王 新 白吉英 潘义勤 杨改娥
1 山西医科大学附属运城市中心医院皮肤性病科(044000)
2 山西医科大学附属运城市中心医院中心实验室(044000)
梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种(treponem apallidum subsp.pallidum)引起的一种古老的性病,经性接触传播,全球范围分布[1]。改革开放以来,梅毒在我国的发病率又逐年升高。2005年国家卫生部公布,梅毒发病人数仅次于肺结核、乙型肝炎、细菌性和阿米巴性痢疾、淋病而高居第5位(2002年为第7位)。梅毒的诊断依赖病史、临床表现和实验室检查[2]。实验室检查项目包括血清学检验抗体检测、直接梅毒螺旋体(暗视野显微镜)和梅毒螺旋体核酸测定。血清学检验是目前二级以上医院检验科常规开展的项目。这些年来几乎所有二级医院,规定凡是手术、输血、各种介入性检查等的患者,更有甚者凡入院的患者几乎都要进行梅毒螺旋体的相关血清学检验。梅毒的诊断依赖病史、症状和体征、暗视野显微镜检查苍白密螺旋体和血清学试验。血清学检测分为非特异性类脂质抗原试验即以心磷脂等为抗原,检查患者血清中的反应素,常用的有快速血浆反应素实验(RPR)、不加热血清反应素玻片实验(USR)、甲苯胺红不加热血清反应素(TRUST)、性病研究实验室实验(VDRL)等,常用作筛查试验。另一种为用活的或死的梅毒螺旋体或其成分作为抗原测定抗螺旋体抗体,这种实验敏感性和特异性均高,一般用作证实实验,这种实验是检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体,即使患者经过足够的治疗仍能长期存在,甚至终身不消失,血清反应仍持续阳性,因此不能用于观察疗效,常用的有ELISA、颗粒凝集试验(TPPA)、间接血凝试验(TPHA)等。而老年患者大多数有基础病及螺旋体共生现象,故我们于2009年2月至2010年6月,用梅毒酶联免疫吸附实验(TP-ELISA)方法初检山西医科大学附属运城市中心医院性病门诊、输血、介入检查治疗及术前老年患者血清检测,阳性者再行TRUST及梅毒Reiter株吸收剂稀释血清后,进行苍白密螺旋体明胶颗粒凝集实(TPPA)两项血清学试验。
患者血清来自山西医科大学附属运城市中心医院性病门诊、输血、介入检查治疗及术前,经梅毒酶联免疫吸附实验(TP-ELISA)检测阳性老年患者血清,年龄51~85岁,其中51~60岁老年患者35例,60~70岁老年患者28例,71~85岁老年患者16例;男女性别大致相等,分离血清当日检测。
用梅毒酶联免疫吸附实验(TP-ELISA)检测待测血清,阳性标本用甲苯胺红不加热血清反应素(TRUST)和经梅毒Reiter株吸收剂稀释血清后,进行苍白密螺旋体明胶颗粒凝集实验(TPPA)检测。梅毒酶联免疫吸附实验(TP-ELISA)采用ELISA法,Clinibio酶标仪,试剂均由科华公司提供,严格按说明书操作。甲苯胺红不加热血清反应素(TRUST)实验试剂购自北京万泰生物药业有限公司。TPPA试剂购自日本富士瑞必欧株式会社。梅毒Reiter株吸收剂稀释剂由军事医学科学院微生物研究所提供,均为国家批检合格试剂。严格按试剂说明书操作。
79例用梅毒酶联免疫吸附实验(TP-ELISA)检测阳性标本,甲苯胺红不加热血清反应素(TRUST)检测阳性79例。经梅毒Reiter株吸收剂稀释血清后,进行苍白密螺旋体明胶颗粒凝集实验(TPPA)检测,阳性者74例(表1)。
表1 不同年龄段不同检测方法阳性例数比较
梅毒血清学检查是目前很多医院检验科常规开展的项目。近年来,由于在实施手术、腔镜检查、输血等治疗前均须做此项检测,我们检测的这些老年患者的血样,有的是山西医科大学附属运城市中心医院手术前对梅毒诊断不明确的,有的是患有自身免疫性疾病,还有的是血液病、多次输血以及为性病门诊的患者,绝大多数患者无梅毒的临床症状及感染史。出现梅毒酶联免疫吸附实验(TP-ELISA)检测假阳性,国内有关学者考虑有以下原因:①这些老年患者所患的基础疾病可能使机体释放诱导产生抗类脂抗体和(或)抗T.pallidum抗体的交叉抗原;②这些老年患者体内可能螺旋体共生,诱导产生抗属、群或科特异抗原的交叉反应抗体[3,4];③目前TrAT试验所用的市售商品试剂盒中,除FTA-ABS配吸收剂外,其他TPPA、金标记多疫层析、ELISA等均未配置吸收稀释剂,待测血清均未用吸收剂吸除与非梅毒螺旋体交叉反应的抗体。
综上所述,老年患者体内可能有螺旋体共生,诱导产生抗属、群或科特异抗原的交叉反应抗体;故TP-ELISA和TRUST检测全为阳性也就不难解释,但绝大多数梅毒血清学试验阳性的年轻患者,有病史及相应的临床症状,诊断是明确的。目前大多数医院所用的梅毒血清试验的试剂盒中都无梅毒Reiter株吸收剂稀释剂,我们经过试验分析发现60~70岁年龄段的患者经过梅毒Reiter株吸收剂稀释后行TPPA的检测阳性比前两种方法少2例患者,71~85岁年龄段少3例患者,所以我们建议凡是60岁以上的老年患者的梅毒阳性血清最好用梅毒Reiter株吸收剂稀释血清后,进行苍白密螺旋体明胶颗粒凝集实验(TPPA)检测,并结合临床综合分析,并按照性病诊疗规范的要求,动态观察,不要过早的下结论,以免给患者造成不必要的精神压力和身心伤害,也不应掉以轻心,以免延误治疗。
[1]武建国.老年人抗梅毒螺旋体测定的假阳性率偏高[J].临床检验杂志,2006,24(4):241-243.
[2]马蔡昀,文怡,曾慧敏,等.6577例输血前和手术前患者HBV、HIV、梅毒抗体检测结果的分析[J].临床检验杂志,2004,22(6):478.
[3]肖波,王志文.吉安市无偿献血者梅毒检测结果分析[J].江西医学检验杂志,2005,23(6):605.
[4]叶顺章,张木友.性传播疾病实验诊断手册[M].广州:广东科技出版社,1991.