电针对急性颅脑损伤大鼠脑组织 5-HT和 NE含量影响的实验研究*

李真姬 黄长军 田贵华 宋 萌 指导老师 李志刚

北京中医药大学针灸推拿学院 (北京 100029)

颅脑损伤(craniocerebral injury,CCI)是一种致死率和致残率很高的疾病,在我国的发生率以及由其致伤致残、致死的伤员也逐年增加[1]。本研究应用高效液相色谱法,观察电针对颅脑损伤大鼠脑组织 5-HT和 N E含量的影响,探讨电针治疗颅脑损伤的机制。

1 材料和方法 1.1 动物及分组雄性 SD大鼠 88只,体重 220±30g,随机分为 11组:空白组、6h模型组、12h模型组、24h模型组、48h模型组、6d模型组、6h针刺组、12h针刺组、24h针刺组、48h针刺组、6d针刺组,每组 8只。

1.2 颅脑损伤大鼠模型的制备 大鼠称重,腹腔注射10%的水合氯醛麻醉。正中切开,用牙科钻在冠状缝后 1.5mm,中线旁 2.5mm处钻一直径 5mm骨窗。利用改进 Feeney大鼠颅脑创伤模具,用 40g砝码置于 35cm高处造成颅脑损伤。模型组和针刺组造成左顶叶局限性脑挫裂伤。空白组不开颅窗,不施打击。

1.3 颅脑损伤大鼠针刺方法及血清制备 针刺组针刺“印堂”、“百会”两穴,电针刺激,“百会”穴接阴极,“印堂”穴接阳极。持续脉冲电流,时间 30min。空白组和模型组在治疗时间不作治疗,但要抓取并束缚,以保证饲养条件相同。

1.4 取材及指标检测 各组在造模后 12h断头取脑,剥离损伤部位皮质,放入-80℃备用。用高效液相色谱法检测脑组织 5-HT和 NE含量。

1.5 统计学方法 实验数据以均数±标准误表示,统计学分析采用 t检验。

2 实验结果 2.1 针刺对颅脑损伤脑组织 5-HT含量的影响。

表1 各组颅脑损伤大鼠不同时间 5-HT含量(±s,ng/g)

表1 各组颅脑损伤大鼠不同时间 5-HT含量(±s,ng/g)

表1显示,各组大鼠脑组织相比,模型组的脑组织 5-HT含量均明显高于空白组(39.241±6.518),差异极显著;24h、48h和 6d针刺组的含量也明显高于空白组 ,差异极显著;6h和 12h针刺组的脑组织 5-HT含量与空白组相比,差异不显著,P＞0.05。

组 别 6h 12h 24h 48h 6d模型组针刺组61.65±10.49 40.46± 8.29△64.20±8.55 45.93± 7.79△76.88±15.17 58.43±5.53 79.65±11.15 61.71±8.42 79.27±13.42 53.28±10.52

表2 各组颅脑损伤大鼠不同时间 NE含量(±s,ng/g)

表2 各组颅脑损伤大鼠不同时间 NE含量(±s,ng/g)

表2示,各模型组 NE含量均高于空白组(334.85±46.41),差异极显著;6h和 12h模型组的 N E含量显著高于针刺组,差异显著;24h、48h和 6d模型组的 N E含量也明显高于空白组和针刺组,差异显著;而各时间针刺组的 NE含量虽然也高于空白组,但差异不显著,P＞ 0.05。

组 别 6h 12h 24h 48h 6d模型组针刺组417.58±62.56 351.10±31.27 451.91±60.42 363.00±70.24 455.82±42.79 368.62±67.69 461.66±81.63 360.43±74.15 450.45±51.69 364.90±66.03

讨 论 颅脑损伤后脑内神经递质及其受体系统的异常改变,参与了继发性颅脑损伤的发病过程,可导致脑血流异常、脑组织代谢异常和脑水肿,并能直接破坏神经元和神经胶质细胞。中枢神经系统单胺类神经递质的种类很多,颅脑损伤时,以儿茶酚胺类和 5-羟色胺(5-HT)变化最为显著,在一定程度上与病情密切相关[2]。实验及临床资料已经证实,颅脑损伤急性期脑组织内 5-HT浓度显著升高,高浓度的 5-HT可直接引起细胞凋亡,且具有浓度和时间依赖效应[3]。脑皮质神经细胞膜上 5-HT受体显著增多,与大量增加的 5-HT递质相互作用,是早期外伤性脑水肿发生与发展的重要因素[4]。 5-羟色胺和去甲肾上腺素都是目前比较公认的内源性损伤因子。这些因子既可直接损害脑细胞,可以通过破坏血脑屏障,诱发和加重脑水肿等方式来激发和加重机体的继发性损害[5]。文献报道,脑损伤时 5-HT、NE、DA等单胺类神经递质含量明显增高[6]。大量的NE还可以引起脑血管痉挛、脑缺血及血管内皮细胞损伤致血一脑脊液屏障开放而导致脑水肿和继发性脑损害[7]。

本研究结果表明,颅脑损伤后大鼠 5-HT和 N E含量明显升高,且呈逐渐升高的趋势,到 48h达高峰,随后降低。针刺后使颅脑损伤大鼠脑组织 5-HT和 N E含量的升高趋势得以控制,使升高的 5-HT和 N E含量下降。研究结果提示,颅脑损伤可能引起脑组织神经递质代谢和释放紊乱,针刺可能通过纠正5-HT和 N E代谢和释放紊乱而减轻颅脑损伤的病理损害,对脑组织起到一定的保护作用。

[1] 张小年,张 皓.创伤性颅脑损伤国内研究进展 [J].中国康复理论与实践,2008,14(2):101-104.

[2] 刘明铎.实用颅脑损伤学[M].北京:人民军医出版社,2003,79-82.

[3] 瞿文军,徐如祥.单胺类递质对神经细胞的影响[J].解放军医学杂志,2003,28(1):76-78.

[4] 柯以铨,刘一兵,徐如祥,等.脑损伤早期脑皮质神经细胞膜 5-HT受体活性变化及其意义[J].中国微侵袭神经外科杂志,2002,7(2):100-102.

[5] 薛 文,李守缄.创伤性脑损伤后钙超载机制的研究进展 [J].临床医药实践杂志,2008,17(5):321-324.

[6] 王 强,王湘渝,张香菊,等.高压氧对创伤性脑水肿脑组织单胺递质变化的影响 [J].中国临床康复,2004,8(34):7729-7731.

[7] 徐如祥,易声禹.大鼠脑损伤后脑与血清中 5-羟色胺和 5-羟吲哚醋酸改变及赛庚啶的作用[J].中华神经外科杂志,1993,9(5):268-271.