凝聚胺法鉴定婴儿脐血ABO血型1 815例

吕先萍,胡利亚,李建英,张克勤

郑州大学第一附属医院输血科郑州 450052

由于婴儿(0～6个月)ABO血型抗原发育不成熟、抗体量少,导致 ABO血型鉴定困难[1-2]。作者对2 881例婴儿脐血标本进行 ABO血型常规定型,对正反定型不符的 1 815例采用凝聚胺方法增强凝集强度,效果良好,报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 2005年1月至2008年10月收集的郑州大学第一附属医院住院出生 24 h内婴儿脐血标本 2 881例,其中男 1 556例,女 1 325例。用常规盐水试管法鉴定ABO正反定型,检出ABO血型正反定型不符及抗原、抗体较弱的标本 1 815例。

1.2 试剂 抗-A、抗-B血清由长春生物研究所提供(抗-A 1:128、抗-B 1:128),ABO反定型细胞由上海生物研究所提供,凝聚胺试剂盒由(台资)珠海贝索生物技术有限公司提供。

1.3 ABO血型鉴定方法

1.3.1 盐水试管法 采用常规盐水试管法检测ABO血型正定型和反定型,反定型应用标准 A细胞、B细胞和O细胞。

1.3.2 凝聚胺法 应用常规盐水试管法检测ABO血型出现正反定型不符者,直接在试管内加入凝聚胺试剂,方法按试剂说明书操作。

1.4 结果 见表1。

表1 2 881例脐血盐水试管法和凝聚胺法抗原、抗体检出情况 例

盐水试管法检测脐血ABO正反定型符合率为37.00%(1 066/2 881),应用凝聚胺试剂增强后ABO正反定型符合率为83.91%(2 263/2 881)。

对于盐水试管法检出抗原、抗体较弱标本(镜下凝集+),包括ABO血型抗原弱者339例,ABO抗体弱者 591例,加入凝聚胺试剂后凝集强度增加(+～■)。

13例标本反定型出现A细胞、B细胞和O细胞同时凝集,经过标准 O型红细胞处理血清后,A细胞、B细胞凝集恢复正常。

2 讨论

在ABO血型鉴定中,应用血型血清学方法检测婴儿ABO血型正反定型难度较大,以往习惯应用检测红细胞抗原来判定ABO血型,但由于婴儿ABO血型抗原较成人弱,只有成人 1/4,因此,只检测红细胞抗原会造成红细胞血型抗原漏检。该研究中作者发现有部分标本红细胞抗原反应非常弱,要借助显微镜才能观察到凝集反应,如无反定型对照极易出现血型判定错误。有 8例标本盐水试管法未检出ABO抗原,正定型误定为 O型,应用凝聚胺试剂后出现应有凝集反应,定为A型 3例、B型5例,应用吸收放散试验证实存在A抗原和B抗原。

婴儿出生时血型抗体不成熟,出生后 4～6个月内抗体活性弱,IgM ABO抗体出生后3～6个月才开始合成,IgG抗体 1～2岁仅相当于正常成人 60%[3],特别是脐血中还含有脐胶,会造成非特异性凝集,因此,婴儿ABO血型反定型鉴定极其困难。而婴儿由于抵抗力差,病情变化快,往往需要快速鉴定血型,以保证临床治疗。该研究结果显示盐水试管法和凝聚胺法ABO血型抗原检出符合率为99.6%(1 995/ 2 003),但盐水试管法出现抗原凝集弱(凝集强度低于+)者占16.9%(339/1 995),凝聚胺法可以增加凝集强度,使部分应用盐水试管法不凝集或出现镜下凝集者出现肉眼可见凝集。在反定型盐水试管法判断无血型抗体的标本中,应用凝聚胺试剂又有 1 515例标本检出抗体,占52.3%(1 515/2 881),与正定型结果相符,并能增加弱抗体的凝集强度。该研究结果说明,凝聚胺法鉴定ABO血型,正反定型均比常规盐水试管法敏感且结果可靠。

另外,该研究中 13例标本反定型出现细胞多凝集现象,用标准 O型红细胞吸收处理被检血清后,再用标准A细胞、B细胞鉴定血型,多凝集消失,考虑是由于脐血中存在脐胶干扰所致。因此,应用脐血鉴定ABO血型反定型建议使用O型红细胞。

婴儿血型鉴定的方法很多[4],如加大血清量法、低离子法和微柱凝胶技术等方法都可以提高抗原、抗体检出率,但同凝聚胺相比都存在局限性。凝聚胺具有抗原、抗体检出速度快、价格低及不需要特殊设备等优点,只要在常规盐水试管法基础上,如果出现ABO血型鉴定正反定型不符,在原有的试管中加入凝聚胺试剂继续进行试验,省时、省材料,易于在基层推广。

[1]徐恩英.288例婴儿ABO血型正反定型结果分析[J].中国输血杂志,2000,13(3):186

[2]李建英,胡利亚,张克勤,等.手工凝聚胺法鉴定婴儿ABO血型 31例体会[J].郑州大学学报:医学版,2004, 39(5):879

[3]杨成民,李家增,季阳,等.基础输血学[M].北京:中国科学技术出版社,2001:180

[4]肖星甫.输血技术手册[M].北京:人民出版社,1985:536