西咪替丁原料药中有机溶剂残留量的测定

吴琼诗，李光耀（1.海南省人民医院，海口市570311；.海南三叶制药公司，海口市570311）

药品中的残留溶剂是影响药品质量的重要指标之一。为保证用药安全，对药物原料药或制剂中有机溶剂残留量必须进行检测[1，2]。

西咪替丁在临床上主要用于治疗十二指肠溃疡、胃溃疡、上消化道出血等疾病，其在生产过程中，可使用环已烷、丙酮、甲醇和乙醇作为合成和重结晶溶剂，根据《中国药典》规定[3]，其中环己烷、甲醇为第二类溶剂，丙酮和乙醇为第三类溶剂，因此，需要对这些溶剂进行限度检查和控制。为此，笔者建立了顶空气相色谱法测定西咪替丁中这几种溶剂残留量的方法。结果表明，所建立的方法灵敏、可靠，重复性好，结果准确，可用于西咪替丁原料药中有机溶剂残留量的测定。

1 仪器与试药

HP-6890N气相色谱仪，配有HP7694 E顶空进样器和氢火焰离子化检测器（FID）及Agilent原装化学工作站（美国Agilent公司）。

西咪替丁原料药（由某药厂提供，批号：20090112、20090202、20090226，纯度：均为99.9%以上）；溶剂对照品环己烷、丙酮、甲醇和乙醇以及其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件和系统适用性研究

色谱柱：键合聚乙二醇HP-INNOWAX毛细管柱（0.53 mm×30 m×1.0 μm）；程序升温：柱温40 ℃保持5 min，以每分钟10℃的速率升至100℃，再以每分钟35℃的速率升至200℃，保持5 min；进样口温度：150℃，FID温度：220℃；分流进样，分流比1∶1；载气：氮气，流速：5.0 mL·min－1；尾吹（氮气）：30 mL·min－1；顶空进样器参数：平衡温度：80℃，传输管温度：110℃，进样环温度：105℃，平衡时间：30 min。

2.2 对照品混合溶液的制备

精密量取环己烷、丙酮、甲醇和乙醇适量，加入N，N-二甲基甲酰胺溶解并稀释制成每1 mL中分别含环己烷0.5 mg、丙酮0.5 mg、甲醇0.3 mg、乙醇0.5 mg的对照品混合溶液。

2.3 供试品溶液的制备

取本品，研细，取约0.3 g，精密称定，置于10 mL顶空进样器中，精密加入N，N-二甲基甲酰胺3 mL，密封，即得。

精密量取上述对照品混合溶液、供试品溶液及空白溶液（N，N-二甲基甲酰胺溶液）各3 mL，置于10 mL顶空进样器中，密封，气体进样。色谱结果见图1。

由图1结果可见，在环己烷、丙酮、甲醇、乙醇等色谱峰处无干扰峰出现。

2.4 检测限和定量限

分别精密量取环己烷、丙酮、甲醇和乙醇适量，用N，N-二甲基甲酰胺溶解并稀释制成一定浓度的对照品溶液。精密量取3 mL，置于顶空进样器中，密封，气体进样；根据信噪比，分别计算各有机溶剂的最低检测限和定量限。经测定，环己烷、丙酮、甲醇、乙醇的最低检测限分别为0.05、0.80、0.8、1.2 μg，定量限分别为1.55、1.54、1.56、2.458 μg。

2.5 线性范围

图1 气相色谱图A.对照品混合溶液；B.空白溶液；C.供试品溶液；1.环己烷；2.丙酮；3.甲醇；4.乙醇Fig 1 GC chromatogramsA.reference mixture；B.blank solution；C.test sample；1.cyclohexane；2.acetone；3.methanol；4.ethanol

取各对照品适量，精密称定，用N，N-二甲基甲酰胺溶液溶解并稀释制成环己烷浓度为0.148 8、0.297 6、0.446 4、0.595 2、1.190 4、2.381 mg·mL－1，丙酮浓度为0.182 6、0.365 2、0.547 8、1.095、2.191、3.287 mg·mL－1，甲醇浓度为 0.149 6、0.299 2、0.448 8、0.897 6、1.752、2.693 mg·mL－1，乙醇浓度为0.144 8、0.289 6、0.434 4、0.579 2、1.158、2.317 mg·mL－1的溶液，各精密量取3 mL置于顶空进样器中，密封，气体进样。测定峰面积，以浓度（X）为横坐标，峰面积的平均值（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程及相关系数，结果见表1。

表1 线性关系试验结果Tab 1 Linear range of organic solvents

2.6 仪器精密度试验

分别取环己烷、丙酮、甲醇和乙醇适量，精密称定，按对照品溶液的制备方法制备对照品溶液，精密量取3 mL，置于顶空进样器中，密封，气体进样；平行测定5份对照品溶液，分别测定其校正因子，结果RSD分别为0.78%、0.21%、0.22%、0.31%。

2.7 精密度试验

日内精密度：于同日内精密称取同一批样品（批号：20090112）5份，测定样品中残留溶剂的含量，结果环己烷和甲醇未检出，丙酮和乙醇含量的RSD分别为0.29%、0.46%。

日间精密度：分别于1～5 d，精密称取同一批样品（批号：20090112）5份，测定样品中残留溶剂的含量。结果环己烷和甲醇未检出，丙酮和乙醇含量的RSD分别为0.68%和1.06%。

2.8 回收率试验

对照品溶液的制备：取环己烷、丙酮、甲醇和乙醇适量，精密称定，用N，N-二甲基甲酰胺溶解并稀释制成每1 mL中分别含环己烷 0.496 mg、丙酮 0.612 mg、甲醇 0.313 2 mg、乙醇0.490 5 mg的对照品溶液，精密量取3 mL，置于10 mL顶空进样器中，密封，气体进样。加样回收率测定：精密称取已测知各残留溶剂含量的样品（批号：20090112，环己烷和甲醇含量均为0，丙酮和乙醇含量分别为0.030、0.048 mg·g－1）约0.3 g，置于顶空进样器中，精密加入上述对照品溶液3 mL，使溶解，依法测定。计算回收率，结果见表2。

表2 回收率试验结果Tab 2 Results of recovery test

2.9 样品中有机溶剂残留量测定

取3批样品，按“2.3”所述方法制成供试品溶液，取样置于顶空进样器中，依法测定，结果见表3（“-”表示未检出）。

表3 3批样品中有机溶剂残留量测定结果（mg·g－1）Tab 3 Content determination of residual organic solvents in 3 batches of samples（mg·g－1）

3 讨论

3.1 分流比的选择

经大量试验证实，4种溶剂在不同浓度范围内应采用不同的分流比，以使柱容量和分辨率相适应。综合考虑分流比、分辨率及进样误差，本文选择1∶1分流比，可获得较好的结果。

3.2 顶空测定条件的选择

3.2.1 平衡温度的选择。取4种溶剂的混合对照品溶液，置于顶空瓶中，分别在60、65、70、75、80、85和90 ℃温度下平衡后顶空进样分析。结果发现，随着平衡温度的升高，峰面积有所增大。这是由于组分的饱和蒸气压随平衡温度的升高而变大所造成的。但由于平衡温度过高，会引起顶空瓶的耐压和气密性等问题，故本文选取80℃作为平衡温度。

3.2.2 平衡时间的影响。将4种溶剂的对照品混合溶液置于顶空瓶中，在80 ℃分别平衡20、30、40、50、60 min后进样分析。结果表明，响应信号随着平衡时间的延长而增大。综合考虑各种溶剂分析结果，本试验选择为最佳平衡时间为30 min。

[1]周海钧主译.药品注册的国际技术要求·质量部分[M].北京：人民卫生出版社，2000：82.

[2]李珂珂，谭丰苹.毛细管气相色谱法测定拉米夫定中有机溶剂的残留量[J].中国药房，2007，18（19）：1 502.

[3]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（二部）[S].2005年版.北京：化学工业出版社，2005：附录54.