库拉索芦荟多糖和木立芦荟多糖体内抗肿瘤作用

朱坤杰， 宋 娟， 沈云虹， 邢焕焕， 王 洁

(齐齐哈尔医学院，黑龙江齐齐哈尔161006)

芦荟多糖(Aloe polysaccharide，AP)是芦荟凝胶部分除去水分以外的主要成分，在新鲜的凝胶中含量约为0.27%～0.5%，AP作为药用品种芦荟的主要活性物质之一，已经受到人们的高度重视。研究证明，AP具有杀菌、消炎、抗辐射、抗艾滋病病毒、抗肿瘤和调节免疫［1］等多种药理作用，其中它的抗肿瘤作用更是备受关注。以往进行的观察主要以粗多糖(纯度约为30% ～50%)为基础。本实验主要对纯度约为88%和75.6%的木立芦荟多糖和库拉索芦荟多糖的体内抗肿瘤作用做了进一步的观察。

1 实验材料

1.1 动物 昆明种小鼠80只，♀♂兼用，由黑龙江省肿瘤研究所提供，动物合格证号:医动字9-3-2。

1.2 药品 纯度75.6%库拉索芦荟多糖及88.0%木立芦荟多糖，由中科院上海药物研究所提供。S180、H22荷瘤小鼠均购于黑龙江省肿瘤研究所;5-Fu上海旭东海普药业有限公司生产，批号:200211。

1.3 仪器 血球计数板，上海市求精生化仪器厂生产，电子天平。

2 实验方法

2.1 芦荟多糖对S180小鼠的肿瘤抑制率 将传代8～10 d健康状况良好的S180荷瘤小鼠脱颈处死，酒精浸泡消毒，无菌状态下取出腹水，并用无菌生理盐水按一定的比例稀释成瘤细胞悬液(瘤细胞含量约为2×107/mL)。取纯系昆明种小鼠80只，每只小鼠右腋窝皮下接种0.2 mL，接种24 h后，随机分成8组，每组10只:1组为生理盐水对照组;2组为5氟尿嘧啶阳性对照组(15 mg/kg·d);3、4、5组为木立芦荟多糖高、中、低剂量组(100 mg/kg·d，50 mg/kg·d，25 mg/kg·d);6、7、8组为库拉索芦荟多糖高、中、低剂量组，给药剂量和木立芦荟多糖相同。于肿瘤接种后24 h灌胃给药，给药容量0.2 mL/10 g，疗程10 d。另设空白对照组(10只)同步灌胃同容量的生理盐水。停药后24 h称量小鼠体重，然后脱颈处死小鼠，剖取瘤体、脾脏、胸腺，称取其重量，计算抑瘤率、脾指数、胸腺指数。

肿瘤抑制率=1-实验组平均瘤重/对照组平均瘤重［2］

免疫器官指数=免疫器官重量(mg)/小鼠体重(g)

我们同时观察了不同药物对小鼠荷瘤期间体重的影响。以给药结束后同给药前小鼠体重的差值进行组间比较，观察抗肿瘤治疗期间小鼠体重的变化。

2.2 两种芦荟多糖对H22荷瘤小鼠生存期的影响 无菌条件下抽取传代7 d的H22荷瘤小鼠腹水，无菌生理盐水溶液按一定比例稀释成瘤细胞悬液(瘤细胞含量约为2×107/mL)。取纯系昆明种小鼠80只，每鼠腹腔接种H22瘤细胞悬液0.2 mL。分组及给药途径同前，连续给药14 d，然后继续观察30 d，记录小鼠的生存时间，计算生命延长率。生命延长率(%)=(用药组平均生存天数-对照组平均生存天数)/对照组平均生成天数×100%。

3 结果

3.1 芦荟多糖对S180荷瘤小鼠的肿瘤抑制率 不同剂量的库拉索芦荟多糖及木立芦荟多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用见表1。对荷瘤小鼠体重及胸腺和脾指数的影响见表2。

由表1可知，低剂量的木立芦荟和库拉索芦荟多糖对S180荷瘤小鼠体内的肿瘤生长具有明显的抑制作用，其肿瘤抑制率和5-FU相似，但两种多糖的中高剂量组的肿瘤抑制作用不明显。可见，两种芦荟多糖在25 mg/kg时发挥较好的抗肿瘤作用，抑瘤率为40%以上，随着剂量的增加，抑瘤作用并不增强。

表1 不同剂量的两种芦荟多糖对S180荷瘤小鼠的体内抑瘤作用

表2 不同剂量的两种芦荟多糖对荷瘤小鼠体重及胸腺和脾指数的影响

从动物给药期间体重的变化可见，同空白组比较，荷瘤组小鼠体重明显增加，化疗药物5-FU可明显降低荷瘤小鼠的体重，使小鼠体重呈负增长状态。而不同剂量两种芦荟多糖对荷瘤小鼠体重的影响与5-FU有明显差异。其中低剂量组小鼠体重变化和空白组相似。可见，两种芦荟多糖在发挥抗肿瘤作用的同时对荷瘤机体的生长无明显影响。

荷瘤小鼠的胸腺指数有增加的趋势，但脾指数显著降低。5-FU可显著降低荷瘤小鼠胸腺和脾脏的重量，使胸腺指数和脾指数明显降低。两种芦荟多糖可降低荷瘤小鼠的胸腺指数，但增加荷瘤小鼠的脾指数，和5-FU组比较具有显著差异，特别是低剂量的库拉索芦荟多糖组，增加脾指数的作用更明显，和模型组比较差异显著，P＜0.05。

3.2 芦荟多糖对H22荷瘤小鼠生存期的影响 两种芦荟多糖对H22荷瘤小鼠生存期影响的测定结果见表3。

从表3可见，两种芦荟多糖均可不同程度地延长H22腹水瘤小鼠的生存时间，以中、低剂量的作用较好，小鼠生命延长率达45%以上。高剂量组作用不明显。

表3 两种芦荟多糖对H22荷瘤小鼠生存时间的影响

4 讨论

我们的实验结果显示，化疗药物5-FU对S180荷瘤小鼠的肿瘤抑制率和生命延长率分别为49%和59.4%。低剂量(25 mg/kg·d)的两种芦荟多糖也显示较好的体内抗肿瘤作用，肿瘤抑制率为40%以上，中、低剂量的两种芦荟多糖对荷瘤小鼠的生命延长率为45%以上，且两种芦荟多糖的抗肿瘤作用无明显差异，和文献报道相似，不同的是，已有文献报道的有效剂量多为100 mg/kg·d［3］。实验还发现，模型组小鼠体重显著增加，5-FU可使荷瘤小鼠体重明显降低，可见5-FU在发挥抗肿瘤作用的同时可能影响机体的生长从而给机体造成损伤。芦荟多糖发挥明显抗肿瘤作用的同时，对小鼠体重影响不明显，芦荟多糖给药组小鼠体重变化和空白组小鼠的变化相似。提示两种芦荟多糖抗肿瘤作用的同时，对机体的生长影响较小，对机体的损伤小，或优于5-FU。

对荷瘤小鼠免疫器官重量的检测结果显示，荷瘤小鼠的胸腺指数有增加的趋势，但脾指数显著降低，提示荷瘤小鼠的免疫功能可能出现紊乱。5-FU可显著降低荷瘤小鼠胸腺和脾脏的重量，使胸腺指数和脾指数明显降低，加重荷瘤机体的免疫损伤。而两种芦荟多糖可降低荷瘤小鼠的胸腺指数，增加荷瘤小鼠的脾指数，逆转荷瘤小鼠的免疫器官指数的改变，和5-FU组比较具有显著差异。提示改善荷瘤机体免疫功能紊乱可能是芦荟多糖抗肿瘤作用的重要机制。

本次实验提示，75.6%和88%的库拉索芦荟多糖和木立芦荟多糖有效抗肿瘤剂量较以往文献报道的剂量明显降低，可能与多糖的纯度提高有关。此外，芦荟多糖对免疫系统的作用不能简单地用增强免疫系统功能来描述，因为两者均可抑制荷瘤小鼠的胸腺指数的增加，这一结果和已有的研究结果不同［3］;低剂量库拉索芦荟多糖则可明显增加荷瘤小鼠脾指数，其他各给药组也表现一定的增加趋势。因此，推测恢复荷瘤机体的免疫功能紊乱可能是其发挥抗肿瘤作用机制的一个重要方面，特别是两者对脾脏功能的影响可能是其发挥抗肿瘤作用的主要免疫机制，相关进一步的研究观察工作正在进行。

［1］Antoni F，Emma S.Sanchez S S.Compositional features of polysaccharides from Aloe Vera(Aloe barbadensis Miller)plant tissues［J］.Carbohydrate Polymers，1999，39:109-117.

［2］徐淑云，卞如濂，陈 修.药理实验方法学［M］.第2版.北京:人民卫生出版社，1991.

［3］邹 翔，汲晨锋，高世勇，等.3种芦荟多糖抗肿瘤作用的比较分析［J］.哈尔滨商业大学学报(自然科学版)，2004，20(1):14-17.