鹿茸粉对CCl4 及APAP肝损伤小鼠蛋白合成贮备功能的影响

齐艳萍，李和平

（1.黑龙江八一农垦大学动物科技学院，大庆 163319；2.东北林业大学野生动物资源学院）

鹿茸是我国传统名贵药材，中西医皆认为鹿茸具有振奋神经、增强内脏器官机能之功效[1]。随着对鹿茸研究的深入，近年来发现，鹿茸具有调节机体新陈代谢、促进各种生理机能活动的作用。它能促进蛋白质、核酸的合成，加速未成年小鼠的生长发育，对老年小鼠的效果更为显著。鹿茸对蛋白质代谢和能量代谢的改善作用是其强筋健骨功效的重要药理基础[2]。本文以鹿茸粉为研究材料，研究在不同类型肝损伤条件下，通过测量血清中总蛋白（TP）和白蛋白（ALB）的含量来评价鹿茸粉对小鼠肝脏在蛋白质的合成贮备功能方面的作用，为充分开发鹿茸新的药用价值提供基础理论依据。

1 材料方法

1.1 实验动物

昆明种小鼠，20～25 g，于普通动物饲养室饲养，自由饮用自来水，定时通风换气。

1.2 实验方法

1.2.1 CCl4肝损伤模型的建立

将CCl4溶于油中混匀，制成0.1%（V/V）CCl4油溶液，腹腔注射的剂量为10mL·kg-1，制成CCl4急性肝损伤模型。

1.2.2 APAP肝损伤模型的建立

将APAP溶于无菌生理盐水中，腹腔注射的剂量为150 mg·kg-1，制成急性APAP肝损伤模型。

1.2.3 动物分组及给药

小鼠随机分组，每组10只。CCl4和APAP两类肝损伤试验分别分为空白组、模型组、阳性对照组、鹿茸粉组。给药时，空白组和模型组小鼠每天ig（灌胃给药）生理盐水1次，阳性对照组ig150 mg·kg-1联苯双酯1次，鹿茸粉组以10mL·kg-1剂量ig15%鹿茸粉溶液1次，连续7 d。在第7天给药后，空白组ip（腹腔注射）生理盐水，其余CCl4各实验组均ip10mL·kg-10.1%CCl4油溶液，APAP各实验组均以125 mg·kg-1剂量ipAPAP。禁食，不禁水。16 h后，取血，制备血清，用试剂盒测定血清中TP、ALB的浓度[3]。

2 实验结果

2.1 CCl4肝损伤的实验结果

由表1可知CCl4导致小鼠肝损伤后，模型组TP和ALB含量与空白组相比明显降低，两者比较差异极显著（P＜0.01）。给予鹿茸粉后，TP含量虽有所升高，但差异不显著；而ALB含量升高幅度较大，差异极显著（P＜0.01），其作用效果明显优于保肝药物对照组。

表1 鹿茸粉对CCl4急性肝损伤小鼠TP、ALB的影响Table 1 The level of TP、ALB in blood serum on mice of liver injury by CCL4

2.2 APAP肝损伤的实验结果

由表2可知，APAP导致小鼠发生急性肝损伤后，模型组TP和ALB含量与空白组相比明显降低，两者比较差异极显著（P＜0.01）。鹿茸粉组对TP和ALB的升高幅度均比较大，与模型组间差异显著（P＜0.05），其作用效果明显优于保肝药物组。

表2 鹿茸对APAP急性肝损伤小鼠TP、ALB含量的影响Table 2 The level of TP、ALB in blood serum on mice of liver injury by APAP

3 结论与讨论

通过上述实验表明，在肝脏受到损伤情况下，鹿茸粉能显著降低小鼠血清中TP和ALB的含量，调节机体蛋白质代谢，改善肝脏的合成贮备功能。

在动物机体内，蛋白质负责维持血液渗透压及pH值、运输、营养、凝血和抗凝血以及免疫作用等生理功能。而肝脏在蛋白质代谢过程中起重要作用，机体合成的白蛋白、酶蛋白以及血浆蛋白质的生成、维持及调节都需要肝脏参与。其合成的蛋白可分为白蛋白和球蛋白两部分，其中白蛋白在肝细胞粗面内质网合成后，通过高尔基体运输出细胞膜，不在肝细胞内停留，肝损伤严重时，白蛋白的合成、细胞内转运和释放发生障碍，引起血清白蛋白减少，因此血清ALB含量可以反映肝细胞的合成贮备功能[4-5]。肝损害时，肝脏蛋白质代谢功能发生障碍，肝细胞合成蛋白质的功能降低，血清白蛋白含量显著下降，从而导致总蛋白含量也大幅度下降[5]。如果血清中蛋白质含量降低就表示肝脏合成功能受损害，因此在临床上，TP、ALB常用来作为肝脏疾病的诊断、治疗及预后观察的指标，其降低程度与肝损伤的严重程度成正比。

3.1 鹿茸粉对CCl4肝损伤小鼠肝脏合成贮备功能的影响

在研究中，CCl4模型组血清TP和ALB分别降低至 36.88±1.96 g·L-1和 23.91±1.94 g·L-1，含量明显降低（P＜0.01），结果说明肝细胞发生病变，其合成蛋白质的功能减退，因此血清中蛋白质发生了质和量的变化，从而提示肝组织发生了急性损伤。总蛋白在肝实质轻度损害时无明显变化，肝细胞严重损害时下降，该实验模型组TP含量明显下降，说明肝脏受损较为严重。给予鹿茸粉后，将TP和ALB分别升高至 40.76±8.46 g·L-1和 29.80±1.43 g·L-1，此结果与双环醇[6]的作用结果一致，说明鹿茸粉能提高肝细胞内糖原、蛋白质合成功能。鹿茸粉对ALB合成功能的提高效果较好，对于合成TP功能的恢复作用不大，提示鹿茸粉能在一定程度上缓解白蛋白的合成、转运和释放的障碍，抑制白蛋白含量减少。

3.2 鹿茸粉对APAP肝损伤小鼠肝脏合成贮备功能的影响

在研究中，APAP模型组TP由57.06±2.17降至32.74±1.05 g·L-1，ALB 由 32.02±0.96 降至 22.79±2.18 g·L-1，含量极显著降低（P＜0.01），这一结果与肝脏功能和蛋白含量关系的研究结果一致[7]，提示肝脏受到损伤后，蛋白质合成、代谢功能发生障碍。给予鹿茸粉后，其TP和ALB的值分别升高至39.03±1.48 g·L-1和 27.17±2.31，作用效果差异显著（P＜0.05），说明在肝脏合成贮备功能严重受损的情况下，鹿茸粉中的活性成分对其有一定程度的改善，这与许多肝脏保护药物的作用一致，如黄芪总黄酮等[8]。

［1］韩盛兰.鹿养殖与产品加工［M］.北京：科学技术文献出版社，2004.

［2］高学敏.中药学［M］.北京：人民卫生出版社，2000.

［3］宋正己，杨晋辉.实验性肝损伤模型的建立和研究发展［J］.医学综述，2004，10（5）：278-280.

［4］罗文，杜芳腾，刘晶美.实验性大鼠肝损伤肝组织铜锌变化研究［J］.江西医学院学报，1998，38（2）：21-23.

［5］吴丽，魏伟.肝纤维化的动物模型及治疗药物研究［J］.中国药理学通报，2004，20（5）：481-485.

［6］李烨.双环醇对实验性肝损伤、肝纤维化的保护作用和保护机制的研究［D］.北京：中国协和医科大学中国医学科学院，2001.

［7］Potter W.Z.，Davis D.C.，Mitchell J.R.，et al.Acetaminophen-induced hepatic necrosis.III.Cytochrome P450-mediated covalent binding in vitro［J］.J Pharmacol Exp Ther，1973，187：203.

［8］Critchley Julian，汪德清，丁保国，等.黄芪总黄酮对扑热息痛所致肝损伤的防护机理探讨［J］.中国中药杂志，2001，26（9）：617-620.