洛索洛芬钠胶囊溶出曲线研究方法的建立及实践

陈雨蕉 付金凤 许 直 刘晓强

洛索洛芬钠为苯丙酸类非甾体消炎药，具有较好的镇痛消炎作用，临床多用于腰痛症、类风湿性关节炎、肩关节周围炎、骨性关节炎、颈肩腕综合征和手术后、外伤后、拔牙后的镇痛消炎，以及急性上呼吸道炎的解热镇痛[1-3]。其具有起效快（口服30 min内血药浓度即达峰值）、安全有效（临床镇痛效果明显，不良反应小且少）等特点，临床应用广泛[4-5]。胶囊剂较片剂溶出时间更短，对胃肠道刺激小，且服用时可以避免药物的特殊气味对患者造成的影响，因此胶囊剂临床应用广泛。体外溶出曲线常用来预测体内的崩解、溶出和吸收情况，同时药物体外溶出行为能够在一定程度上反映制剂的质量[6-7]。同时采用合理的体外溶出曲线方法可以分析不同生产企业间制剂处方、工艺以及原辅料质量差异，有助于更全面剖析市售药品质量[8-9]。

1 仪器、试剂与方法

1.1 仪器

美国 LOGAN 860DLA型自动溶出仪（12杯位），METTLER TOLEDO XP205 型电子分析天平，岛津LC-20AD型高效液相色谱仪。

1.2 试剂与药品

冰醋酸、盐酸、醋酸钠、磷酸二氢钾、氢氧化钠和三乙胺均为分析纯；甲醇为色谱纯；溶出介质均采用经脱气装置41 ℃真空脱气30 min的纯化水。针头过滤器（水系）：材质：PES；规格：0.45 μm×25 mm；来源：Agilent Technologies。洛索洛芬钠，中国食品药品检定研究院，批号：100638-202104，含量：87.5%。

洛索洛芬钠胶囊，生产企业A，批号：221211、220813；生产企业B，批号：221104；生产企业C，批号：2212022。

1.3 方法

1.3.1溶出方法方法a：照溶出度与释放度测定法（中华人民共和国药典2020年版四部通则0931第一法）测定，以水900 ml为溶出介质，转速为100转/min，依法操作，经5、10、15、20、30、45、60 min时，取溶出液滤过，取续滤液作为供试品溶液；方法b：照溶出度与释放度测定法（中国药典2020年版四部通则0931第一法）测定，以水900 ml为溶出介质，转速为50转/min，依法操作，经5、10、15、20、30、45、60 min时，取溶出液滤过，取续滤液作为供试品溶液；方法c：照溶出度与释放度测定法（中华人民共和国药典2020年版四部通则0931第二法）测定，以水900 ml为溶出介质，转速为50转/min，依法操作，经5、10、15、20、30、45、60 min时，取溶出液滤过，取续滤液作为供试品溶液。

取生产企业A所生产的洛索洛芬钠胶囊（批号：221211）进行预实验（取12粒平行进行实验），依据预实验结果选择合适的溶出条件依次取生产企业A、B、C所生产的洛索洛芬钠胶囊（生产企业A，批号：220813；生产企业B，批号：221104；生产企业C，批号：2212022）依次在介质pH1.0盐酸溶液、pH4.0醋酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液、水中分别进行实验。

1.3.2液相方法以Shim-Nex CS C18（4.6×150 mm，5 μm）为色谱柱，流动相为甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（600∶400∶1∶1），检测波长为222 nm，柱温为35 ℃，流速为1.0 ml/min，进样量为20 μl。

1.3.3 对照品溶液的制备取洛索洛芬钠对照品约17 mg，精密称定，置100 ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ml置50 ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

1.3.4溶出介质的配制方法1）pH1.0盐酸溶液：量取盐酸9 ml溶解于1 000 ml脱气纯化水中，搅匀，即得。2）pH4.0醋酸盐缓冲液：精密称取乙酸钠1.22 g，加水溶解，加入2 mol/L醋酸溶液20.5 ml，加水稀释至1 000 ml，搅拌溶解，摇匀，即得。3）pH6.8磷酸盐缓冲液：取0.2 mol/L磷酸二氢钾溶液250 ml，加0.2 mol/L氢氧化钠溶液118 ml，用水稀释至1 000 ml，摇匀，即得。4）水：取纯化水，脱气，即得。

2 结果

2.1 预实验结果

生产企业A所生产的洛索洛芬钠胶囊在方法a、方法b、方法c中均在15 min时溶出度达平台期，且方法a、方法b、方法c在5 min时溶出度的相对标准偏差（RSD）值均较大，其中方法b在5 min、10 min及15 min时溶出度的RSD值均较大。见图1。

图1 预实验结果

2.2 各厂家溶出曲线

生产企业A所生产的洛索洛芬钠胶囊在介质pH1.0盐酸溶液、pH4.0醋酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液、水中溶出量均在15 min时达平台期，其中在介质pH4.0 醋酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液、水中溶出曲线基本一致，在介质pH1.0盐酸溶液中溶出量受限。见图2。

图2 洛索洛芬钠胶囊溶出曲线（生产企业A）

生产企业B所生产的洛索洛芬钠胶囊在介质pH1.0盐酸溶液、pH4.0醋酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液、水中累计溶出量依次上升，在介质pH6.8磷酸盐缓冲液、水中15 min时达平台期，在介质pH4.0醋酸盐缓冲液20 min时达平台期，在介质pH1.0盐酸溶液中溶出量明显受限。见图3。

图3 洛索洛芬钠胶囊溶出曲线（生产企业B）

生产企业C所生产的洛索洛芬钠胶囊在介质pH1.0盐酸溶液、pH4.0醋酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液、水中溶出量均在15 min时达平台期，其中在介质pH4.0醋酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液、水中溶出曲线基本一致，在介质pH1.0盐酸溶液中溶出量轻微受限。见图4。

图4 洛索洛芬钠胶囊溶出曲线（生产企业C）

3 讨论

本溶出曲线方法的确定基于多个因素的考虑，具体如下。1）基于化合物本身特性：洛索洛芬属生物药剂学分类系统（BCS）Ⅰ类药物，即高溶解性-高渗透性药物，因此，选择取样时间点依次为5、10、15、20、30、45、60 min。2）基于各制剂自拟标准及其实验结果：所涉及的3家生产企业生产的洛索洛芬钠胶囊的溶出度检验标准分别为1.浆法，以水900 ml为溶出介质，转速为50转/mim，依法操作，经30 mim时，取续滤液；2.浆法，以水1 000 ml为溶出介质，转速为100转/mim，依法操作，经45 mim时，取续滤液；3.篮法，以水600 ml为溶出介质，转速为75转/mim，依法操作，经30 mim时，取续滤液。同时参考国家药品监督管理部门发布的普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则等确定了洛索洛芬钠胶囊溶出曲线研究的3种方法。洛芬钠胶囊在笔者所采用的3种溶出条件下均能迅速释放，到达平台期的时间均约为15 min，无明显差异，基于上述实验结果，上述3种溶出条件均可以选择。3）基于该药物的适应证；该药物的适应证为类风湿性关节炎、骨性关节炎、腰痛症、肩周炎、颈肩臂综合征的消炎和镇痛；手术后、外伤后及拔牙后的镇痛和消炎；急性上呼吸道炎的解热和镇痛[10-11]。合并有上述症状的患者其生理功能一定程度受影响，100转/min的转速不符合临床实际，故考虑舍去条件a。4）基于洛索洛芬钠片参比制剂的检验标准：溶出条件为照溶出度测定法（中华人民共和国药典2010年版二部附录XC第二法），以水900 ml为溶出介质，转速为50转/min，依法操作。目前洛索洛芬钠胶囊尚未公布其参比制剂，片剂和胶囊均属于口服固体制剂，体内药物代谢动力学过程具有一定的相似性，采用与洛索洛芬钠片参比制剂相同的溶出条件可以比较市售洛索洛芬钠胶囊之间的质量差异，也可以分析其与原研制剂之间的质量差异。基于上述多种因素，最终确定的溶出曲线条件为方法c。

上述3家生产企业生产的洛索洛芬钠胶囊在介质水及pH6.8磷酸盐缓冲液中均溶出迅速，在15 min时均迅速达到平台期。生产企业A及生产企业C生产的洛索洛芬钠胶囊在介质pH4.0醋酸盐缓冲液中溶出情况与介质水及pH6.8磷酸盐缓冲液一致，但生产企业B生产的洛索洛芬钠胶囊在介质pH4.0醋酸盐缓冲液中溶出速率低于介质水及pH6.8磷酸盐缓冲液，同时上述3家生产企业生产的洛索洛芬钠胶囊在介质pH1.0盐酸溶液中溶出量均受限，其中生产企业B生产的洛索洛芬钠胶囊累计溶出量受限最严重，这与洛索洛芬钠片参比制剂在4种溶出介质中的溶出行为基本一致相差较远。基于上述实验数据并结合该制剂的服用方式“饭后服用”，生产企业A及生产企业C生产的洛索洛芬钠胶囊可能质量更优。

但须指出，上述3家企业所生产的洛索洛芬钠胶囊在介质pH1.0盐酸溶液、pH4.0 醋酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液、水中达到平台期前各取样时间点溶出量RSD值均较大，提示上述3家企业样品在达到平台期前各取样时间点溶出量批内差异较大，建议上述生产企业就各自产品在介质pH1.0盐酸溶液中溶出受限以及达到平台期前各取样时间点溶出量批内差异较大开展相关研究，采用更优质的原辅料，优化制剂处方及工艺，进一步提升产品质量。

因国家药品监督管理部门目前尚未公布洛索洛芬钠胶囊的参比制剂，且洛索洛芬钠片原研生产厂家日本第一三共制药有限公司仅持有洛索洛芬钠片、洛索洛芬钠颗粒以及洛索洛芬钠贴剂3个剂型，在笔者查询的多种国外药典版本中均未查询到洛索洛芬钠胶囊这一剂型的检验标准。同时，市售洛索洛芬钠胶囊溶出度标准均不一致，且彼此间差异显著，最终溶出曲线方法的确定参考洛索洛芬钠片参比制剂的溶出度方法。因此，该方法具有一定的局限性。