浓百合剂提取工艺优化研究

杨 君,孙东宁,杨跃辉

浓百合剂为纯中药制剂,主要由麻黄、苦杏仁、黄芩、甘草等 16种中药组成。具有清热解毒、宣肺平喘、化痰止咳之功效,临床上主要用于百日咳及其他咳喘症等。该制剂经多年的临床应用,疗效确切,为了便于临床应用,最大限度地保留有效成分,确保临床治疗效果,笔者以正交试验优化原有制剂工艺,以处方中所含有效成分麻黄碱和伪麻黄碱含量为评价指标,筛选出合理的提取工艺,现将实验结果报道如下。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试药

1.1.1 主要仪器 高效液相色谱仪 A gilentlloo (美国安捷伦);TC-10KA型与 T-1000型电子天平[美国双杰兄弟 (集团)有限公司 ];AS10200B超声波消洗器(天津奥特赛恩斯仪器有限公司);砂芯过滤装置(沈阳市华侨玻璃仪器厂)。

1.1.2 试药 药材 (购自安徽毫州市中药饮片厂,并经检验符合药典规定);盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱(中国药品生物制品检定所,批号分别为1241-200001和 1237-200002);高效液相色谱仪所用试剂为色谱纯,水为重蒸馏水,其他试剂均为分析纯。

1.2 实验方法与结果

1.2.1 溶液的制备 对照品溶液的制备:分别精密称取盐酸麻黄碱对照品 9.96m g、盐酸伪麻黄碱对照品 10.14m g,置 100mL容量瓶中,用甲醇溶解稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。供试品溶液的制备:用移液管精密称取浓百合剂 10mL置具塞锥形瓶中,精密加入 40mL甲醇,称重、超声40m in,放冷,再称重,用甲醇补足重量,用微孔滤膜滤过,滤液作为供试品溶液。

1.2.2 正交试验设计 根据水煎煮提取生产的实际情况,影响水提取的主要因素有浸泡时间(A)、加水量(B)、提取次数 (C)、提取时间 (D)4个。现对这 4个因素进行考察,每个因素 3个水平,按 L9(34)正交表进行试验,因素水平表见表1。以麻黄碱、伪麻黄碱含量为指标,综合评价此提取工艺水平优劣。

表1 因素水平表

1.2.3 制备工艺流程 称取处方量药材共 9份,按因素水平表的规定加热煎煮、合并煎液、滤过,滤液浓缩至相对密度为 1.02(50℃)以上,分装到100 mL的塑料瓶中。

1.2.4 盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量测定[1]色谱柱:Agilent SB C18-Aq(4.6 mm×150 mm, 5μm);流动相:乙腈-0.1%三乙胺水溶液(1.8∶98.8,冰醋酸调 pH 值 3.0);流速: 1.0 mL/min;检测波长:210 nm;柱温:25℃;进样量:10μL。

1.2.5 正交试验设计与实验结果分析 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μL,注入高效液相色谱仪,得出色谱图,根据外标法公式计算,得盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱含量,结果见表2,直观分析见表 3。

2 结果

从表 3的直观分析,以麻黄总生物碱含量为考察指标,浓百合剂水煎提取的最佳工艺条件为C2A1B2D3、C3A1B2D3,即加水提取 2次 (盐酸麻黄碱)或 3次(盐酸伪麻黄碱)、浸泡 0.5 h、每次加6倍量水、煎煮 2 h,考虑到实际生产的效率和经济效益,为降低成本、节约能源,确定水煎提取工艺条件为加水浸泡 0.5 h,提取 2次,每次加 6倍量水、提取 2 h。

表2 正交试验设计与结果

表3 实验结果分析

3 验证试验

为验证筛选工艺的可行性和产品质量指标的稳定性,按照筛选的最佳工艺条件,连续生产 3批浓百合剂,每组随机取样检验,并与原处方工艺生产的浓百合剂质量进行对比,结果见表 4。

表4 质量考察结果(mg/mL)

根据中药制剂稳定性考察的基本要求,对筛选工艺生产的浓百合剂进行稳定性研究。具体操作:取浓百合剂样品(批号为 20090113)分别于 0、1、2、3、6、9个月,对其外观性状、鉴别、检查等稳定性项目进行测定。结果均无明显变化,表明以筛选工艺生产的浓百合剂稳定性良好。

4 讨论

麻黄为本方君药,其主要有效化学成分为麻黄碱、伪麻黄碱等生物碱类,易溶于水,而且其他药材的主要成分或有效成分多为水溶性成分,故选择水为浸出溶剂,采用煎煮法提取,以保证有效化学成分的提取完全。以麻黄碱、伪麻黄碱的含量为指标做正交设计,确定浓百合剂的最佳水提取工艺。通过综合分析,既要最大限度地提取有效成分,又要从经济效益方面考虑降低成本,得出最佳提取条件为处方量药材,加 6倍量水浸泡 0.5 h,煎煮 2次,每次 2 h。在验证试验中,将筛选工艺生产的浓百合剂中麻黄碱、伪麻黄碱含量进行了测定,并与原生产工艺生产的浓百合剂进行比较,大大提高了有效成分的含量,提升了药品质量,增加了疗效。此外,稳定性试验也验证了该提取工艺的稳定性,说明了其可行性。

[1] 姜清华,菅凌燕,王慧娟.RP-HPLC法测定浓百合剂中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量[J].化学与生物工程,2008, 25(11):72-74.