人参消渴胶囊中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定

李 俨，李敬华

(1.吉林省吉林市食品药品检验所，吉林 吉林 132011; 2.北华大学附属医院，吉林 吉林 132011)

人参消渴胶囊中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定

李 俨1，李敬华2

(1.吉林省吉林市食品药品检验所，吉林 吉林 132011; 2.北华大学附属医院，吉林 吉林 132011)

目的建立人参消渴胶囊中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re含量测定的高效液相色谱法。方法色谱柱为Hytersil BDS C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为乙腈 －0.05%磷酸(20 ∶80)，流速 0.9 mL/min，柱温 40 ℃，检测波长 203 nm，进样量 10 μL。结果人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re的进样量线性范围分别为 0.25 ～ 2.75 μg 和 0.50 ～5.51 μg，平均回收率分别为 96.75% 和 98.66%，RSD分别为 2.1%和 1.4% 。结论建立的方法准确、简便、快速，可用于该产品的质量控制。

人参消渴胶囊;高效液相色谱法;人参

人参消渴胶囊(原名降糖胶囊)由人参、人参茎叶皂苷等加工提取制成，具有清热生津、滋阴润燥之功，用于消渴症，症见多饮、多尿、多食、消瘦、体倦无力及全身综合征[1]。人参、人参茎叶总皂苷为细贵药，人参皂苷Rg1和人参皂苷Re为其主要成分。笔者采用高效液相色谱(HPLC)法对制剂中的Rg1和人参皂苷Re进行了含量测定，作为其内在质量控制的方法，现报道如下。

1 仪器与试药

2010C型高效液相色谱仪(日本岛津);Class－VP数据处理机(日本岛津);UV－2401型紫外－可见分光光度计(日本岛津);Mettler AE24型电子天平(瑞士)。人参皂苷 Rg1对照品(批号为110703－200322，供含量测定用)、人参皂苷 Re对照品(批号为754－200115，供含量测定用)均由中国药品生物制品检定所提供;人参消渴胶囊(通化鸿淘茂药业有限公司，批号为060101，060102，060103，060104，060105;通化林海药业有限公司，批号为20060104);甲醇为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验[2]

色谱柱:Hytersil BDS C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);柱温:40 ℃;流动相:乙腈 －0.05% 磷酸(20 ∶80);流速:0.9 mL/min;检测波长:203 nm;进样量:10 μL。在此条件下，理论板数按人参皂苷Re峰计算为11 647，人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的分离度为1.8，色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.2 溶液制备

精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每1 mL含人参皂苷Rg10.25 mg、人参皂苷Re0.5 mg的混合溶液，作为对照品溶液。取本品装量差异项下的内容物，研细，取1 g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷，加热回流1 h，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，加甲醇50 mL，连同滤纸筒移入具塞锥形瓶中，加热回流3 h;过滤，提取液挥干，加水20 mL使溶解，加石油醚(30～60℃)提取2次，每次10 mL，弃去醚液，水液通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5 cm，长15 cm)，以水80 mL洗脱，弃去水液，再用20%乙醇80 mL洗脱，弃去20%乙醇洗脱液，继续用80%乙醇100 mL洗脱，收集洗脱液90 mL，蒸干;残渣加甲醇溶解并定量转移至10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。取不含人参及人参茎叶皂苷的处方，按制备工艺方法制成阴性对照品，取1 g，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

干扰试验:吸取2.2项下阴性对照品溶液10 μL，注入色谱仪，依法测定。结果阴性对照品溶液色谱图在人参皂苷Rg1和人参皂苷Re相应的保留时间附近无干扰峰，表明方法可行。

线性关系考察:分别精密吸取人参皂苷Rg1和人参皂苷Re对照品混合溶液 1，3，5，7，9，11 μL，注入高效液相色谱仪中，以进样量(μg)为横坐标、峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，人参皂苷Rg1和人参皂苷Re回归方程分别为Y=4697.3905+348734.6285X(r=0.999 9)和Y=19 583.785 58+325 320.703 6X(r=0.999 9)，进样量线性范围分别为 0.25 ～2.75 μg和 0.50 ～5.51 μg。

稳定性试验:精密吸取同一供试品溶液(避光保存)，每隔一定时间进样1次，依法测定。结果人参皂苷Rg1和人参皂苷Re峰面积的RSD分别为0.3%和1.2%，表明供试品溶液在避光条件下10 h内基本稳定。

精密度试验:取同一对照品溶液，进样6次，依法测定。结果人参皂苷Rg1和人参皂苷Re峰面积的RSD分别为2.7%和1.9%(n=6)，表明仪器精密度良好。

重现性试验:取同一批样品，依法独立测定6次。结果含量人参皂苷Rg1和人参皂苷Re含量的RSD分别为2.6%和1.5%(n=6)，表明方法重现性良好。

加样回收试验:称取样品 0.250 0，0.500 0，0.625 0 g，分别精密加入对照品的混合溶液(精密称取人参皂苷Rg116 mg和人参皂苷Re11.2 mg，分别置200 mL量瓶中，加甲醇至刻度，精密量取上述溶液各 1 mL，置 200 mL 量瓶中，加甲醇至刻度)1.0，2.0，2.5 mL，按供试品溶液制备方法制备待测溶液并依法测定含量，计算回收率。结果见表1。

表1 加样回收试验结果(n=3)

2.4 样品含量测定

药材含量测定:取人参和人参茎叶皂苷(通化鸿淘茂药业有限公司)各1批，按2005年版《中国药典(一部)》人参项下方法测定，结果人参药材中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总含量为0.9%，符合总含量不得少于0.30%的规定;按《化学药品地升国标(第七册)》方法测定了人参茎叶皂苷中人参皂苷Rg1、人参皂苷 Re的总含量为54.10%，符合总含量不得少于30.0%的规定。结果见表2。

样品含量测定及含量限度:依法测定6批样品，结果见表3。可见，6批样品的人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的平均总量为3.13 mg/粒。考虑到按处方投料的理论值(人参皂苷总量为1.96 mg/粒)、原料本身含量的变化及生产中的波动，暂订每粒样品含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的总量不得少于1.5 mg/粒。

表2 药材含量测定结果

表3 样品含量测定结果(mg/粒)

3 讨论

取对照品溶液，在190～400 nm波长范围内进行紫外光谱扫描，结果在203 nm波长处有最大吸收，因此以203 nm为检测波长。参照2005年版《中国药典(一部)》人参叶含量测定项下方法，以乙腈－0.05%磷酸(20∶80)为流动相;供试品提取溶剂为三氯甲烷、甲醇，以索氏加热回流提取。

根据试验结果，两公司提供的样品在拟订的色谱条件下(流动相比例有所改变)，被测的两组分分离效果不好，因此样品生产工艺等条件有必要统一。

[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:人民卫生出版社，1977:9.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社，2005:7.

R284.1;R286.0

A

1006－4931(2011)02－0042－02

2009－12－02;

2010－06－02)