中药复方化妆品防晒添加剂质量分析

龚占峰　陈进文　章文颖　王　辉　刘焱文

摘 要：目的：建立中药复方防晒添加剂的定性定量分析方法。方法：采用薄层色谱法对槐花、陈皮、五倍子进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定芦丁的含量。结果：槐花、陈皮、五倍子的特征斑点清晰，分离度好，阴性对照无干扰；对照品芦丁在0.2048~2.048μg范围内具良好的线性关系（r=0.9995）；平均回收率为96.98%，RSD=1.42%。结论：该质量控制方法简便可行，薄层色谱鉴别专属性强，含量测定的分离效果好，准确性强，可用于防晒添加剂的质量控制。

关键词：防晒添加剂；薄层色谱法；高效液相色谱法；芦丁；质量分析

中图分类号：R914.1文献标识码：A文章编号：1673-2197（2009）02-0055-03

中药复方防晒添加剂的处方由槐花、陈皮、桔核、五倍子、女贞子、甘草六味药组成。采用溶剂法和大孔吸附树脂纯化技术对复方进行提

取纯化［1］，所得提取物可作为化妆品的添加剂，具有防晒的功效。为控制本品质量，我们对其主要成分进行了薄层定性鉴别，并采用HPLC法测定了本品主要成分芦丁的含量［2］，建立了中药复方防晒添加剂的质量分析方法［3］。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent 1100高效液相色谱仪， BP211D电子天平（Sartorius公司），十万分之一分析天平（Sartorius BP-211D），万分之一分析天平（Metter Toledo AL204）超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 试药

防晒添加剂、芦丁对照品及阴性对照品均为本实验室自制；橙皮苷对照品（批号731－8601），槲皮素对照品（批号081－9003）均购自中国药品生物制品检定所。硅胶G、F254由青岛海洋化工厂提供，水为双蒸水，其余试剂均为分析纯。

2 定性鉴别

2.1 槐花的TLC鉴别

取本品1mL，加60%乙醇定容至10mL，作为供试品溶液；取槲皮素对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.24mg的溶液，作为对照品溶液；取槐花对照药材粉末0.2g，加甲醇5mL，密塞，振摇10min，滤过，滤液作为对照药材溶液；按同法制备该处方缺槐花阴性对照品溶液。按照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、槲皮素对照品溶液、槐花对照药材溶液、槐花阴性对照液各10、5、10、5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（5∶3∶1.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；槐花阴性对照色谱在与槲皮素对照品色谱相应的位置上无干扰（见图2）。

2.2 陈皮的TLC鉴别

取本品1mL，加60%乙醇稀释至5mL，作为供试品溶液；取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液；取陈皮对照药材粉末0.3g，加甲醇10mL，加热回流20min，滤过，取滤液5mL，浓缩至1mL，作为对照药材溶液；按同法制备该处方缺陈皮阴性对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液、橙皮苷对照品溶液、陈皮对照药材溶液、陈皮阴性对照液各10μL，分别点于同一用0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水（100∶17∶13）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；而陈皮阴性对照色谱无干扰（见图2）。

2.3 五倍子的TCL鉴别

取本品1mL，加60%乙醇稀释至10mL，作为供试品溶液；取没食子酸对照品，加甲醇制成1mg/mL溶液，作为对照品溶液；取五倍子药材粉末0.5g，加甲醇5mL，超声处理15min，滤过，滤液作为对照药材溶液；按同法制备得到缺五倍子阴性对照品溶液。吸取上述供试品溶液、没食子酸对照品溶液、五倍子对照药材溶液、五倍子阴性对照液各10μL，分别点于同一块硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲酸乙酯-甲酸（5∶5∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；而五倍子阴性对照色谱无干扰（见图3）。

3 含量测定

3.1 溶液的制备

3.1.1 对照品溶液的制备

取芦丁对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含芦丁0.1024mg的溶液，即得。

3.1.2 供试品溶液的制备

取本品1mL，置蒸发皿中挥干，残渣加60%乙醇溶液并定容至100mL，经0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。

3.1.3 阴性样品溶液的制备

按本品处方比例取缺槐花的其余药材，按本品的制备工艺制成不含槐花的阴性样品。按供试品溶液的制备方法制备阴性样品溶液。

3.2 色谱条件

色谱柱：Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相：甲醇-1%冰醋酸溶液（40∶60）；流速：1mL•min-1；检测波长：257nm；柱温：25℃；分析时间：25min，进样量10μL。

3.3 线性关系考察

精密吸取对照品溶液2，5，8，10，15，20μL，分别进样，测定，记录色谱峰面积，以芦丁质量（μg）为横坐标，以峰面积A为纵坐标，绘制标准曲线，经计算得线性回归方程为：y=1523.2x-84.759，r=0.9995（n=6）。结果表明，芦丁进样量在0.2048~2.048μg范围内线性关系良好。

3.4 精密度试验

精密吸取对照品溶液10μL，重复进样5次，芦丁峰面积的RSD为0.54%，表明精密度良好。

3.5 稳定性试验

精密吸取供试品溶液10μL，分别于制备后0、2、4、6、8h注入色谱仪，测定，结果芦丁峰面积RSD为0.9%。表明供试品溶液在制备后8h内稳定。

3.6 重复性试验

精密吸取同一批样品溶液，按供试品制备方法制备5份供试品溶液，按上述色谱条件测定，记录色谱峰面积，计算芦丁含量，其RSD为0.79%，表明本方法重复性良好。

3.7 加样回收率试验

精密称取已知含量的样品5份，分别精密加入一定量的芦丁对照品，按供试品的制备与测定方法，在上述色谱条件下，进行含量测定，并计算回收率。结果芦丁平均加样回收率为96.98%，RSD为1.42%，表明本方法回收率好。结果见表1。

3.8 样品含量测定

取本品3批，按供试品制备方法制成供试品溶液。精密吸取供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪，测定，以外标法计算含量。结果见表2。

4 讨论

槐花、陈皮、五倍子为该中药复方防晒添加剂的主药，芦丁、槲皮素、橙皮苷、没食子酸等为其有效成分，本实验采用薄层色谱法鉴别了其中的槲皮素、橙皮苷、没食子酸，并建立了高效液相色谱法测定其中芦丁含量的测定方法。

处方中槐花具有凉血止血，清肝泻火的功能，文献报道槐花主含黄酮及苷类，其中芦丁为其主要化学成分，因此选择芦丁作为含量测定指标能够达到控制其质量的目的。测定波长及流动相的选择参考《中国药典》2005年版一部“槐花”项下的含量测定方法，检测波长为257nm，流动相为甲醇-1%冰醋酸溶液（40∶60）。经试验，芦丁与其相邻峰的分离效果良好。实验结果表明，在选定的色谱条件下，芦丁的色谱峰无干扰，方法可靠性强，测定结果准确，重复性好。

参考文献：

［1］ 程莉，龚耀刚，安凯，王文兴.大孔树脂在三七叶皂苷脱色中的应用研究［J］.云南中医学院学报，2005，9(3):13-14.

［2］ 中国药典委员会.中华人民共和国药典［M］.一部.北京：化学工业出版社，2000.

［3］ 王宝鯣.中成药质量标准与标准物质研究［M］.北京：中国医药科技出版社，1995.

（责任编辑：陈涌涛）