深裂竹根七化学成分研究

王冠元， 聂凤禔

(1.天津市肿瘤医院/天津医科大学附属肿瘤医院 药剂科，天津300060;2.河北医科大学药学院，石家庄050017)

深裂竹根七Disporopsis pernyi(Hua)Diels为百合科竹根七属植物，于我国云南，贵州，四川，广西等大多数地区均有分布，是一种民间常用中药，具有养阴润肺、生津止渴、祛风除湿、清热解毒功效，多用于虚汗多咳、产后虚弱、月经不调等症，有的还用于治疗感冒扁桃体炎、眼结膜炎等症。《贵州草药》中记载该药也可治疗劳伤风湿骨痛、夜间多尿或遗精腰痛等。该属植物化学成分研究报道较少，有文献报道该植物根茎中分离并鉴定了多个新的甾体皂苷类成分［1－2］。

笔者从深裂竹根七的乙醇提取物中运用各种色谱技术和化学结构鉴定手段，分离并鉴定了10个化合物结构，分别为槲皮素(Ⅰ)，槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖苷(Ⅱ)，木犀草素(Ⅲ)，芦丁(Ⅳ)，β－谷甾醇(Ⅴ)，白桦脂酸(Ⅵ)，水杨酸(Ⅶ)，香草酸(Ⅷ)，胡萝卜苷(Ⅸ)，腺嘌呤核苷(Ⅹ)，除化合物Ⅸ以外其它化合物均是首次从该植物中得到。

1 仪器与材料

Bruker Avance DRX和Varian INOVA 500 FT核磁共振仪;熔点测定仪XT4A数字显示显微熔点测定仪(温度未校正);柱色谱用硅胶及薄层色谱用硅胶GF254均为青岛海洋化工厂产品;D101型大孔吸附树脂为天津市海光化工有限公司产品;柱层析用聚酰胺及薄层色谱用聚酰胺为浙江台州路桥四甲生化塑料厂产品;葡聚糖凝胶Sephadex LH－20为Pharmacia产品;所用试剂均为分析纯和色谱纯。深裂竹根七于2007年8月采自云南省蒙自县，经中国科学院昆明植物研究所雷立公研究员鉴定为Disporopsis pernyi干燥地上部分。

2 提取与分离

深裂竹根七干燥的地上部分共5.7 kg，粉碎后用95%乙醇浸泡，之后再分别用95%乙醇回流提取2次，60%乙醇回流提取1次。乙醇提取液浓缩至无醇味后，加适量水混悬，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。石油醚萃取物(10.7 g)经硅胶柱色谱，用石油醚－乙酸乙酯梯度洗脱，再经重结晶纯化，得到化合物Ⅴ;氯仿萃取物(17.0 g)通过硅胶柱层析，二氯甲烷－丙酮梯度洗脱，继而运用重结晶和再次硅胶柱层析得到化合物Ⅵ;乙酸乙酯萃取物(210.6 g)首先采用硅胶柱层析，氯仿－甲醇－水系统梯度洗脱，得到72个流份:流份4～27经硅胶柱层析以氯仿－乙酸乙酯(85∶15)洗脱，再经过Sephadex LH－20柱色谱和重结晶纯化得到化合物Ⅰ和Ⅱ，流份31～50经硅胶柱层析以氯仿－甲醇梯度洗脱，再用聚酰胺柱层析以氯仿－甲醇(87∶13)洗脱，最后经过Sephadex LH－20柱色谱纯化得到化合物Ⅲ和Ⅸ，流份54～66经硅胶柱层析以氯仿－甲醇(8∶2)洗脱，再经过重结晶得到化合物Ⅶ和Ⅷ;正丁醇萃取物(103.4 g)经D101大孔吸附树脂柱，依次用水、30%乙醇、50%乙醇、70%和95%乙醇洗脱，50%乙醇洗脱物(11.8 g)经反复硅胶柱色谱，得到24个流份，流份9～11经过Sephadex LH－20柱色谱和重结晶分离纯化，得到化合物Ⅹ，流份14～20经过聚酰胺柱层析以氯仿－甲醇(85∶15)洗脱，得到化合物Ⅳ。

3 结构鉴定

化合物Ⅰ:黄色针晶(二氯甲烷)，mp＞300℃。1H－NMR(DMSO－d6，500MHz)δ:12.22(1H，s，5－OH)，10.37(1H，s，7－OH)，7.51(1H，d，J=2.0 Hz，2′－H)，7.48(1H，dd，J=2.0，8.4 Hz，6′－H)，6.79(1H，d，J=8.4 Hz，5′－H)，6.32(1H，d，J=2.0 Hz，8－H)，6.08(1H，d，J=2.0 Hz，6－H);13C－NMR(DMSO－d6，125 MHz)δ:147.7(C－2)，135.6(C－3)，175.9(C－4)，156.3(C－5)，98.1(C－6)，163.8(C－7)，93.3(C－8)，160.6(C－9)，102.9(C－10)，121.9(C－1′)，115.0(C－2′)，145.0(C－3′)，147.6(C－4′)，115.5(C－5′)，119.9(C－6′)，以上波谱数据与文献［3］报道一致，鉴定化合物Ⅰ为槲皮素(quercetin)。

化合物Ⅱ:黄色短蔟状针晶(甲醇)，mp 170～171 ℃。1H－NMR(DMSO－d6，500 MHz)δ:7.55(1H，dd，J=1.8，8.5 Hz，6′－H)，7.53(1H，d，J=1.8 Hz，2′－H)，6.82(1H，d，J=8.5 Hz，5′－H)，6.32(1H，d，J=2.0 Hz，8－H)，6.11(1H，d，J=2.0 Hz，6－H)，5.27(1H，d，J=7.5 Hz，Glc H－1);13C－NMR(DMSO－d6，125 MHz)δ:155.7(C－2)，133.0(C－3)，176.1(C－4)，160.8(C－5)，98.1(C－6)，163.8(C－7)，93.5(C－8)，155.9(C－9)，103.2(C－10)，121.3(C－1′)，115.7(C－2′)，145.1(C－3′)，148.0(C－4′)，115.8(C－5′)，120.6(C－6′)，101.7(C－1″)，74.0(C－2″)，75.8(C－3″)，69.9(C－4″)，77.4(C－5″)，60.6(C－6″)，以上波谱数据与文献［4］报道一致，鉴定化合物Ⅱ为槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖苷 (quercetin 3－O－β－D－glucopyranoside)。

化合物Ⅲ:黄色粉末(氯仿)，mp＞300℃。1HNMR(DMSO－d6，500 MHz)δ:12.90(1H，s，5－OH)，7.49(1H，d，J=2.0 Hz，2′－H)，7.38(1H，m，6′－H)，6.87(1H，d，J=8.5 Hz，5′－H)，6.61(1H，s，3－H)，6.35(1H，d，J=2.3 Hz，8－H)，6.17(1H，d，J=2.3 Hz，6－H)。以上波谱数据与文献［5］报道一致，鉴定化合物Ⅲ为木犀草素(luteolin)。

化合物Ⅳ:黄色粉末(甲醇)，mp 176～178℃。1H－NMR(DMSO－d6，500 MHz)δ:7.58(overlapped，6′－H)，7.46(1H，br s，2′－H)，6.80(1H，d，J=8.5 Hz，5′－H)，6.33(1H，br s，8－H)，6.15(1H，br s，6－H)，5.29(1H，d，J=6.5 Hz，Glc H－1)，4.31(1H，s，Rha H－1)，0.98(3H，d，J=6.0 Hz，Rha－CH3);13C－NMR(DMSO－d6，125 MHz)δ:156.5(C－2)，135.0(C－3)，177.9(C－4)，162.7(C－5)，98.9(C－6)，165.2(C－7)，94.4(C－8)，159.0(C－9)，105.5(C－10)，122.4(C－1′)，115.8(C－2′)，149.0(C－3′)，114.9(C－4′)，117.1(C－5′)，122.9(C－6′)，101.6(C－1″)，75.5(C－2″)，77.7(C－3″)，71.8(C－4″)，76.3(C－5″)，68.1(C－6″)，104.7(C－1‴)，71.0(C－2‴)，72.1(C－3‴)，73.6(C－4‴)，69.5(C－5‴)，17.6(C－6‴)，以上波谱数据与文献［4］报道一致，鉴定化合物Ⅳ为芦丁(rutin)。

化合物Ⅴ:白色针晶(丙酮)，mp 136～137℃。与对照品混合熔点不下降。TLC检查，5%硫酸乙醇溶液显红色，与对照品所呈斑点Rf值、颜色一致，混合点样采用多种展开剂展开均呈单一斑点，鉴定化合物Ⅴ为 β－谷甾醇(β－sitosterol)。

化合物Ⅵ:无色针晶(甲醇)，mp 289～291℃。Liebermann－Burchard 反应阳性。1H－NMR(CDCl4，500 MHz)δ:4.68(1H，br s，29－Ha)，4.55(1H，br s，29－Hb)，3.11(1H，m，3－H)，1.65(3H，s，30－CH3)，1.23(3H，s)，0.95(3H，s)，0.93(3H，s)，0.79(3H，s)，0.72(3H，s);13C－NMR(DMSO－d6，125MHz)δ:39.3(C－1)，28.2(C－2)，79.0(C－3)，40.4(C－4)，55.1(C－5)，18.9(C－6)，33.8(C－7)，40.9(C－8)，49.2(C－9)，37.3(C－10)，20.7(C－11)，25.2(C－12)，38.0(C－13)，42.9(C－14)，29.9(C－15)，32.7(C－16)，55.0(C－17)，48.6(C－18)，48.4(C－19)，150.9(C－20)，29.9(C－21)，36.5(C－22)，28.8(C－23)，16.0(C－24)，15.1(C－25)，15.9(C－26)，14.4(C－27)，179.0(C－28)，109.5(C－29)，19.9(C－30)，以上波谱数据与文献［6］报道一致，鉴定化合物Ⅵ为白桦脂酸(betulinic acid)。

化合物Ⅶ:白色针晶(氯仿)，mp 161～162℃。1H－NMR(CD3OD，500 MHz)δ:7.81(1H，dd，J=8.0 1.5 Hz，3－H)，7.44(1H，ddd，J=7.0，7.0，1.5 Hz，5－H)，6.84(1H，dd，J=8.0，1.3 Hz，6－H)，6.79(1H，ddd，J=7.0，7.0，1.3 Hz，4－H);13C NMR(CD3OD，125 MHz)δ:113.1(C－1)，162.2(C－2)，116.9(C－3)，135.0(C－4)，118.9(C－5)，131.1(C－6)，171.5(C－7)，以上波谱数据与文献［7］报道一致，鉴定化合物Ⅶ为水杨酸(salicylic acid)。

化合物Ⅷ:无色针晶(氯仿)，mp 177～180℃。1H－NMR(CD3OD，500 MHz)δ:7.56(1H，d，J=1.8 Hz，2－H)，7.55(1H，dd，J=1.8，8.5 Hz，6－H)，6.83(1H，d，J=8.5 Hz，5－H)，3.59(3H，s，－OCH3);13C NMR(CD3OD，125MHz)δ:121.9(C－1)，113.5(C－2)，147.5(C－3)，151.5(C－4)，114.6(C－5)，124.1(C－6)，168.8(C－7)，55.2(－OCH3)，以上波谱数据与文献［8］报道一致，鉴定化合物Ⅷ为香草酸(vanillic acid)。

化合物Ⅸ:白色粉末(甲醇)，mp 287～289℃。与对照品混合熔点不下降。TLC检查，5%硫酸乙醇溶液显紫红色，与对照品所呈斑点Rf值、颜色一致，混合点样采用多种展开剂展开均呈单一斑点，鉴定化合物Ⅸ为胡萝卜苷(daucosterol)。

化合物Ⅹ:白色粉末(甲醇)，mp 238～239℃。1H－NMR(DMSO－d6，500 MHz)δ:8.39(s，8－H)，8.10(s，2－H)，7.35(s，－NH2)，5.88(d，J=6.0 Hz，1′－H)，4.60(dd，J=11.5，6.0 Hz，2′－H)，4.11(dd，J=6.8，4.8 Hz，3′－H)，3.89(dd，J=6.8，3.3 Hz，4′－H)，3.55 ～ 3.67(m，5′－H);13C NMR(DMSO－d6，125 MHz)δ:153.1(C－2)，149.7(C－4)，156.8(C－5)，120.0(C－6)，140.7(C－8)，88.9(C－1′)，74.2(C－2′)，71.4(C－3′)，86.5(C－4′)，62.4(C－5′)，以上波谱数据与文献［9］报道一致，鉴定化合物Ⅹ为腺嘌呤核苷(adenosine)。

致谢:核磁共振波谱数据由北京微量化学研究所和天津大学分析与测试中心提供，感谢涂光忠老师和周维义老师给予的大力支持。

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