孙小姗
姜是多年生草本植物,作为药食两用在我国已经有悠久的历史。姜精油是从姜根茎中用水汽蒸馏的方法提取出来的挥发性油分,主要成分为倍半萜烯类碳水化合物50%~60%,氧化倍半萜烯17%,其余主要是单萜烯类碳水化合物和氧化单萜烯类。据文献报道,生姜有抗氧化、抗肿瘤、增强免疫等作用[1]。四氯化碳是肝脏毒理学中亲肝性毒物之一,对肝脏具有较强的损伤作用,可导致细胞的变性、坏死、脂肪变等,并可导致大鼠免疫机能的损伤[2]。本研究以不同浓度的生姜提取物给小鼠灌胃后进行四氯化碳急性染毒,观察生姜提取物对四氯化碳所致的小鼠肝脏脂质过氧化损伤的保护作用。
采用市售鲜姜切碎后经水蒸汽蒸馏,获得黄色、透明、具有浓郁芳香气味的油状液体。
四氯化碳(上海申鹤化学品有限公司);上海产722光栅分光光度计(上海第三分析仪器厂);日本产UV-260型紫外分光光度计;日本产MTX-150型低温高速离心机; 丙二醛试剂盒、超氧化物歧化酶试剂盒、谷胱甘肽过氧化酶试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。
选用昆明小鼠50 只,雌雄各半,体质量( 25±2) g,观察1周后随机分成5组,每组10只。各组分别是A组为阴性对照组( 未染毒组),B组为阳性对照组( 单纯染毒组) ,C组为高剂量生姜提取物组,D组为中剂量生姜提取物组,E组为低剂量生姜提取物组,A、B组用4.2mL/kg体质量色拉油灌胃,C、D、E组分别用8.4mL/kg体质量、4.2mL/kg体质量、2.1mL/kg体质量生姜提取物灌胃,B、C、D、E组小鼠灌胃后6h经口给予10%的CCl4染毒,剂量0.2mg/10(g·bw),A组给予植物油。染毒24h后,将小鼠脱臼处死,取肝脏。
各组小鼠于染毒后24h,脱臼处死。取肝脏,将肝组织切碎,冰浴下匀浆,3600 转/分离心5min,分光光度法测上清液的SOD 、GSHPx酶的活性和MDA的含量。
方差分析,检验水准0.05(双侧)。
由表1可以看出,阳性对照组的SOD、GSH- Px活性明显低于阴性对照组,MDA含量明显高于阴性对照组;高剂量组的SOD、GSH- Px活性明显低于其他各组,MDA含量明显高于其他各组;低剂量组的SOD、GSH- Px活性明显高于阳性对照组和高剂量组,MDA含量明显低于阳性对照组和高剂量组。
SOD酶能够清除超氧阴离子自由基,对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用,机体清除氧自由基的能力与SOD活性的高低密切相关,SOD酶活性变化与体内自由基的变化呈负相关[3]。MDA是脂质过氧化的产物,MDA含量的高低间接反映了机体细胞受自由基攻击的严重程度[4]。GSH-Px是体内广泛存在的特异催化还原型谷胱甘肽对过氧化氢的还原反应的酶,可以起到保护细胞膜结构和功能完整的作用[5]。
表1 生姜提取物对CCl4损伤小鼠肝脏脂质过氧化影响(±s)
表1 生姜提取物对CCl4损伤小鼠肝脏脂质过氧化影响(±s)
n=10,a: compared with A,P<0.05;b: compared with B,P<0.05;c: compared with C,P<0.05;d: compared with D,P<0.05
Group SOD(NU/mgprot) MDA(Nmol/mgprot) GSH-Px(U/mgprot)A 140.33±10.20 53.25± 5.18 7.51±0.78 B 109.23± 7.26a 68.48± 5.74a 6.27±0.91a C 87.34±11.47ab 88.12±11.49ab 3.12±0.58ab D 131.84±12.77bc 70.48±11.79ac 6.41±0.53ac E 127.19± 8.86abc 41.37±10.31bcd 9.75±1.03bcd
实验中阳性对照组SOD和GSH-Px酶活性明显低于阴性对照组,MDA含量明显高于阴性对照组,可能是由于CCl4导致小鼠体内自由基增加,大量消耗SOD酶,同时小鼠肝脏脂质过氧化作用增加,MDA含量也明显增加。高剂量组SOD和GSH-Px酶活性明显低于阳性对照组,MDA含量明显高于阳性对照组,表明生姜提取物在高剂量时对小鼠肝脏抗氧化系统无保护作用,并有可能与CCl4协同增强了小鼠体内的脂质过氧化作用,其机制有待进一步研究。中、低剂量组SOD和GSH-Px酶活性均明显高于阳性对照组,低剂量组MDA含量明显低于阳性对照组,说明在中、低剂量时生姜提取物能够降低CCl4引起的小鼠肝脏的脂质过氧化作用,保护肝细胞免受脂质过氧化的损伤,对CCl4的造成的肝损伤起保护作用。
结合各抗氧化指标的变化可以看出中低剂量生姜提取物可以促使小鼠肝脏抗氧化系统恢复,抑制脂质过氧化作用的发生,减少肝细胞的破坏和使肝细胞功能活跃。说明适量生姜提取物可通过保护小鼠抗氧化系统,减少自由基对小鼠肝细胞的损伤,拮抗CCl4对小鼠肝脏的损伤作用。
[1] 刘宁,霍贵成,张玲等.生姜对高血脂大鼠脂质过氧化作用的研究[J] .卫生研究,2003,32 (1): 22-23.
[2] 王丙云,陈龙,毛鑫智等.四氯化碳诱导的肝损伤对大鼠免疫机能的影响[J].中国病理生理杂志,2001,16(7):665-666.
[3] 张全武,孙少华,杨迪.慢性甲醛吸入对小鼠肝脏的氧化性损伤[J].现代预防医学,2003,30 (6): 767- 768.
[4] 潘洪志,邱向红,王军等.南瓜提取物对慢性苯染毒小鼠抗氧化酶的影响[J] .现代预防医学,2005,32 (11): 1446-1447.
[5] 吴媚,张遵真,叶丛茂等.60Coγ射线对小鼠组织细胞氧化损伤的研究[J] .现代预防医学,2005,32 (10) : 1267-1269.