奶水牛品种改良技术

○广西壮族自治区畜禽品种改良站 许典新

一、品种

我国牛品种资源十分丰富，有记录的牛品种共45个，其中，水牛是特色优良乳业品种，中国作为世界第三水牛大国，存栏数为2200万头。我国水牛主要分布在南方18个省区市。广西水牛存栏量225万头，居全国首位。

1.中国水牛品种特点。中国水牛属于沼泽型水牛，有登记的共18个品种，如沿海地区的上海水牛、江苏海子水牛；平原地区的湖南滨湖水牛、湖北江汉水牛、江西鄱阳湖水牛、安徽东流水牛；高原平坝区四川德昌水牛、云南德宏水牛；丘陵山地的四川涪陵水牛、浙江温州水牛、福建福安水牛、广西西林水牛、富钟水牛以及河南信阳水牛。

其特点：利用粗饲料能力强，性温驯，使用年限长，体格粗壮，胸深广，乳脂率高，正常繁殖为三年两胎，初生体重30 kg，成年牛体重500 kg，乳脂率可达11%，屠宰率和净肉率分别为48%和36.9%。但其后躯发育较差，产肉产奶性能低，产奶量400～500 kg/年。

2.世界优秀水牛品种（摩拉水牛、尼里/拉菲水牛）特点。摩拉水牛、尼里/拉菲水牛属河流型水牛，细胞染色体核型2n=50。摩拉水牛体质坚强，肢势良好，性情较敏感；尼里/拉菲水牛躯架低深，肌肉丰满，尾和乳头特长，性情较温驯，初生重36 kg，周岁龄达260 kg，产奶产肉量高，305 d二胎母牛产奶量达1800 kg，乳脂率为7%。

通过利用摩拉、尼里/拉菲水牛与本地水牛杂交，其杂交后代生长发育、体尺、体重、产奶产肉性能、役力等都比本地水牛高。

3.水牛奶是人类高级营养食品。水牛奶营养丰富，是制作奶制品的良好原材料。水牛奶的主要成分包括：脂肪、蛋白质和乳糖。其他成分还包括：矿物质、维生素、含氮化合物、色素、酶以及含量极少的其他物质。与荷斯坦牛相比，水牛奶中固形物含量更高，见表1。

二、品种改良及历史回顾

第一阶段（1957—1974年）：1957年，从印度引进摩拉水牛55头；1974年，从巴基斯坦引进尼里/拉菲水牛50头。开展了水牛杂交改良、鲜精人工授精示范、冷冻精液研究等工作。1973年，在陕西省汉中地区产下国内第一头冷冻精液水牛犊。1974年，广西、广东水牛颗粒冷冻精液保存技术研究成功，产出一批冷冻精液水牛群。

第二阶段（1975—1984年）：开展冻精人工授精技术示范、三品种杂交水牛培育。10年间杂交改良母牛38690头。

表1 水牛奶、荷斯坦牛奶、人类母乳主要成分含量比较

第三阶段（1985—1994年）：推广冻精人工授精技术、乳肉兼用型水牛培育、杂交水牛的综合利用示范。10年间杂交改良母牛73548头。

第四阶段（1995年至今）：大面积开展水牛杂交改良，水牛胚胎移植及体外受精技术研究成功，奶水牛性别（XY）控制冷冻精液技术研发成功并开始进行推广应用试验。

三、水牛繁殖技术

1.水牛冷冻精液技术。精液处理是指对精液进行稀释、降温等一系列有利于精子在体外存活和保持受精子活力的操作。

（1）精液冷冻的方法。精液冷冻以往采用CO2干冰法，现在主要采用液氮蒸汽法。其过程是：首先将稀释后的精液从室温以1℃/min降至4℃，再将精液在4℃条件下维持3～5 h，使精液与冷冻保护剂能够充分混合；然后将平衡后的精液进行分装打印（也可以先装后降温），再放入液氮冷冻柜中进行冷冻降温，降温过程是：先以3℃/min的速度从4℃降至-10℃，接着以40℃/min的速度降至-100℃，再以20℃/min的速度降至-140℃，最后迅速将冷冻后的细管精液投入液氮中。

（2）冷冻精液的解冻方法。预先把水浴箱水温加热至38～40℃，用镊子取一支冷冻后的细管精液迅速浸泡入38～40℃水中并晃动，等溶解后立即取出，用吸水纸或纱布擦干水珠，再用细管剪剪去超声波封口端，滴一小滴精液于载玻片上，加盖盖玻片后进行镜检，水牛冻精活力达到30%以上为合格。

（3）冷冻精液的贮存。冻精应贮存于液氮罐的液氮中，设专人保管，每周定时加液氮1次，应经常检查液氮罐的状况，如发现液氮罐外壳结白霜，立即将精液转移入其他液氮罐内保存。包装好的冻精由一个液氮罐转换到另一液氮罐时，在液氮罐外停留时间不得超过3 s。取存冻精后要盖好液氮罐塞，在取放盖塞时，要垂直轻拿轻放，不得用力过猛，防止液氮罐塞折断或损坏。移动液氮罐时，不得在地上拖行，应提握液氮罐手柄抬起罐体后再移动。

（4）冷冻精液的运输。冻精运输过程要有专人负责，贮存容器不得横倒、碰撞和强烈振动，保证冻精始终浸在液氮中。同时，要将每次押运的冷冻精液的时间、品种、数量、活力等进行记录，以便进行核对和统计。

2.水牛人工授精技术

（1）水牛生殖生理特点。水牛的初情期在10～15月龄，在营养相同的条件下，河流型水牛比沼泽型水牛的初情期早。水牛的发情周期平均为21 d，水牛拥有正常发情周期的比率较低，为50%～60%。水牛排卵的时间变化较大，从发情开始后20～120 h。但多数情况为发情开始后20～70 h。

母水牛发情持续时间一般在36～48 h，排卵时间在发情开始后50～70 h，因此，给水牛输精应在发情开始后40 h和50 h，输精2次为宜。如果以外部观察母水牛行为和生殖器官变化来判定输精时间，以母牛不太愿意接受爬跨、阴门微肿、阴道黏膜呈淡红色，有少量黏稠的灰白黏液时配种，受胎率较高。河流型水牛的妊娠期为305 d；沼泽型水牛的妊娠期为330 d；杂交水牛的妊娠期为315～320 d。

（2）输精。根据黏液变化确定输精时间。直肠检查发现滤泡发育成熟，泡皮紧而薄，波动感明显，有一触即破感时，进行第一次输精，隔8～12 h后再进行检查，如未排卵再补输精一次。

精液的准备及装枪：从水浴锅中取出解冻后的细管精液，用纸巾擦干细管壁上的水分。将细管精液的棉塞插入输精枪内，用经过消毒的细管剪在距输精枪口0.8 mm处剪掉细管精液前端，剪口要平整，然后将输精枪套上外套，直至输精枪与套卡紧为止。

输精：将母牛牵至配种架内，用细绳拴住牛尾，向一侧前方固定；清除直肠内粪便，检查母牛的生殖器官是否有异常变化，对左右两侧卵巢逐一进行触摸，确定是否要输精；输精时，先用0.1%高锰酸钾溶液洗净牛会阴、肛门等部位，并擦干，一只手插入直肠，手掌在刚过肛门后握成扁拳向下后翻，将阴门打开；另一只手持输精枪，自阴门向上沿拳壁插入一段后，感觉已通过尿道口再平推入输精枪直至子宫口，直肠内的手准确握住子宫颈最前端，将输精枪导过子宫颈的螺旋壁，一直插到子宫颈与子宫体交界处，即可注入精液，撤出输精枪后，隔外套检查是否有精液在外套端潴留，如有潴留，重新输精；每个情期输精1～2次，间隔时间8～12 h；输精结束后，要进行登记。

（3）妊娠检查。输精后45～60 d，如不再返情，可做妊娠检查。妊娠检查多采用直肠检查方法。

3.水牛性别（XY精子分离）控制技术。根据X和Y精子DNA含量差异和荧光染料着色差异以及荧光信号的差异，制造流式细胞仪器，分离X和Y精子。目前，水牛分离精子的准确率为X精子达94%，Y精子90%。

4.水牛胚胎移植技术

（1）供体、受体水牛的选择。选择健康、遗传性能好、体型外貌一级或特级、年龄2～8岁，体重650 kg，产奶量在2500 kg以上的摩拉水牛或尼里/拉菲水牛为供体。选择健康、繁殖性能好、年龄3～10岁，体重450 kg，体型外貌二级以上的本地母牛作为受体。对供体水牛进行同期发情处理与超数排卵处理，对受体水牛进行同期发情处理。

受体水牛在性周期的任何一天不检查黄体，一次肌肉注射前列腺素（PG）0.6 mg/头，对一次PG处理不发情或发情但黄体不合格的受体，间隔12～13 d，第二次肌肉注射PG 0.6 mg/头，在发情的第6～7 d通过直肠检查，选择共同体合格或基本合格的受体进行移植。

（2）胚胎移植（非手术移植）。受体牛的准备：根据发情记录，确定与供体母牛同期的受体母牛。移植前用1.5～2 mL（2%）利多卡因硬膜外鞘麻醉，并做直肠检查，确认排卵侧和黄体发育情况，移植前对外阴部彻底消毒。

胚胎的准备：用0.25 mL塑料细管，分三段吸入新鲜PBS，胚胎置于中段。根据受体牛的发情天数选择胚胎的发育阶段，将致密桑椹胚、早期囊胚和囊胚，分别移给发情6、7、8 d的受体母牛。

移植操作：扒开阴唇，插入全套移植器，至子宫颈外口，另一只手插入直肠找到子宫颈，移卵定顶开外套，进入宫颈。缓慢地将移卵管送至子宫角大弯或大弯深处，并用在直肠内的手托起子宫角内的移卵管，使其处于宫角部，慢慢推入钢芯，然后缓慢地抽出移卵管。

（3）妊娠诊断。其方法包括乳汁孕酮测定法、直肠检查法、B超诊断法等。