中药提取物和盐酸左旋咪唑免疫调节作用的研究

李登国 （山东省邹城市兽医站 273500） 柳风祥 （山东农业大学动物科技学院）

中药的免疫增强作用早有报道，中药不但能提高禽流感和猪瘟疫苗免疫后的特异性抗体水平[1，2]，也可抵消免疫抑制剂环磷酰胺造成的中枢免疫器官的萎缩[3]。本研究在前期研究的基础上选用黄芪、当归、白术和甘草组成复方制剂，模拟商品代鸡群中自然发生的免疫抑制状态，建立一个动物模型测试药物特别是中药制剂的免疫调节作用，并与盐酸左旋咪唑比较，探讨复方中药制剂的免疫增强作用，及盐酸左旋咪唑对该免疫抑制因素的免疫调节作用。

1 材料和方法

1.1 试验用药物 黄芪(Radix Astragali)、当归(Radix Codonopis)、白术(Herba Epimedii)、甘草(Radix GlycyrrIzae)，均购自泰安市药材公司，经山东省兽药监察所鉴定；盐酸左旋咪唑(Lev)购自陕西汉江药业有限公司，含量99.3%，生产批号：20060710；环磷酰胺(CY)购自山东新宝鑫药业有限公司，含量99.7%，生产批号：20070502。

试验中中药提取物由45%黄芪、20%当归、20%白术、15%甘草(以各中药的汉语拼音的第一个字母组合表示HDBG，下同)混合物提取而来。取8倍量的自来水浸泡过夜，煮沸2h后过滤，滤渣加5倍量自来水煮沸2h，合并2次滤液，浓缩至含中药材1g/ml。

1.2 试验设计 180只1日龄海兰褐公鸡，购自泰安市东岳种禽场，随机分为6组。1～3组为健康组，不使用环磷酰胺；4～6组为使用环磷酰胺组，1日龄时在饮水中按25mg/kg的浓度添加环磷酰胺，连用7d。7日龄时所有鸡均免疫Lasota(齐鲁动物保健品有限公司生产)、NDV灭活疫苗(英特威公司生产)、H5-AIV灭活疫苗(齐鲁动物保健品有限公司生产)，各种疫苗按说明书使用。14、21、28日龄所有鸡用IBDV饮水免疫(英特威公司生产)。1组为对照组，2、5组在1日龄时在饮水中按2%的浓度添加中药提取物，3、6组在1日龄时在饮水中按50mg/kg的浓度添加盐酸左旋咪唑，自由饮水，直至试验结束。

在35、42、49日龄时所有鸡翅静脉采血测鸡NDV、H5-AIV抗体效价。用血凝抑制(HI)微量法测定NDV、H5-AIV抗体效价。

2 结果

2.1 中药提取物和盐酸左旋咪唑对鸡体液免疫反应的影响

表1 中药提取物和盐酸左旋咪唑对鸡的NDV HI抗体滴度(Log2)的影响

表1的结果显示，环磷酰胺(CY)明显造成鸡对NDV灭活油苗的免疫抑制。试验数据还显示，不论是在健康鸡还是在饮用环磷酰胺(CY)鸡，添加盐酸左旋咪唑对NDV抗体水平都没有影响，与对照鸡差异不显著(P>0.05)。中药提取物对健康鸡抗体水平也没有影响(P>0.05)。但是，在1日龄饮用环磷酰胺(CY)导致免疫功能下降的鸡，中药提取物可显著改善体液免疫反应。在1周龄接种NDV的灭活油乳疫苗后4周、5周和6周，虽然应用中药提取物的免疫抑制鸡感染鸡对NDV仍达不到健康对照组，却显著高于同样饮用感染但未添加中药的对照组，对NDV HI抗体滴度的差异极显著(P<0.01)。

表2 中药提取物和盐酸左旋咪唑对鸡的H5-AIV HI抗体滴度(Log2)的影响

中药提取物和盐酸左旋咪唑对不同免疫功能状态下鸡的H5-AIV抗体水平的影响与NDV相似。这一结果表明，左旋咪唑不论对临床健康鸡还是对饮用环磷酰胺(CY)诱发免疫抑制状态下的鸡，对NDV或H5-AIV灭活疫苗的体液免疫反应都没有任何增强作用，而该4种中药提取物虽然在临床健康鸡对NDV或H5-AIV的HI抗体反应没有影响，但对在环磷酰胺(CY)诱发的免疫功能低下的鸡，该中药提取物确实能提高对NDV及H5-AIV的HI抗体反应。

3 讨论

很多研究表明，中药提取物可提高小鼠、鸡、兔或猪的特异性和非特异性免疫反应[4-6]。其中王福传等[7]和李宏全等[8]更是在很大数量鸡的对比试验中证明了，用黄芪多糖提取物注射或以某些复方中药添加于饲料中，可显著提高鸡群对NDV或IBDV疫苗免疫后的抗体反应，张乐翠等[3]以化学药物环磷酰胺诱发全身性免疫抑制，也证明了黄芪多糖和香菇多糖可抵消环磷酰胺诱发的法氏囊和脾脏的萎缩。本研究以环磷酰胺感染雏鸡，造成一定程度的免疫抑制，作为一种试验动物模型，比较了在饲料中添加一些复方中药浸出物后的免疫增强作用。结果发现，由黄芪、当归、白术和甘草组成的方剂添加到饲料中后，对正常健康鸡体液免疫反应没有任何影响，但确可显著增强处于环磷酰胺(CY)诱发的免疫抑制状态的鸡群对NDV和AIV灭活疫苗免疫后的特异性抗体反应。

近几年研究发现盐酸左旋咪唑在免疫调节上有重要作用[9,10]。该药可增强细胞功能[11]，它还有胸腺激素的类似作用，诱导T细胞成熟，增强外周T巨噬细胞和中性粒细胞的活性。Hassan曾报道[12]ND免疫前应用左旋咪唑，HI抗体明显升高，而免疫后应用无此作用。韩雪清报道雏鸡免疫前用左旋咪唑，可使IBD+ND疫苗联合免疫时抗ND、IBD抗体水平明显升高。刘玉堂报道[13]蛋鸡免疫ND疫苗同时饮用左旋咪唑，结果HI抗体明显升高，抗体上升快，持续时间延长5个月以上。Palanskii报道[14]ND疫苗免疫前应用左旋咪唑，T细胞绝对值和相对值升高，而抗体滴度无明显变化，抗人工感染能力增强。但是在本试验中，不论是在正常健康鸡还是REV感染后免疫抑制的鸡，左旋咪唑却没有表现出任何免疫增强作用。由此推测左旋咪唑在有些条件下对有些抗原的刺激有免疫增强作用，但在另一种条件下对其他抗原的刺激却没有免疫增强作用。

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[7]王福传, 方昌阁, 张玉换等. 复方中草药免疫增强剂对蛋鸡免疫效果的研究[J]. 畜牧兽医学报, 2006, 37(2): 187-192.

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