钙调磷酸酶的抑制促进肾小球旁细胞分泌肾素

为检测钙/钙调蛋白依赖的钙调磷酸酶在肾素释放上的调节作用，本研究采用全细胞膜片钳记录单个培养的肾小球旁细胞肾素的分泌。在单个肾小球旁细胞中，钙调磷酸酶抑制剂环孢菌素A（CsA）显著增加了肾小球旁细胞的膜电容，即确定细胞表面区域肾素分泌的检测方法。这种作用的诱导可以通过细胞内给予钙调磷酸酶抑制肽，钙螯合剂乙二醇双（2－氨基乙基）四乙酸（EGTA）或钙调蛋白抑制剂W-13。同时给予EGTA和CsA无叠加作用。蛋白激酶A（PKA）阻断剂RpcAMPs对CsA引起的膜电容增加无影响。细胞内或细胞外给予他克莫司无膜电容的改变。在培养的肾小球旁细胞，卡米达佐（calmidazolium，一种钙调蛋白拮抗剂）和CsA可以显著地刺激肾素分泌，但是卡米达佐和他克莫司没有此作用。肾小球旁细胞表达钙调磷酸酶同工型A-β和A－γ，但是没有A－α。血浆肾素浓度在野生型、敲除钙调磷酸酶A-α或A-β的小鼠中无差异，但是敲除钙调磷酸酶A-α的小鼠经CsA治疗后，血浆肾素浓度增加，而肾素mRNA的表达受到抑制。研究结论是钙调磷酸酶和钙/钙调蛋白不依赖PKA抑制肾小球旁细胞分泌肾素。