均匀设计法优选蒲公英总黄酮的研究

肖奇志

均匀设计法优选蒲公英总黄酮的研究

肖奇志

目的 探讨超声辅助提取蒲公英总黄酮的最佳工艺。方法 采用均匀设计优化提取工艺。结果 最优工艺参数为：超声波强度2000W，温度75℃，乙醇浓度75%，黄酮提取率为2.59%。结论 均匀设计法优选蒲公英总黄酮，简洁快速，可以用于优选蒲公英总黄酮。

蒲公英；总黄酮；超声辅助；均匀设计

Dandelion;Total Flavones; Ultrasound-assisted extraction; Uniform design

蒲公英是菊科多年生草本植物，含有多种有效成分，具有较强的清除自由基、抗氧化、抗炎、等多种药理作用[1]，这些功效和蒲公英所含有的有效成份黄酮有一定的联系。本实验研究了超声辅助提取蒲公英总黄酮的可行性，为进一步开发蒲公英提供一条经济工艺路线。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

GU-1901双光束紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；RE-52A旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；蒲公英（张仲景大药房提供，经鉴定为药用蒲公英Taraxacum officinale）；化学试剂为分析纯。

1.2 实验方法

1.2.1 超声辅助蒲公英总黄酮提取工艺

称取干燥过30目的蒲公英50g，石油醚浸泡24h,过滤，按照预设条件(超声波强度、温度、乙醇浓度)进行超声辅助提取，提取3次，过滤，合并提取液，浓缩,氯仿萃取3次，合并萃取液，浓缩备用。

1.2.2 含量测定

秤取芦丁标准品0.5mg溶于5mL甲醇溶液,量取1、2、3、4、5mL分别置25mL量瓶中，加水至6mL，加5%亚硝酸钠溶液lmL摇匀，放置6分钟min，加10%硝酸铝溶液lmL摇匀，放置6min，加氢氧化钠试液10mL，再加水至刻度，摇匀，放置15min，505nm波长处测定吸光度，以吸光度X和浓度Y进行回归，得回归方程为Y=2.37X+2.134，相关系数R=0.9998，表明0.004mg.mL-1-0.02mg/mL-1范围线性关系较好。

1.2.3 均匀设计实验法

以影响有效成分提取率超声波强度、温度、乙醇浓度作为考察因素，各因素取3个水平，探求超声辅助提取蒲公英总黄酮的最佳工艺。用均匀设计3.0版软件筛选出u9(33)表安排实验[2]数据见表1。

2 结果与分析

2.1 均匀设计实验结果

本实验通过均匀设计3.0版软件中自选变量法进行数据分析，采用超声波强度A、温度B、乙醇浓度C对应变量总黄酮提取率Y多元逐步回归法进行分析，回归分析采用后退法,显著性水平α＝0.05，得回归方程Y=0.397X1+0.371X2+0.341X3，复相关系数：R=0.9999,检验值Ft=11.67,临界值F(0.05,3,3)＝6.277, Ft＞F(0.05,3,3),回归方程显著，剩余标准差s＝0.134，回归方程有意义,由回归方程因素的系数可见超声波强度、温度、乙醇量的影响均为正效应，从标准回归系数可以发现，超声波强度＞温度＞乙醇浓度。根据回归方程得出最优组合：超声波强度A为2000W，温度B为75℃，乙醇浓度C 为75%，预测值Y=2.17%。

表1 U7(73)均匀试验方案及试验结果

2.2 验证方案

按照最优工艺参数即超声波强度2000W，温度75℃，乙醇浓度75%进行了3次平行试验，显示平均提取率2.59%，RSD1.21%，与预测值相符，说明优化结果可靠。作为对比试验，本文采用常温浸提和回流提取技术，对蒲公英总黄酮进行了提取试验研究。取得率分别为1.97%和2.11%。由此可以看出，传统提取技术的效果远远不及超声辅助提取。

3 讨论与结论

蒲公英总黄酮的提取过程就是使目标成分从细胞内释放、扩散到溶剂中的过程，由超声波发出的高频机械振荡，微射流和冲击波使颗粒振荡和高速碰撞，产生固液界面的清洗、冲击、侵蚀和剥离等作用，使边界层变簿，强化蒲公英总黄酮向固液界面的扩散，提高黄酮溶出过程的速率，从而可缩短提取时间、提高提取效率。

采用均匀设计方案进行试验，得到最优工艺方案，试验次数大大减小，时间短，收率高，操作简单，能耗低，是一个经济的工艺路线，值得推广。优化了蒲公英总黄酮的超声波辅助提取工艺，确定了蒲公英总黄酮的超声波辅助提取的最佳工艺条件：超声波强度A为2000W，温度B为75℃，乙醇浓度C为75%。利用此条件提取蒲公英总黄酮，提取率达到2.59%。与传统提取法相比，超声波辅助提取法提取时间短、试验次数大大减小，收率高，操作简单，能耗低选择性好，是一个经济的工艺路线，值得推广。

[1] 姜宁,宋新波.蒲公英的药理研究进展[J].中国中医药杂志，2008,12(6)∶19-20.

[2] 陈涛,李进,褚治德.黄芪药材的微波提取工艺研究[J].时珍国医国药,2009,20(2)∶349-350.

10.3969/j.issn.1009-4393.2010.32.98

∶ 462002 贵阳护理职业学院（肖奇志）

[Abstrac] Objective To study the best extraction process of the Flavones From dandelion. Methods The extraction condition by uniform design was optimized.Results The optimized technologic condition:Ultrasound wave power was 1200W,temperature was 75,the alcohol content was 75%,The extraction ratio of total Flavonesi was 2.59%. Conclusion The ultrasound-assisted extraction can be regarded as rapid and eff cient method of the extraction of total f avonoids in dandelion.