妊娠期高血压疾病患者瘦素水平的变化及其意义

陕西省妇幼保健院(西安 710003) 贺译平 刘娟弟 周 欣

妊娠期高血压疾病患者瘦素水平的变化及其意义

陕西省妇幼保健院(西安 710003) 贺译平 刘娟弟 周 欣

目的:研究瘦素在妊娠期高血压疾病患者的表达及其临床意义。方法:对60例妊娠期高血压疾病患者,其中妊娠期高血压组(20例)和子痫前期组(20例重度、20例轻度),正常妊娠组(20例),用 ELISA法分别测定分娩前以及分娩后1周母体静脉血、脐静脉血瘦素的浓度;采用免疫组织化学法检测瘦素在胎盘中的定位和表达。结果:妊娠期子痫前期组的瘦素浓度明显高于同期正常妊娠组,差异均有显著意义(P＜0.05);分娩后1周后所有病例母体血浆瘦素水平急剧下降,接近正常未孕水平;子痫前期的脐静脉血瘦素水平明显高于妊娠期高血压和正常组,差异有显著性(P＜0.05);瘦素在胎盘绒毛合体滋养细胞、细胞滋养细胞、血管内皮细胞胞浆中均有表达;瘦素蛋白表达强度在正常妊娠、妊娠期高血压、子痫前期依次上升,差异均有显著意义(P＜0.05)。结论:妊娠期高血压疾病患者随着病情加重,瘦素水平逐步增加,可作为预示妊娠期高血压疾病病情严重程度的敏感指标之一。

瘦素是肥胖基因的蛋白产物,主要是由脂肪细胞合成和分泌,参与机体的能量代谢。但近年来研究发现,除脂肪组织外,胎盘组织也可以分泌瘦素[1],瘦素与妊娠和生殖调节存在密切关系[2,3]。妊娠期高血压疾病是妊娠期特发性疾病,其病因尚未明确。目前关于妊娠期高血压疾病瘦素水平的研究报道不一[4～6],本研究采用放射免疫法检测了 60例妊娠期高血压疾病患者及 20例正常妊娠妇女分娩前后血清及脐血的瘦素水平,并用免疫组化方法检测胎盘组织的瘦素水平,以探讨妊娠期高血压疾病患者血清瘦素水平的变化及其临床意义。

对象与方法

1 研究对象 选择2008年 7月至2009年5月在本院产科住院的妊娠期高血压疾病患者 60例,其中妊娠期高血压20例、轻度子痫前期 20例、重度子痫前期20例,诊断及分类标准参考全国统编教材第 6版《妇产科学》,孕周为35～ 41周。以 20例正常住院分娩产妇作为对照,其年龄、孕周、孕前体重指数均与妊娠期高血压组相匹配。所有孕妇均为非肥胖初产、单胎。既往无糖尿病、心脏病及肾病史,无胎膜早破、早产和感染征象,无吸烟史。

2 方 法 收集产妇的年龄、体重、身高,同时计算体重指数(PI)。所有病例均于分娩前空腹抽取肘静脉血2m l,产时抽取脐血2m l,分娩后1周空腹抽取肘静脉血2m l,2400rpm离心10m in,取血清置-80℃冰箱保存待测。胎盘娩出后立即无菌状态下取胎盘中央母体面 1cm×1 cm× 1cm的胎盘组织,用无菌 PBS缓冲液冲洗标本数次,立即置入10% 甲醛溶液中固定12h后,常规石蜡包埋。

3 结果判定 阳性表达水平以综合计分法进行半定量分析。随机选取5个400倍视野计数滋养细胞总数和阳性细胞数,得出阳性细胞百分比并计分。无阳性细胞为0分,阳性细胞占 1%～ 25%为 1分,26%～49%为2分,≥50%为3分。根据多数细胞的着色强度进行强度计分。细胞内无棕黄色颗粒或呈均匀一致的淡黄色,与背景一致为 0分,胞浆内可见淡黄色颗粒明显高于背景为 1分,胞浆内可见较深棕色颗粒为2分,胞浆内可见大量深棕色颗粒为 3分。2种计分方法相加,0～ 1分为阴性 (-),2为 (+ ),3～ 4分为 （),5～ 6分为 ()。

结 果

1 不同组别瘦素水平比较 见表1。正常孕妇产前体内瘦素水平与各妊娠期高血压疾病组孕妇产前体内瘦素水平存在显著性差异(P＜0.05),妊娠期高血压疾病组明显高于正常孕妇,且随妊娠期高血压疾病的加重,体内瘦素水平亦增加,各组两两比较有显著性差异(P＜0.05)。重度子痫前期、轻度子痫前期的脐静脉血瘦素水平组间差异有显著性,且均高于妊娠期高血压和正常组,差异有显著性(P＜0.05),后两组水平无明显差异(P＞0.05)。产后1周各组间产妇瘦素水平无显著性差异。

表 1 不同组别瘦素水平比较(±s,μg/L)

表 1 不同组别瘦素水平比较(±s,μg/L)

组 别 分娩前 脐血 分娩后正常组 26.12± 3.55 6.32± 3.35 15.21± 4.56妊娠期高血压 28.50±5.03 6.45± 3.61 16.35±4.64轻度子痫前期 33.07± 7.82 7.25± 4.02 17.13±5.28重度子痫前期 37.14± 8.35 8.33± 4.33 17.53±5.46

2 不同组别胎盘瘦素表达水平比较 见表2。所有观察病例胎盘绒毛合体滋养细胞、细胞滋养细胞和血管内皮细胞的胞浆内均有不同程度瘦素蛋白表达,但绒毛血管内皮细胞以及间质细胞中均无阳性染色。瘦素在胎盘中由弱至强的表达顺序分别为:正常妊娠、妊娠期高血压、轻度子痫前期、重度子痫前期。妊娠期高血压与正常妊娠比较,差异有显著性(P＜0.05);子痫前期组与正常妊娠组比较,差异有显著性(P＜0.05);子痫前期组与妊娠期高血压组比较,差异有显著性(P ＜0.05)。

表 2 不同组别胎盘瘦素表达水平比较

讨 论

瘦素(Lep)是由OB基因编码,主要由脂肪细胞分泌的蛋白质激素,在体内具有广泛的生物学效应。除可调节摄食活动,影响脂质及糖类代谢外,还可通过激活交感神经参与血压的调节与内环境的稳定[7]。最初认为Lep都由白色脂肪组织表达,以后研究发现,Lep在下丘脑、垂体、肺等多种组织都有表达。近年来研究表明胎盘参与 Lep的合成和分泌,是妊娠期 Lep的重要来源之一。动物实验发现,当给实验动物注射大剂量瘦素后,实验动物心率加快,血压升高;并且发现高血压患者血清瘦素水平和血浆肾素活性及血浆醛固酮浓度有关[8]。在妊娠期高血压疾病时,脐血及母血中瘦素含量都明显升高,并且随着病情的加重而增长,因此,瘦素分泌的增多与血压的升高有直接关系。

瘦素介导妊娠期高血压的发病机制,具体可能包括下列途径:①交感神经系统(SNS):目前认为 SNS和脂肪组织之间存在一个反馈环路,瘦素就是正反馈环节上的信号之一;②肾素-血管紧张素系统(RAS):瘦素和 RAS通过影响人体 SNS、水电解质代谢以及血管重塑来参与血压的调控。血清瘦素水平、血管紧张素水平、平均动脉压三者之间呈正相关,但瘦素如何影响RAS的机制尚不清楚;③瘦素影响胰岛素敏感性:高胰岛素血症和胰岛素抵抗是引起高血压病的危险因素,其机制是多方面的。瘦素可能在胰岛素抵抗性高血压的发生、发展过程中扮演了重要的角色;④瘦素促进血管内皮细胞增生:瘦素在 10～ 40 ng/L剂量范围内可引起人脐静脉血管内皮细胞增生,且金属间质蛋白酶(MMPs)MMP-2、MMP-9、金属蛋白酶的组织抑制因子(TIMPs)TIMP-1及 TIMP-2的表达与瘦素水平呈剂量正相关关系。

本研究结果显示,子痫前期孕妇血清及脐血瘦素水平明显高于正常孕妇,据此推测瘦素与妊娠期高血压的发生发展有关,不同程度的妊高征孕妇血浆瘦素水平有明显差异,提示瘦素与妊高征的严重程度有关;产后 1周各组间产妇瘦素水平无显著性差异,这说明妊高症患者的瘦素水平增高主要与胎盘来源的瘦素增加有关,胎盘功能异常是妊高症发病的主要原因;子痫前期患者胎盘组织瘦素表达与正常孕妇胎盘瘦素表达部位相同,但子痫孕妇胎盘瘦素表达水平显著高于正常妊娠晚期孕妇,这提示子痫前期血清中升高的瘦素主要来源于胎盘组织,其可能参与了子痫前期的发病。因此,血清瘦素水平可作为监测妊娠期高血压疾病严重程度的临床指标。

[1] Masuzaki H,Ogawa Y,Sagaw a N,et al.Nonadipose tissue prduction of leptin:leptin as a novel p lacentderivad hormone in humans[J].Nature,1996,380:677-679.

[2] Grosfeld A,Turban S,Andre J,et al.Transcrip tional effect o f h ypoxia on p lacental lep tin[J].FEBS Lett,2001,502(3):122-126.

[3] Linnemann K, Malek A, Schneider H,et al.Physiological and patho logical regulation of feto /p lacenta/maternal lep tin exp ression[J].Biolchem Soc Tran,2002,20(p t2):86-90.

[4] M aretinoz E,Gonozalez M,Pasce S.Serum lep tin levels and theseverity of preeclampsia[J].Arch Gynecol Obstet,2000,264:71-73.

[5] M ise H,Sagawa N,Matsumoto T,eta l.Augmented p lacental p roduction o f lep tin in p reeclam psia:possible invo lvement o f p lacental hypoxia[J].J Clin Endoc rinol Metab,1998,83:3225-3229.

[6] Collins S,KuhnCM,Petro AE,et a l.Role o f lep tin in fat regu lation[J].Nature,1996,380:677-679.

[7] Mise H,Sagawa N,Matsunoto T,et al.Augmented p lacental p roduction o f lep tin in p reeclampsia:possible invo lvement of p lacenta lhypoxia[J].JClin Exdoc rinol Metab,1998,83(9):3225-3229.

[8] 胡 坤,严亚迎,高英敏,等.妊高征患者血清瘦素水平与血压的相关性研究 [J].实用医学杂志,2003,19(2):137.

Change and its signifiance of leptin level in PIH patients

Shaanxi Maternity and Child Care Centers(Xi’an 710003) He Yiping Liu Juandi Zhou Xin

Objective:To investigate the change and its signifiance of leptin level in PIH patients.Methods:The materna l p lasma samples o f 60 PIH p regnant w omen and 20 norma l p regnant w omen w ere obtained before and 7 days after delivery.And the umbilical p lasma samples o f them also w ere obtained a fter delivery.The level o f lep tin w as valued by enzyme-linked immunoradioassay technique.The correlativeanalysis between the levels of serum lep tin w as performed.And the expression and location of leptin in placenta w ere exp lored by immunohistochemistry(SP).Based on pregnancy outcomes,the subjects were divided into healthy norma l pregnant group(20 cases),gestationa l hypertension group(20 cases)and p reeclam ptic group(20 severe and 20mild).Resu lts:The levels o fmaternal plasma lep tin in p reeclampsia were significantly higher than those in healthy normal pregnant group at the same stages(P＜0.05,respectively),but no change existed betw een gestational hypertension and norma l pregnant group(P＞ 0.05,respectively).The levels of maternal p lasma leptin rapid ly dropped into the levels of non-pregnancy on all subjects after delivery.The levels of umbilical blood leptin in p reeclampsia w ere significantly higher than those in hea lthy normal pregnant group.The location of lep tin in placentas was existed in the cy toplasm o f villous syneytiotrophob last,cy totrophoblast and vascu lar endothelial cells.The expressional intensions of leptin protein w ere higherthan in gestationalh ypertension(P＜0.05,respectively),and the intensions in gestational hypertension group w ere higher than those in healthy norma l p regnancy group by turn(P＜0.05,respectively).Conclusion: The lep tin levels in PIH patients are higer than those in normal pregnaney,and related to the severity of PIH.The level of leptin can be a clinica marker of the degree o f preeclampsia.

Hypertension,pregnancy-induced Pre-eclam psia Lep tin

高血压,妊娠性 先兆子痫 瘦素

R714.24

A

1000-7377(2010)02-0174-03

(收稿:2009-09-25)

·短篇论著·