抱茎苦荬菜水溶性成分的分离与结构鉴定

姜瑞芝,陈英红,罗浩铭,徐多多,高 阳,高其品*

1吉林省中医药科学院;2长春中医药大学研发中心,长春 130021

苦碟子为菊科植物抱茎苦荬菜 Ixeris sonchifolia(Bge.)Hance的干燥地上部分,具有清热解毒、凉血活血、排浓止痛之功效。现代药理学研究表明,苦碟子还具有抗肿瘤、抗炎、镇痛、镇静及改善心肌供血不足等作用,以其水溶性成分制备的苦碟子注射剂临床上用于治疗冠心病。近年来,随着现代提取分离和波谱学技术以及现代药理学的飞速发展,对苦荬菜属植物的化学成分和生物活性的研究越来越深入,但都集中研究其脂溶性成分。因此,对苦碟子中水溶性成分进行深入研究,对临床用药具有指导意义。本实验分离鉴定了 5个化合物分别为木犀草素 -7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(1),木犀草素-7-O-(β-D-葡萄糖 1→2葡萄糖苷 )(2),芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(3),菊苣酸(4),(-)3,4-二羟基咖啡酰基酒石酸(5)。化合物 3～5为首次从该植物中分离得到。

1 仪器与材料

Pyris Diamond熔点测定仪;Perkin-Elmer243B digital polarimeter旋光测定仪 ;FTS-135型傅立叶红外光谱测定仪;岛津 UV-2250紫外光谱仪;Braker AV600型核磁共振仪;LCQ喷雾离子阱质谱仪(Finngan);薄层板(10×10)和柱色谱硅胶均为(青岛海洋化工厂);MDS-5反相制备色谱填料(北京麦迪生新技术开发中心);柱色谱聚酰胺(浙江台州路桥生化塑料厂);LunaC18制备柱(美国 Phenomenex);分离用甲醇为色谱纯;所用试剂均为分析纯。

抱茎苦荬菜由通化华夏药业股份有限公司提供。样品由吉林省中医药科学院资源所徐国经副教授鉴定为 Ixeris sonchifolia(Bge.)Hance

2 提取与分离

取抱茎苦荬菜干燥地上部分 50 kg,加 10倍量的水煎煮 2次 ,煎煮液加氧化钙乳沉淀,离心,沉淀悬浮在乙醇中,加硫酸调至 pH为 3,离心,上清液加氢氧化钠调至中性,回收乙醇,得到提取液 40 g/m L,取提取液 2000 m L经聚酰胺柱分离,以水洗至无色,60%乙醇洗至无色,用旋转蒸发仪分别回收,得到两部分浓缩液,水洗部分浓缩液经大孔树脂HPD100柱分离,以水洗至无色,20%乙醇洗至无色,用旋转蒸发仪回收,得两部分浓缩液,甲醇-水重结晶,水洗部分得化合物 5(260mg),20%乙醇部分得化合物 4(320 mg)。60%乙醇聚酰胺洗脱部分经反相制备色谱柱(MDS-5),用甲醇:0.4%乙酸(40:60)洗脱,部分收集器收集,薄层层析间管检测(氯仿 :甲醇:水 =7:4:1)和 (正丁醇:乙酸:水 =4:1:5),合并相同部分,HPLC-反相 C18制备柱进一步分离纯化,分别得到化合物 1(300 mg),2(290 mg),3(160mg)。

3 结构鉴定

化合物 1 桔黄色粉末,mp.280～282℃,易溶于甲醇、乙醇,盐酸镁粉反应阳性。UVλMeOHmax:203,348 nm;IR(KBr)υmaxcm-1:3419,2931,1602,1674;ESI-MSm/z:463[M+H]+;1HNMR(DMSO-d2,600 MHz)δ:6.699(1H,S,H-3),6.40(1H,d,J=1.8 Hz,H-6),6.76(1H,d,J=1.8 Hz,H-8),7.37(1H,d,J=2.4 Hz,H-2′),6.85(1H,d,J=8.4 Hz,H-5′),7.43(1H,dd,J=8.4,2.4 Hz,H-6′),5.10(1H,d,J=7.2 Hz,Glu H-1),3.67(1H,d,J=10.2 Hz,Glu H-6);13C NMR(DMSO-d2,150 MHz)δ:71.9(C-4″),72.9(C-2″),73.8(C-5″),76.4(C-3″),94.5(C-8),99.5(C-6),99.5(C-1″),102.7(C-3),105.2(C-10),113.3(C-2′),116.1(C-5′),119.0(C-1′),120.6(C-6′),146.1(C-3′),150.8(C-4′),156.9(C-5),161.0(C-9),162.9(C-7),164.60(C-2),172.5(C-6),181.8(C-4),与参考文献[1]对照,鉴定为 luteolin-7-O-β-D-glucuronide。

化合物 2 黄白色粉末,mp.270～272℃,盐酸镁粉反应阳性:203,348 nm;IR(KBr)υmaxcm-1:3109,2728,1610,1612.;ESI-MSm/z:609[MH]-;1H NMR(DMSO-d2,150 MHz)δ:6.74(1H,s,3-H),6.50(1H,d,J=2.4 Hz,6-H),6.80(1H,d,J=1.8 Hz,8-H),7.30(1H,d,J=2.4 Hz,2′-H),br3.673-3.633(3′-H),br3.125-3.001(4′-H),6.90(1H,d,J=8.4 Hz,5′-H),7.50(1H,dd,J=8.4,2.4Hz,6′-H),5.10(1H,d,J=7.2 Hz,Glu-H-1),br3.673-3.633(Glu-H-6),4.18(1H,d,J=7.8 Hz,Glu-H-1′),br3.673-3.633(Glu-H-4′),3.97(1H,d,J=10.2 Hz,Glu-H-6′);13C NMR(DMSO-d2,150 MHz)δ:164.5(C-2),103.1(C-3),181.9(C-4),156.9(C-5),99.6(C-6),162.9(C-7),94.8(C-8),161.1(C-9),105.3(C-10),119.2(C-1′),113.5(C-2′),145.8(C-3′),150.0(C-4′),116.0(C-5′),121.3(C-6′),99.8(Glu-C-1),73.5(Glu-C-2),76.2(Glu-C-3),69.4(Glu-C-4),76.7(Glu-C-5),61.1(Glu-C-6),103.5(Glu-C-1′),73.1(Glu-C-2′),75.4(Glu-C-3′),70.1(Glu-C-4′),77.0(Glu-C-5′),68.5(Glu-C-6′),与参考文献[2]对照,鉴定为 luteolin-7-O-(β-D-glucopyranosyl-2glucopyranoside)。

化合物 3 黄棕色粉末,mp.280～282℃,易溶于甲醇、乙醇,盐酸镁粉反应阳性;:206,336 nm;IR(KBr)υmaxcm-1:3451,2901,1658,1609。ESI-MSm/z:431[M-H]-;1H NMR(DMSO-d2,150 MHz)δ:7.96(2H,d,J=8.7 Hz,2′,6′-H),6.94(2H,d,J=8.7 Hz,3′,5′-H),6.45(1H,d,J=1.8 Hz,6-H),6.83(1H,d,J=1.8 Hz,8-H),6.89(1H,s,3-H),5.07(1H,d,J=7.5Hz,Glu-1-H);13C NMR(DMSO-d2,150MHz)δ:164.2(C-2),103.0(C-3),181.9(C-4),156.9(C-5),99.5(C-6),163.0(C-7),94.8(C-8),105.2(C-10),120.8(C-1),128.5(C-2,6),116.0(C-3,5),161.5(C-4),(C-1),72.9(C-2),76.4(C-3),71.9(C-4),74.2(C-5),172.67(C-6)。与参考文献[3]对照,鉴定为 apigenin-7-O-β-D-glucuronide。

1 Feng XZ(封锡志),Xu SX(徐绥绪),Yue DB(岳大彪),et al.New flavonoids from Ixeris sonchifolia Hance.Chin JMed Chem(中国药物化学杂志 ),1999,9:121-122.

2 Simonyan AV,Shinkarenko AL,Litvinenko VI.Flavonoid glycosides of some species of thyme cultivated in the Caucasus.Rastitel'nye Resursy,1973,9:395-399.

3 Zhu H(朱华),Xiao JB(肖建波),Zou DF(邹登峰),et al.Isolation,purification and identification of apigenin-7-O-β-D-glucuronide in marchantia convoluta with silica column chromatography,RP-HPLC and LC-ESI-MS.Nat Prod Res Dev(天然产物研究与开发)2005,1:38-41.

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