糖肾化浊通脉颗粒对糖尿病肾脏疾病患者NLRP3、IL-1β、hs-CRP 的影响

朱晓鸥 沈金峰

糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease，DKD）是糖尿病最常见的微血管并发症之一，也是导致终末期肾脏疾病的主要病因[1]。DKD 发病机制复杂，目前尚无特效药物，进展至终末期肾脏病只有依赖透析或肾移植进行肾脏替代治疗[2]。研究表明，炎症因子相互作用可诱发炎症级联反应，促进血管发生炎症和纤维化，导致终末期肾脏病发生[3]。NOD 样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）/白介素-1β（IL-1β）/超敏C 反应蛋白（hs-CRP）是参与炎症反应的重要通路[4]。糖肾化浊通脉颗粒是浙江省临海市中医院治疗DKD 的常用方。我们在临床实践中发现，糖肾化浊通脉颗粒不仅能改善DKD 患者临床症状，还可以减少患者蛋白尿，延缓DKD 的进展。基于此，我们开展了糖肾化浊通脉颗粒对DKD 患者的治疗作用及对相关炎症因子的影响研究，现将结果汇报如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 选取2019 年10 月至2022 年11 月浙江省临海市中医院收治的DKD 肝肾阴虚、脉络瘀阻证患者60 例，按随机数字表法分为对照组与治疗组，每组30 例。本研究经临海市中医院医学伦理委员会审核通过（批件号2019-Z0829）。

1.2 纳入标准 （1）同时符合中西医诊断标准：DKD西医诊断标准参照《糖尿病肾脏疾病的早期诊断与治疗》[5]；肝肾阴虚、脉络瘀阻证中医辨证标准参照《糖尿病肾病中医防治指南》[6]；（2）18 岁≤年龄≤70岁，男女性别不限；（3）了解并且同意参加本研究，签署研究同意书。

1.3 排除标准 （1）中药过敏或者拒绝服用中药；（2）妊娠或哺乳期女性；（3）严重肝肾功能损伤；（4）合并严重感染；（5）血糖控制不佳；（6）患有肿瘤。

1.4 脱落及退出标准 （1）出现严重不良反应；（2）病情进展进入透析治疗；（3）患者自动放弃研究。

2 方 法

2.1 治疗方法 对照组：运动、饮食指导，血压、血糖调控等；恩格列净（正大天晴，批号206236，规格：10 mg）10 mg/d，口服，1 天1 次，疗程为12 周。治疗组：在对照组治疗的基础上联合糖肾化浊通脉颗粒治疗，方药组成：黄芪30 g，党参15 g，黄精30 g，熟地15 g，山药20 g，山茱萸、当归、泽兰各15 g，丹参20 g，川芎10 g，厚朴6 g，陈皮、茯苓各10 g，药物来源我院颗粒剂中药房，每日1 剂，分早晚2 次溶解后温服，疗程为12 周。

2.2 观察指标 （1）采用酶联免疫吸附法检测NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平，NLRP3 试剂盒购于武汉华美（批号G13012242）；IL-1β、hs-CRP 试剂盒购于深圳市科润达生物工程有限公司（批号20180312、20180513）。（2）采用胶乳免疫比浊法检测尿液上清液尿β2-微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）、微量白蛋白（microalbumin，mALB）水平，计算尿微量蛋白排泄率（rate of urinary microprotein excretion，UAER），UAER＝mALB（mg/mL）×24 h 尿量（mL）。（3）观察治疗期间不良反应发生情况（低血压、低血糖、尿路感染、胃肠道反应、肝功能异常）。

2.3 疗效判定 参考《中药新药临床研究指导原则》[7]制定评价标准：显效：尿蛋白减少≥70%；有效：尿蛋白减少≥30%；无效：临床症状或体征无明显好转或加重者，尿蛋白减少＜30%。总有效率=（显效例数+有效例数）/总例数×100%。

2.4 统计学方法 应用SPSS 21.0 软件处理数据，计数资料用例数和百分数（%）表示，组间比较采用χ2检验，计量资料经检验符合正态分布，采用均数±标准差（±s）表示，两组间数据比较使用独立样本t 检验，治疗前后数据比较采用配对样本t 检验。以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

3 结 果

3.1 两组DKD 患者一般资料比较 两组均无脱落及退出病例。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 两组DKD 患者一般资料比较

3.2 两组DKD 患者尿液指标比较 两组患者治疗前尿β2-MG、UAER 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；与治疗前比较，两组治疗后尿β2-MG、UAER 下降（P＜0.05），与对照组相比，观察组尿β2-MG、UAER 下降更明显（P＜0.05），见表2。

表2 两组DKD 患者治疗前后尿液指标比较（±s）

表2 两组DKD 患者治疗前后尿液指标比较（±s）

注：对照组采用恩格列净治疗；治疗组在对照组基础上加用糖肾化浊通脉颗粒治疗；DKD 为糖尿病肾脏疾病；β2-MG 为β2-微球蛋白；UAER 为尿微量蛋白排泄率；与本组治疗前比较，aP＜0.05；与对照组治疗后比较，bP＜0.05

组别治疗组治疗前治疗后对照组治疗前治疗后例数30 β2-MG（mg/L）UAER（mg/24 h）0.75±0.09 0.40±0.11ab 64.97±9.98 35.47±11.85ab 30 0.77±0.08 0.62±0.12a 67.50±12.24 52.87±11.86a

3.3 不同DKD 分期患者NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平比较 与Ⅱ期相比，DKDⅢ期患者NLRP3、IL-1β、hs-CRP 升高更显著（P＜0.05），见表3。

表3 不同DKD 分期患者NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平比较（±s）

表3 不同DKD 分期患者NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平比较（±s）

注：DKD 为糖尿病肾脏疾病；NLRP3 为NOD 样受体热蛋白结构域相关蛋白3；IL-1β 为白介素-1β；hs-CRP 为超敏C 反应蛋白；与Ⅱ期比较，aP＜0.05

分期Ⅱ期Ⅲ期例数25 35 NLRP3（pg/mL）142.43±8.12 161.92±11.81a IL-1β（pg/mL）55.26±5.75 67.43±6.08a hs-CRP（μg/mL）3.17±0.62 4.84±0.90a

3.4 两组DKD 患者NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平比较 两组患者治疗前NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；与治疗前比较，两组治疗后NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平下降（P ＜0.05），与对照组相比，治疗组NLRP3、IL-1β、hs-CRP水平下降更明显（P＜0.05），见表4。

表4 两组DKD 患者治疗前后NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平比较（±s）

表4 两组DKD 患者治疗前后NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平比较（±s）

注：对照组采用恩格列净治疗；治疗组在对照组基础上加用糖肾化浊通脉颗粒治疗；DKD 为糖尿病肾脏疾病；NLRP3 为NOD 样受体热蛋白结构域相关蛋白3；IL-1β 为白介素-1β；hs-CRP 为超敏C 反应蛋白；与本组治疗前比较，aP＜0.05；与对照组治疗后比较，bP＜0.05

组别治疗组治疗前治疗后对照组治疗前治疗后例数30 NLRP3（pg/mL）IL-1β（pg/mL）hs-CRP（μg/mL）153.83±14.84 114.70±11.97ab 61.13±9.25 31.73±8.36ab 4.14±1.08 2.45±0.73ab 30 155.06±13.72 144.30±13.31a 64.40.±7.23 51.67±9.61a 4.26±1.22 3.49±1.07a

3.5 两组DKD 患者临床疗效比较 治疗组总有效率为83.33%（25/30），对照组总有效率为53.33%（16/30），治疗组临床总有效率高于对照组（χ2=6.239，P=0.012），见表5。

表5 两组DKD 患者临床疗效比较

3.6 两组DKD 患者不良反应发生情况比较 治疗组发生胃肠道反应1 例，对照组发生低血压、尿路感染各1 例，两组不良事件发生率比较，差异无统计学意义（χ2=0.351，P=0.554）。

4 讨 论

中医古籍中无DKD 病名，依据其临床表现可归属于“水肿”“内消”“尿浊”“肾消”“消肾”等范畴。《灵枢》：“脾脆则善病消瘅易伤。”脾为后天之本，气血生化之源。长期饮食不节，嗜食肥甘厚腻易伤脾胃，脾虚则无力运化饮食精微，导致脾不散精，血糖升高；精微久蓄化为浊（糖浊、脂浊）。浊性黏质，易阻气机，导致血脉瘀阻，瘀浊化生。久病入络，久病入肾，糖浊、脂浊留滞血脉，损伤络脉，久则导致肾络癥积（肾小球硬化、肾间质纤维化），发为DKD。糖浊、脂浊、瘀浊不化，互结于脉络贯穿于DKD 的始末。正如《灵枢》所言：“迫聚不得散，日以成积。”因此降糖化浊通脉为防治DKD 基本大法。糖肾化浊通脉颗粒是由参芪地黄汤加味而来，由黄芪、党参、黄精、熟地、山药、山茱萸、当归、泽兰、丹参、川芎、厚朴、陈皮、茯苓组成，其中黄芪、党参健脾胃，降糖浊；黄精、熟地、山药、山茱萸、当归滋补肝肾，补精微，泽兰、丹参、川芎利血脉，给浊通路，厚朴、陈皮行气运湿，助浊散，茯苓利水除湿，全方紧扣病机，健脾运、降糖浊，滋肝肾、固精微，通血脉、化痰浊，标本兼顾，补而不留邪，祛邪不伤正。

炎症在DKD 的发生、发展中扮演了重要角色。hs-CRP 是肝细胞分泌的一种非特异性炎症介质，是各种炎症反应的始动因素；IL-1β 是一种重要的促炎症介质，活性IL-1β 通过自分泌、旁分泌途径，诱导大量IL-1β 及下游促炎细胞因子hs-CRP 生成[8]。IL-1β 合成与分泌主要依赖于炎性体中的caspase-1。NLRP3 炎性小体是NOD 样家族成员，NLRP3 蛋白通过与衔接蛋白ASC 和caspase-1 效应蛋白形成寡聚化蛋白复合物，在激活信号刺激下，NLRP3 炎性小体活化，将下游的pro-IL-1β 和pro-IL-18 剪切为成熟的IL-1β，加重组织炎症[9]。有研究表明，敲除NLRP3 基因可改善DKD 模型小鼠肾功能，减轻肾小球硬化、间质纤维化和炎症反应[10-12]。

本研究显示，DKDⅡ期患者NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平低于Ⅲ期患者，进一步证实DKD 处于一种炎症状态，随着DKD 进展，炎症加重（浊邪加重），这与上述文献相符。本研究中，治疗后治疗组NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平低于对照组，提示糖肾化浊通脉颗粒具有抗炎作用，同时还能降低尿β2-MG、UAER水平，并且不良事件发生率未见明显升高。

基于上述研究，我们证明了DKD 进展过程与炎症因子NLRP3、IL-1β、hs-CRP 密切相关，糖肾化浊通脉颗粒能有效降低NLRP3、IL-1β、hs-CRP 水平，抑制炎症反应，且临床上使用安全性较高。