基于高分辨率熔解曲线分析技术鉴别丹参及其混伪品

摘要：本研究旨在建立一种基于高分辨率熔解曲线（high resoluLion melting，HRM）技术高效鉴别丹参及其混伪品的方法。研究采用硅胶吸附柱法纯化基因组DNA，并针对鼠尾草rDNA ITS2区序列设计特异性引物，通过依次对引物浓度、DNA模板浓度、退火温度和循环次数进行系统优化，建立了ITS2熔解曲线模型，并采用HRM技术对不同来源丹参及其混伪品（甘西鼠尾草、云南丹参和鼠尾草）进行鉴别。结果表明，在最适引物浓度为2.5-10.0 umol/L，DNA模板浓度为26.95-53.90 ng／uL，退火温度为58℃，循环数为35-45时可获得稳定、均一、特异的PCR扩增曲线。该方法通过对比熔解温度（Tm）即可实现对丹参与甘西鼠尾草、云南丹参及鼠尾草的真伪鉴别，在丹参及其伪品的快速检测方面具有独特的优势。

关键词：高分辨率熔解曲线；分子鉴定；丹参；伪品

中图分类号：S567.5+3 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2024）09-0116-08