毛细管气相色谱法同时测定盐酸替利定原料药中4种有机溶剂残留量

韩学静，张轶华，郄冰冰（河北省药品检验所，石家庄市 050011）

盐酸替利定（Tilidine hydrochloride）是由华纳-兰伯特公司研发，于1970年在西德上市的一种阿片类止痛剂，目前尚未在国内上市销售。该药的镇痛强度与哌替啶相当，约为吗啡的1/10[1]，其主要的作用部位是脑部，作用包括影响疼痛传递以及对疼痛刺激反应性的改变，主要用于缓解急性疼痛、中毒及重度疼痛以及癌症患者的止痛。盐酸替利定在合成过程中使用了丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲苯等有机溶剂，为有效控制该原料药中上述有机溶剂的残留量，笔者参考文献[2，3]建立了以毛细管气相色谱法同时测定4种有机溶剂残留量的方法。结果表明，该方法简单灵敏、准确可靠。

1 仪器与试药

6890型全自动气相色谱仪（美国Agilent公司）。

盐酸替利定原料药（国药集团工业股份有限公司廊坊分公司提供，批号：071201、071202、021203，含量：99.6%、99.7%、99.6%）；丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲苯均为气相色谱标准物质（天津市光复精细化工研究所）；二甲基甲酰胺（DMF）为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 溶液制备

对照品溶液：分别精密量取丙酮630.0 μL（500 mg）、乙酸乙酯 554.9 μL（500 mg）、四氢呋喃 80.9 μL（72 mg）、甲苯102.7 μL（89 mg），置于同一100 mL容量瓶中，用DMF定容，摇匀，得到浓度分别为5、5、0.72、0.89 mg·mL－1的对照品贮备液。精密量取5 mL置于50 mL容量瓶中，用DMF定容，即得对照品溶液。

供试品溶液：精密称取盐酸替利定1.0 g，置于10 mL容量瓶中，用DMF溶解并定容，摇匀，即得。

2.2 色谱条件

色谱柱为DB-1701毛细管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；检测器为氢火焰离子检测器（FID），检测器温度为250℃；柱温采用程序升温，初始温度为35℃，保持8 min，以30℃·min－1升至180℃，保持2 min；进样口温度为155℃；载气为氮气，流速为0.7 mL·min－1；分流比为15∶1；进样量为1 μL。

取对照品和供试品溶液进样，色谱见图1。

图1 气相色谱图A.对照品溶液；B.供试品溶液；1.丙酮；2.乙酸乙酯；3.四氢呋喃；4.甲苯Fig 1 Gas chromatogramsA.reference solution；B.sample solution；1.acetone；2.ethyl acetate；3.tetrahydrofuran；4.toluene

由图1可见，丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲苯的保留时间分别为5.67、7.65、7.81、10.86 min，各组分理论板数均不低于100 000，且分离完全（乙酸乙酯与四氢呋喃的分离度为1.7），空白溶剂无干扰。

2.3 线性试验与检测限

精密量取对照品贮备液10 mL置于50 mL容量瓶中，用DMF定容。分别精密量取1、1.25、3、5、7、8.5 mL置于10 mL容量瓶中，用DMF定容，制备成一系列浓度的溶液，分别进样测定，记录色谱。以峰面积（A）为纵坐标、浓度（C，mg·mL－1）为横坐标进行线性回归，结果见表1。

表1 各溶剂线性范围与回归方程（n＝6）Tab 1 Linear ranges of regression equations of solvent（sn＝6）

由表1可见，各组分在其检测浓度范围内线性关系良好。

当S/N≥3时，丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲苯的检测限分别为0.06、0.06、0.05、0.02 μg·mL－1。

2.4 精密度与重复性试验

取对照品溶液，连续进样6次，计算得丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲苯峰面积的RSD分别为1.1%、0.8%、1.3%、1.5%。

取同一批号供试品溶液，共6份，进样测定。结果乙酸乙酯未检出，丙酮峰面积的RSD为1.1%，四氢呋喃峰面积的RSD为1.3%，甲苯峰面积的RSD为1.0%。

2.5 回收率试验

分别精密量取对照品贮备液4、5、6 mL各置于50 mL容量瓶中，加DMF定容，作为对照品溶液A、B、C。精密称取已知各有机溶剂残留量的盐酸替利定原料药（批号为071201）约1.0 g，共9份，置于10 mL容量瓶中，分别用对照品溶液A、B、C溶解并定容，各3份。进样测定，计算得丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲苯的平均回收率分别为98.9%、99.0%、98.2%、99.5%；RSD分别为2.5%、1.4%、2.3%、2.1%。

2.6 样品中有机溶剂残留量测定

分别取3个批号的供试品溶液进样测定，按外标法计算其中有机溶剂残留量，结果3批中乙酸乙酯均未检出，丙酮残留量分别为0.039%、0.036%、0.036%，四氢呋喃残留量分别为0.042%、0.043%、0.041%，甲苯残留量分别为0.036%、0.034%、0.037%，符合《中国药典》2005年版要求[4]。

3 讨论

本试验选用中极性DB-1701毛细管柱为色谱柱，采用程序升温，使4种残留溶剂均能达到完全分离，缩短了分析时间。选择DMF作溶剂，与盐酸替利定和被测的4种残留溶剂均能互溶，并且DMF沸点较高（153℃），在被测组分之后出峰，且不干扰其它峰的测定。为测定原料中所含低沸点残留溶剂，采用35℃为起始温度，可确保乙酸乙酯与四氢呋喃的分离。

进样口温度的选择：盐酸替利定熔点为160～165℃，且熔融同时发生分解，笔者曾尝试进样口温度设定为180℃进行操作，发现约5 min处出现1个较大的“馒头”峰，可能系盐酸替利定的热分解产物；故将进样口温度定为155℃，结果既可避免热分解现象的发生，又可使DMF完全气化。

笔者曾尝试选用强极性HP-INNOWax宽口径、厚液膜毛细管柱进行分离，但丙酮与四氢呋喃难以分离；改用中极性DB-1701毛细管柱后，分离极大得到改善。

《中国药典》2005年版规定[4]，四氢呋喃、甲苯均为第2类溶剂，限度分别为0.072%、0.089%，乙酸乙酯、丙酮为第3类溶剂，限度均为0.5%。因此，从本试验的测定结果来看，样品中4种有机溶剂残留量均符合规定。

[1]陈素青，黄新洁，崔艳英，等.盐酸替利定的依赖性评价[J].中国药物依赖性杂志，2006，15（5）：363.

[2]李珂珂，谭丰苹.毛细管气相色谱法测定拉米夫定中有机溶剂的残留量[J].中国药房，2007，18（19）：1 502.

[3]马虹英.毛细管气相色谱法测定穿琥宁中吡啶残留量[J].中国药房，2007，18（15）：1 165.

[4]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（二部）[S].2005年版.北京：化学工业出版社，2005：54～57.