清热养阴丸中丹皮酚的研究

关键词：清热养阴丸，质量标准，丹皮酚

DOI编码：10.3969/j.issn.1002-5944.2025.03.041

0 引言

清热养阴丸收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第二册，处方由栀子、黄连、牡丹皮、白芍、薄荷、地黄、玄参、麦冬、浙贝母等十二味中药组成[1-2]。通过对处方中十二味药进行粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末加炼蜜30～40g，及适量的水，制成大蜜丸，即得。具有养阴清热，消肿止痛。用于肺胃积热，火热上攻引起的口舌生疮，牙龈出血，烦躁口渴，咽喉疼痛，肺热咳嗽，失音声哑，头晕耳鸣，大便秘积等症。其中牡丹皮作为处方中的重要组成成分，牡丹皮具有清热凉血、活血化瘀的功效，用于热入营血、温毒发斑、吐血、夜热早凉、无汗古蒸、经闭痛经、跌扑伤痛、痈肿疮毒等症状，主要含丹皮酚（即芍药醇）、牡丹皮原苷等主要成分。由于清热养阴丸原质量标准于2014年之后一直没有进行修订，该标准中只针对性状、显微鉴别及丸剂制剂通则的一般检查项目，没有对处方中任何一位中药材进行专属鉴别，所以本次研究建立了处方中牡丹皮的薄层色谱鉴别，以便更好地控制药品质量，同时对药品的生产、检验、应用等方面也有一定的实用价值。

1 实验材料

1.1 实验仪器

（1）超声波清洗机SB-5200 DTDN（宁波新芝生物科技股份有限公司）；

（2）羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板（自制）；

（3）超声波清洗机SB-5200 DTDN（宁波新芝生物科技股份有限公司）；

（4）万分之一天平AL204〔梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司〕；

（5）十万分之一天平XP205〔梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司〕；

（6）电热鼓风干燥箱GZX-9076 MBE上海博迅实业有限公司医疗设备厂；

（7）密理博超纯水机Milli Direct-Q16美国；

（8）卡玛薄层色谱成像系统TLC Visualizer瑞士卡玛。

1.2 实验样品与试剂

1.2.1 实验样品

石膏、栀子（姜制）、黄连、牡丹皮、白芍、地黄、麦冬、玄参、浙贝母、薄荷、山豆根、甘草。均购自重庆泽凯有限公司。

丹皮酚对照品（中国食品药品检定研究院提供，批号110708-200506）。

样品来源如表1所示。

1.2.2 实验试剂

（1）甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、环己烷、乙醚、甲苯、盐酸、硫酸（均为分析纯 重庆川东化工有限公司）；

（2）5%三氯化铁乙醇溶液（称5 g三氯化铁用95%定容到100 mL）；

（3）盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液（每100 mL三氯化铁乙醇溶液中加5滴盐酸）；

（4）2%的香草醛硫酸溶液（每100mL硫酸溶液中含2g香草醛）。

2 实验方法与结果

2.1 供试品溶液制备

取本品大蜜丸6 g，剪碎，加乙醚30 mL，超声处理45 min，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚1 mL使溶解，作为供试品溶液。

2.2 对照品溶液制备

取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。

按处方量称取缺牡丹皮的阴性样品6g，加乙醚30mL，超声处理45min，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚1 mL使溶解，制成阴性对照溶液。

2.3 薄层色谱

照薄层色谱法（中国药典2020年版四部通则0502）检验，吸取上诉三种溶液各10 uL，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别也以环己烷-乙酸乙酯（5：1）、环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸（4：1：0.1）为展开剂[3-4]，展开，取出，晾干，分别喷以2%的香草醛硫酸溶液、盐酸酸性的5%三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰）。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品无干扰。具体如图1、图2所示。

2.4 耐用性考察

由于薄层板硅胶所用的粒度、性质以及粘合剂各有不同，可能导致其重现性及色谱行为也产生了相对差异。为此，针对自制薄层板硅胶G及预制薄层板硅胶G两种不同的薄层板进行相同条件下薄层鉴别实验。结果显示，两种薄层板上的主成分斑点和杂质斑点可分离，Rf值在0.3～0.5之间，说明该方法对薄层板耐用性良好。以及在恒温恒湿试验箱中，以拟订方法在不同温湿度下进行薄层鉴别试验。结果显示，高温高湿条件下（T=35℃，RH =75%）及低温低湿条件下（T=4℃，RH =15%）主成分斑点和杂质斑点均分离效果优良，Rf值在0.3～0.5之间。结果表明该方法受温湿度影响较小，对不同温湿度耐用性良好。

3 结语与讨论

随着人们对生活质量的日益提高，人们对养阴清肺丸需求量日渐增大。养阴清肺丸不但能够润肺止咳，对治疗慢性支气管炎、咳嗽等呼吸系统疾病有很好的效果，因其含有麦冬等药物，可以增加肺部的润滑程度，减级肺部炎症，从而缓解咳嗽症状；而且养阴清肺丸还能够清热解毒，对治疗肺部感染、肺炎等疾病有显著疗效，其中的黄芪等药物能够提高机体免疫力，增强扺御病菌的能力，同时牡丹皮也具有清热解毒的作用；还具有滋阴养颜养的作用，因其含党参、人参等药物能够滋补肝肾、养阴补血，使身体保持良好的状态，同时还能够延缓衰老，提高皮肤的弹性和光泽度。所以保证其药品的安全有效、稳定和质量可控非常重要。因其中药成分制剂组分多，成分复杂，在定性和定量研究过程中，需要通过对处方中各药物进行分析，了解其主要成分和有效成分的理化性质，从而找到合适的提取分离方法。

此次在清热养阴丸原有标准的基础上，增加了对牡丹皮的薄层鉴别。牡丹皮薄层鉴别供试品的制备采用两种方法（一种为加乙醚30 mL，低温回流一小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚1 mL使溶解；一种为加乙醚30 mL，超声处理45 min，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚1 mL使溶解），两种方法均能提出牡丹皮中的丹皮酚，但由于超声处理更加简单快捷，所以最后选择采用加乙醚30 mL，超声处理45 min；在牡丹皮的博层鉴别展开剂选择中分别采用：（1）环己烷：乙酸乙酯（5：1），（2）环己烷：乙酸乙酯：冰醋酸（4：1：0.1）方法Rf值为0.45，采用第二个展开剂Rf值为0.48，（最佳Rf值为0.3～0.5），所以两种展开剂均可；喷2%的香草醛硫酸溶液，由于香草醛为万能的显色剂，此方中成分复杂，苷类成分较多，无法分开，最后采用盐酸酸性的5%三氯化铁乙醇溶液，试验结果比较理想。

作者简介

秦德松，本科，工程师，研究方向为药品质量检验检测。

龚艳，通信作者，研究方向为药品质量检验检测。

（责任编辑：张瑞洋）