雷何组、雷金组较雷芪组、雷归组、雷甘组好。金钱草杀雷公藤毒，何首乌有促进造血功能，何首乌对小鼠粒系祖细胞的生长有促进作用，可使骨髓造血干细胞明显增加，显著提高粒—单系祖细胞产生率，使骨髓红系祖细胞值明显升高。何首乌提取物可使外周血网织红细胞比例上升。研究表明，黄芪多糖能升高正常大鼠RBC比容，增加红细胞数。黄芪能升高血虚模型大鼠红细胞比容，升高血虚模型小鼠的血红蛋白含量，红细胞比容。还能防治因辐射而造成的外周血白细胞、骨髓有核细胞数量的减少，促进造血干细胞分化和增殖。当归补血功效与其促进机体造血功能有关。当归能促使外周血红细胞、白细胞、血红蛋白等含量增加，对因化学药物引起的骨髓造血功能抑制，当归促造血作用更为显著。当归多糖是促进造血功能的主要有效成分之一。当归能显著增强巨噬细胞的吞噬功能，对环磷酰胺或强地松引起的吞噬功能降低有对抗作用。

本实验结果表明，复方雷公藤汤及拆方对肾病大鼠确有减毒作用，其降低肾病尿蛋白起到了增效作用；减低血液系统毒性以全方、雷何组、雷金组为佳。综合毒效分析，全方组为毒效最优化复方,为本方临床应用和新药开发提供了前期研究基础。

［1］ Fernandez Llama P,Andrews P,Nielsen S,et al.Impairedaquapor2inandureatransporter expression in rats with adriamycin-inducene phroticsyndrome［J］.Kidney Int,1998,53（5）:1244-1253.