细菌性阴道病四联检测法在细菌性阴道病中的应用

纪凤卿 陈君颖 蓝玉芬

【摘要】 目的 分析评估细菌性阴道病四联检测法在细菌性阴道病（bacterial vaginosis，BV）中的应用情况。方法 选取厦门市中医院2022年2—3月收治的1 000例阴道炎患者作为研究对象，同时行白带常规镜检和细菌性阴道病四联检测法，对检测结果进行分析。结果 常规湿片镜检诊断线索细胞与胺试验均阳性118例，四联BV Set试剂盒检出唾液酸酯酶阳性130例。常规镜检结果与BV Set试剂盒检出结果一致的有118例，湿片镜检结果与细菌性阴道病四联检测法结果的符合率达90.77%。BV Set试剂盒检测中过氧化氢阳性率为92.00%，国内首次报道厦门地区阴道炎患者过氧化氢阳性率92.00%，应引起临床关注。BV Set试剂盒检测唾液酸酶阳性率为13.00%，白细胞酯酶阳性率为41.00%，pH阳性率为76.00%。该研究4项指标阳性率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。过氧化氢阳性的920例标本在白带常规各级清洁度患者中均有分布，其中Ⅰ度、Ⅱ度、Ⅲ度、Ⅳ度阳性率分别为5.00%、13.00%、32.00%、50.00%。各清洁度病例中过氧化氢阳性率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 采用细菌性阴道病四联检测法能有效综合评估女性阴道微生态环境，提高BV诊断准确率，为患者带来益处，提高患者的生活质量，值得大力推广。

【关键词】 细菌性阴道病；阴道清洁度；四联检测法；阴道微生态

文章编号：1672-1721（2024）01-0112-03     文献标志码：A     中國图书分类号：R446.5

阴道微生态系统在维持女性生殖道内环境稳定中发挥着重要的作用。若女性阴道微生态失调，则容易发生各种类型的阴道炎和生殖系统感染[1]。医学数据资料显示，BV以明显阴道菌群失调导致多种致病性细菌感染为特征。如果患者没有得到准确的检查，很有可能会造成检测不及时、诊断不准确[2]。目前医学界认为，正常的阴道微生物菌群以乳杆菌为优势菌，阴道微生态评估以阴道乳酸杆菌[3]变化为主。这是临床诊断最有价值的检测指标。

本研究回顾性综合评估细菌性阴道病四联检测法对女性阴道微生态的检测结果，分析这一方法在BV诊断中的应用，现将研究结果报告如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取厦门市中医院门诊及住院2022年2—3月收治的1 000例阴道炎患者作为研究对象，年龄21～60岁，平均年龄为（32.62±8.36）岁。

1.2 方法与仪器

1.2.1 仪器与试剂

仪器：bPR-2014A阴道炎自动检测工作站，日本OLYMPUS CX-21 双目显微镜。

试剂：江苏硕世生物科技股份有限公司细菌性阴道病（BV）检测试剂盒，质量分数为10%的KOH溶液。

1.2.2 方法

在本次研究中，所有患者同时行白带常规检查与细菌性阴道病四联检测法。每位患者送检的2份白带标本，1份进行Amsel试验，由实验室检验技师严格按照《临床检验操作规程》第4版操作。另1份用BV 4项试剂盒检测，由实验室检验技师严格按照bPR-2014A阴道炎自动检测工作站标本操作流程操作。BV 4项检测内容包括H2O2浓度、唾液酸苷酶、白细胞酯酶和pH值，检测原理均采用干化学酶技术。根据酶解特异性底物而显色或者添加显色液显色，并且呈色深度与所含酶的浓度成正比，从而辅助诊断细菌性阴道病。

Amsel临床诊断标准[4]：（1）阴道分泌物稀薄均匀；（2）分泌物pH值＞4.5；（3）胺试验结果为阳性；（4）涂片染色找到线索细胞。凡检出线索细胞再加上述任意2条即可诊断为BV。

BV 4项试剂盒判断标准：（1）H2O2浓度。不显色或者淡黄色为阳性，显粉红色表示弱阳性，显红色或者紫红色为阴性。（2）唾液酸苷酶。显红色或紫红色为阳性，显粉红色表示弱阳性，不显色或者淡黄色为阴性。（3）白细胞酯酶。显蓝色或绿色为阳性，显淡蓝色表示弱阳性，不显色为阴性。（4）pH值。试剂颜色由黄色—青色—绿色—蓝色变化，表示pH值在3.8～5.4变化。正常pH值参考范围为3.8～4.5，当pH值＞4.5时代表分泌物细菌性阴道病为阳性。

阴道分泌物涂片清洁度判定标准见表1。

1.3 观察指标

在整个过程中，主要观察指标为：（1）不同检测方法阳性检验结果；（2）细菌性阴道病四联检测法检查4项

指标阳性率；（3）过氧化氢阳性标本白带常规清洁度。

1.4 统计学分析

采用SPSS 18.0统计学软件分析数据，计数资料以百分比表示，行χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同检测方法阳性检验结果

1 000例标本中，白带常规镜检检出线索细胞与胺试验均阳性为118例，细菌性阴道病四联检测法检出唾液酸酯酶阳性130例。常规镜检结果与BV Set试剂盒检出结果一致的有118例，白带常规镜检结果与细菌性阴道病四联检测法结果的符合率达90.76%，该部分患者可判断为BV，见表2。

2.2 细菌性阴道病四联检测法检查4项指标阳性率

1 000例标本行细菌性阴道病四联检测法检查4项指标（过氧化氢、唾液酸酶、白细胞酯酶、pH值），阳性率结果见表3。

研究病例4项指标中阳性率比较，χ2=1 503.660，差异有统计学意义（P＜0.001）。其中，过氧化氢阳性率最高，达到92.00%。此为首次报道厦门本地区细菌性阴道炎患者过氧化氢阳性率如此之高，应引起临床关注。

2.3 过氧化氢阳性标本白带常规清洁度

记录过氧化氢阳性的920例标本的白带常规清洁度，见表4。

随着患者清洁度恶化，过氧化氢阳性率也逐步提高。各清洁度病例中过氧化氢阳性率比较，χ2=596.823，差异有统计学意义（P＜0.001）。

3 讨论

BV是由阴道内乳杆菌减少或消失、兼性厌氧菌及厌氧菌增多导致的常见阴道感染性疾病之一，具有临床症状不典型、复发率高的特点。BV与妇科术后感染、盆腔炎症、早产或产后子宫内膜炎、反复流产等不良妊娠结局及淋病、HIV等性传播疾病的发病风险具有相关性，实验室诊断主要依据革兰染色Nugent评分标准和临床Amsel标准[5]。面对育龄期妇女患病率4.96%～36.00%、妇科门诊发病率高达50.40%的情况，临床迫切希望对该病进行及时准确的诊断。近年细菌性阴道病四联检测法应运而生，成为BV检测的另一种补充方式。BV的实验室检测一直以传统Amsel法为主，费力费时，容易受主观因素干扰影响。比如近期性生活和阴道冲洗均可导致pH值升高；胺试验的气味鉴别结果因人而异；线索细胞的判别受标本采集部位、操作者的涂片方式、经验等影响，不易做到标准化。虽然革兰染色Nugent评分法准确性高，但操作复杂、周期长，不适于作为常规检测方法。而采用细菌性阴道病四联检测法应用bPR-2014A阴道炎自动检测工作站进行检测的方法更容易标准化，克服Amsel法、革兰染色Nugent评分法诸多缺陷。

实验室BV试剂盒共检测4项指标，即pH值、过氧化氢浓度、白细胞酯酶、唾液酸苷酶。其中pH值用以判断阴道整体酸碱度情况，辅助诊断是否存在阴道病原体感染影响环境酸碱度。国内学者曹建英[6]研究显示，白帶pH值≤4.5，可以有效控制细菌性阴道病的发病率。临床不可忽视pH值这一检测项目。过氧化氢由阴道中的正常菌群乳酸杆菌产生，且其浓度与乳酸杆菌数量成正比。过氧化氢水平可作为阴道乳酸杆菌状态的检测指标，与BV诊断有很强相关性。乳酸杆菌从多方面维持阴道微生态环境稳定[7]，即与致病菌竞争黏附在阴道上皮细胞；酵解糖原产生乳酸，维持阴道酸碱度；乳酸杆菌及其代谢产物激发阴道上皮细胞的免疫功能，抑制致病菌菌群的生长繁殖；产生广谱抗菌因子过氧化氢。当发生感染时，白细胞酯酶通过阴道上皮细胞黏膜渗透到分泌物中，检测白细胞酯酶活性可间接反映白细胞数量。然而BV试剂盒无法检测不产生白细胞酯酶的免疫细胞，比如淋巴细胞、单核细胞，此时需要结合人工镜检白带常规涂片进行辅助确认。唾液酸苷酶是一种存在于溶酶体、细胞质和细胞膜上的酶蛋白，研究表明其活性与BV密切相关。

本研究发现，1 000例标本中经白带常规湿片镜检检出线索细胞与胺试验均阳性的118例，用细菌性阴道病四联检测法检出唾液酸酯酶阳性130例。常规镜检结果与细菌性阴道病四联检测法检出结果一致的有118例，湿片镜检结果与细菌性阴道病四联检测法结果的符合率达90.76%。同时本研究发现，细菌性阴道病四联检测法检查中过氧化氢阳性率为92.00%，唾液酸酶阳性率为13.00%，白细胞酯酶阳性率为41.00%，并且pH值阳性率为76.00%。本研究病例4项指标阳性率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。过氧化氢呈阳性的920例标本在白带常规各级清洁度患者中均有分布，其中Ⅰ度、Ⅱ度、Ⅲ度、Ⅳ度阳性率分别为5.00%、13.00%、32.00%、50.00%。这表明随着患者清洁度恶化，过氧化氢阳性率也逐步提高。各清洁度病例中过氧化氢阳性率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。本研究也是在国内首次报道厦门地区阴道炎患者过氧化氢阳性率高达92.00%，应引起临床关注。多年来，对无症状阴道炎患者是否需要临床干预治疗存在一定争议[8]。

本研究随访了几位主诊的妇产科医生，对于如此高的过氧化氢阳性率，大部分妇产科医生认为单项过氧化氢阳性的病患若无任何临床症状，可暂不予以治疗，留观随访即可。目前本地区妇女人群中过氧化氢阳性率极高，发现可能与不良生活习惯等因素有关，诸如性生活频率过度、内裤与其他衣物同洗、盆浴、阴道冲洗、非经期使用护垫，导致阴道优势菌群变化，过氧化氢乳酸杆菌减少，其他球菌增多。亦可能与该研究病例选取的南方潮湿春季病患有关，春季沿海地区湿冷气候有利于各种阴道病原菌滋生生长。pH值的升高对内部环境有严重的影响，可导致大量的线索细胞存在。加德纳细菌黏附可削弱阴道上皮防御功能，让有害细菌顺势进入阴道，最终可能导致流产、早产、死胎、反复盆腔炎等疾病[9]。目前医学界统一认为，导致霉菌感染的关键因素也是细菌阴道感染[10-11]。BV的抗生素疗法耐药日益严重。临床治疗妇产科疾病的过程使用各种抗生素、灭滴虫药物，在杀菌杀虫的同时也杀灭了乳酸杆菌，致使阴道微生态失衡，造成各种妇产科疾病复发甚至再次感染。有研究表明，经过抗菌治疗后用乳菌杆菌治疗重建阴道微生态平衡，复发率远远低于单一的抗生素治疗。鉴于此，靶向阴道菌群以恢复阴道健康的微生态疗法越来越受到临床和研究人员的关注。

目前已有较多文献报道将益生菌用于治疗BV。张瑞等[8]研究亦表明，益生菌是改善育龄期无症状BV预后安全、有效的措施。医学界认为，阴道菌群的异常变化是临床诊断最有价值的形态学研究指标[12]。BV Set试剂盒的过氧化氢指标亦可以应用于评估阴道微生态菌群是否恢复重建。细菌性阴道病四联检测法刚好从阴道酸碱环境、乳酸杆菌数量、是否存在阴道加德纳菌感染及是否存在炎症感染方面评估阴道微生态环境，有利于BV的防治。该试剂盒的使用还能有效弥补白带常规检测临床取材问题、检验技师镜检水平差异导致的漏检、误诊现象。为此提倡采用4项BV Set试剂盒检查，提高BV诊断效果。

综上所述，采用细菌性阴道病四联检测法能从阴道酸碱环境、乳酸杆菌数量、是否存在阴道加德纳菌感染及是否存在炎症感染方面评估阴道微生态环境，提高BV诊断效果，从而提高患者的生活质量，为患者带来益处，值得大力推广。

参考文献

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（编辑：许 琪）