补肾化瘀方对PCOS 患者血清半乳糖凝集素-3、IL-6及CRP 水平的影响

汪 钘 梅青青 潘敏丹 孙 忻

多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）是育龄期女性常见多发疾病，患病率约15%[1]，是造成育龄期女性月经紊乱和无排卵性不孕的主要原因之一。慢性炎症被认为是PCOS 的重要致病因素，与高血糖、高雄激素血症、胰岛素抵抗和排卵障碍有关[2]。最近的研究发现，PCOS 患者体内肿瘤坏死因子α、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）和白介素-18（IL-18）等炎症因子水平升高[2]。半乳糖凝集素-3（Galectin-3）与慢性炎症、胰岛素抵抗及肥胖密切相关，是许多疾病的研究热点[3]。研究发现，Galectin-3 在PCOS 患者体内表达升高，且与IL-6 呈正相关，推测Galectin-3 作为促炎因子在PCOS 发生发展中起到重要作用[4-5]。本研究旨在探讨补肾化瘀方对肾虚血瘀型PCOS 患者体内Galectin-3、IL-6、C反应蛋白（CRP）等炎症因子的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取浙江省中西医结合医院2020年9 月至2021 年9 月收治的肾虚血瘀型PCOS 患者60 例，根据前瞻性临床对照研究方法，进行随机、单盲、对照试验，采用随机数字表将患者随机分为治疗组和对照组，各30 例。本研究已通过医院伦理委员会审核，审批号：【2021】快审（76）号。

1.2 纳入、排除及剔除标准 纳入标准：（1）符合2003 年鹿特丹PCOS 诊断标准[6]；（2）符合《24 个专业105 个病种中医临床路径（试行）》[7]中肾虚血瘀证的辨证标准；（3）年龄18～35 岁；（4）自愿加入本研究，签署知情同意书；（5）近3 个月内未服用激素类、二甲双胍等影响内分泌代谢的药物。排除标准：（1）妊娠期或哺乳期妇女；（2）合并有其他内分泌疾患如甲状腺、垂体及肾上腺疾患等；（3）合并心脑肾肝等脏器功能严重受损者；（4）患有严重的神经系统疾病及精神病、恶性肿瘤者；（5）存在药物禁忌或有严重药物过敏史者。剔除标准：（1）治疗过程中出现严重不良反应、影响观察的其他系统疾病；（2）治疗依从性差，未能完成治疗疗程者。

1.3 治疗方法 对照组给予盐酸二甲双胍片（批号67210104，规格：0.25 g×60 片，上海信谊天平药业有限公司）1.0 g，1 天2 次，如无妊娠，治疗3 个月经周期，如妊娠则停药。治疗组给予补肾化瘀方（毓麟珠合芎归二陈汤加减）治疗，组方：菟丝子15 g，杜仲10 g，枸杞子、炒当归各12 g，丹参15 g，川芎10 g，生地黄、炒党参各15 g，炒苍术9 g，茯苓15 g，陈皮、浙贝母、夏枯草、香附各10 g，甘草3 g。中药材由浙江省中西医结合医院中药房提供。每日1 剂，水煎取400 mL，200 mL/次，1 天2 次，经期不停药，治疗3 个月经周期，如妊娠则停药。

1.4 观察指标

1.4.1 中医证候积分、排卵及妊娠情况 观察两组患者治疗前及治疗3 个周期后中医证候积分的变化情况。于研究开始时向每位受试者发放中医证候积分表（参照《24 个专业105 个病种中医临床路径（试行）》[7]制定），包括月经情况、毛发情况、痤疮情况、皮肤溢脂情况、舌象、脉象等，依据患者自身感受填写。各项证候根据严重程度分为无、轻度、中度、重度，分别计0、1、2、3 分。治疗前后分别填写1 次，整个过程均由专业医务人员判断舌脉并指导完成。治疗期间记录患者排卵及妊娠情况。

1.4.2 血清学指标 治疗前后采集患者月经周期第3～5 天空腹静脉血样，闭经患者B 超检查无优势卵泡时（最大卵泡直径＜10 mm）采集血样。当天即检测空腹血糖（fasting plasma glucose，FPG）、空腹胰岛素（fasting insulin，FINS）、三酰甘油（triglyceride，TG）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白（lowdensity lipoprotein，LDL）、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein，HDL）、CRP、促卵泡激素（follicle stimulating hormone，FSH）、促黄体生成素（luteinizing hormone，LH）、雌二醇（estradiol，E2）、睾酮（testosterone，T）水平，部分血清分装保存至-80 ℃以备检测Galectin-3、IL-6 水平。采用放射免疫法检测FPG、FINS、TG、TC、HDL、LDL、CRP、FSH、LH、E2、T 水平（由浙江省中西医结合医院检验科完成）；采用酶联免疫吸附法检测血清Galectin-3 和IL-6 水平。采用稳态模型评估法，根据血糖、胰岛素水平计算胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment for insulin resistance，HOMA-IR），HOMA-IR=FINS（mU/L）×FPG（mmol/L）/22.5。

1.5 统计学方法 应用SPSS 25.0 统计软件进行数据的统计分析。计量资料符合正态分布且方差齐，采用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对样本t 检验。计数资料采用百分率（%）表示，采用非参数检验。血清Galectin-3、IL-6、CRP 水平与其他指标相关关系则采用Spearman 相关性分析。以P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组PCOS 患者一般资料比较 对照组1 例患者因严重腹泻退出本研究，治疗组2 例患者因个人原因主动退出本研究。两组患者基线资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性，见表1。

表1 两组PCOS 患者一般资料比较（±s）

表1 两组PCOS 患者一般资料比较（±s）

注：对照组予盐酸二甲双胍治疗；治疗组予补肾化瘀方治疗；PCOS 为多囊卵巢综合征；BMI 为体质指数；WHR 为腰臀比

组别治疗组对照组t 值P 值例数28 29年龄（岁）27.11±3.74 27.31±4.96-0.174 0.862病程（年）2.98±1.16 2.60±1.11 1.259 0.213 BMI（kg/m2）24.30±4.59 24.37±3.47 0.065 0.948 WHR 0.87±0.05 0.87±0.05＜0.001＞0.999

2.2 两组PCOS 患者中医证候积分比较 治疗前，两组患者中医证候积分比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后两组中医证候积分均有一定程度降低（P＜0.01），且治疗组中医证候积分降低较对照组显著，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组PCOS 患者治疗前后中医证候积分比较（分，±s）

表2 两组PCOS 患者治疗前后中医证候积分比较（分，±s）

注：对照组予盐酸二甲双胍治疗；治疗组予补肾化瘀方治疗；PCOS 为多囊卵巢综合征

组别治疗组对照组t 值P 值例数28 29治疗前12.50±2.17 11.97±2.44 0.873 0.387治疗后4.18±2.58 6.07±2.94-2.576 0.013 t 值16.015 19.442 P 值＜0.001＜0.001

2.3 两组PCOS 患者排卵及妊娠情况比较 因部分患者存在确认妊娠情况，治疗组共82 个观察周期，其中已排卵周期63 个，排卵率为76.83%；对照组共87 个观察周期，其中已排卵周期43 个，排卵率为49.43%；治疗组排卵率高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。

治疗组28 例患者中，第2 个月经周期妊娠2例，第3 个月经周期妊娠2 例，妊娠率为14.29%；对照组29 例患者中，第3 个月经周期妊娠1 例，妊娠率为3.45%；治疗组妊娠率略高于对照组，但差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.4 两组PCOS 患者性激素水平比较 因部分患者存在确认妊娠情况，实际治疗前后检测生殖激素患者治疗组共24 例，对照组共28 例。治疗前，两组患者性激素比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，两组患者的LH、T 及LH/FSH 水平均显著降低（P＜0.05），且治疗组患者的LH、T 及LH/FSH 水平显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗后两组患者FSH、E2 水平与治疗前相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3。

表3 两组PCOS 患者性激素水平比较（±s）

表3 两组PCOS 患者性激素水平比较（±s）

注：对照组予盐酸二甲双胍治疗；治疗组予补肾化瘀方治疗；PCOS 为多囊卵巢综合征；FSH 为卵泡刺激素；LH 为黄体生成素；E2 为雌二醇；T为睾酮；LH/FSH 为黄体生成素与卵泡刺激素比值；与同组治疗前比较，aP＜0.05

组别治疗组对照组t 值P 值例数24 28 FSH（mIU/mL） LH（mIU/mL） E2（pg/mL） T（ng/mL） LH/FSH治疗前6.49±1.27 6.68±1.28 0.251 0.803治疗后6.25±0.99 6.14±1.10 0.461 0.647治疗前15.09±2.15 15.12±2.75 0.148 0.883治疗后10.12±1.72a 12.54±2.56a-3.856＜0.001治疗前31.58±7.29 33.19±10.40-0.742 0.461治疗后32.93±10.72 33.52±10.27-0.124 0.902治疗前0.65±0.12 0.64±0.17 0.269 0.789治疗后0.47±0.12a 0.57±0.16a-2.072 0.043治疗前2.39±0.50 2.29±0.36 0.145 0.885治疗后1.65±0.32a 1.95±0.40a-4.561＜0.001

2.5 两组PCOS 患者糖脂代谢指标比较 治疗前，两组患者糖脂代谢指标水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，两组患者的FPG、FINS 和HOMAIR 水平显著降低（P＜0.05），治疗组与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后，两组患者的TG、TC、LDL 水平显著降低（P＜0.05），HDL 水平显著升高（P＜0.05），且治疗组患者的TG、TC、LDL 水平显著低于对照组（P＜0.05），HDL 水平显著高于对照组（P＜0.05）。见表4～5。

表4 两组PCOS 患者糖代谢指标比较（±s）

表4 两组PCOS 患者糖代谢指标比较（±s）

注：对照组予盐酸二甲双胍治疗；治疗组予补肾化瘀方治疗；PCOS 为多囊卵巢综合征；FPG 为空腹血糖；FINS 为空腹胰岛素；HOMA-IR 为胰岛素抵抗指数；与同组治疗前比较，aP＜0.05

组别治疗组对照组t 值P 值例数28 29 FPG（mmol/L） FINS（mU/L） HOMA-IR治疗前5.27±0.70 5.44±0.37-1.130 0.265治疗后5.05±0.45a 4.92±0.56a 0.970 0.336治疗前13.48±4.73 12.20±5.19 0.974 0.334治疗后9.66±4.54a 8.44±2.81a 1.215 0.231治疗前3.17±1.24 2.99±1.42 0.530 0.598治疗后2.18±1.05a 1.89±0.76a 1.198 0.236

表5 两组PCOS 患者脂代谢指标比较（mmol/L，±s）

表5 两组PCOS 患者脂代谢指标比较（mmol/L，±s）

注：对照组予盐酸二甲双胍治疗；治疗组予补肾化瘀方治疗；PCOS 为多囊卵巢综合征；TG 为三酰甘油；TC 为总胆固醇；LDL 为低密度脂蛋白；HDL 为高密度脂蛋白；与同组治疗前比较，aP＜0.05

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2.6 两组PCOS 患者Galectin-3、IL-6、CRP 水平比较 治疗前，两组患者炎症指标水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，两组患者Galectin-3、IL-6 及CRP 水平显著降低（P＜0.05），治疗组患者Galectin-3、IL-6 及CRP 水平显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表6。

表6 两组PCOS 患者炎症指标比较（±s）

表6 两组PCOS 患者炎症指标比较（±s）

注：对照组予盐酸二甲双胍治疗；治疗组予补肾化瘀方治疗；PCOS 为多囊卵巢综合征；Galectin-3 为半乳糖凝集素-3；IL-6 为白介素6；CRP 为C 反应蛋白；与同组治疗前比较，aP＜0.05

组别治疗组对照组t 值P 值例数28 29 Galectin-3（ng/mL） IL-6（pg/mL） CRP（mg/L）治疗前11.27±2.54 10.70±3.03 0.769 0.445治疗后8.71±1.67a 9.91±2.23a-2.306 0.025治疗前40.89±3.89 39.02±5.07 1.558 0.125治疗后30.24±3.85a 32.62±4.97a-2.012 0.049治疗前3.67±1.56 3.70±1.06-0.067 0.947治疗后2.80±0.91a 3.32±0.64a-2.490 0.016

2.7 PCOS 患者Galectin-3、IL-6、CRP 与其他指标的相关性分析 Spearman 相关性分析显示，PCOS 患者血清中Galectin-3 水平与BMI、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、IL-6、CRP 呈正相关（P＜0.05），与年龄、WHR、FPG、HDL、FSH、LH、E2 及LH/FSH 无相关性（P＞0.05）；PCOS 患者血清中IL-6 水平与BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、Galectin-3 和CRP 呈正相关（P＜0.05），与HDL 呈负相关（P＜0.01），与年龄、WHR、FSH、LH、E2 及LH/FSH 无相关性（P＞0.05）；PCOS 患 者 血 清 中CRP 水 平 与BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、Galectin-3、IL-6 呈正相关（P＜0.05），与HDL 呈负相关（P＜0.05），与年龄、WHR、FSH、LH、E2 及LH/FSH 无 相 关 性（P ＞0.05）。见图1。

图1 Spearman 分析PCOS 患者Galectin-3、IL-6、CRP 与各变量之间的相关性

3 讨 论

近年来，越来越多研究关注PCOS 的慢性低度炎症，并发现其与糖脂代谢异常、高雄激素血症、排卵障碍等密切相关。研究指出，慢性低度炎症可能通过肥胖、胰岛素抵抗（IR）及高雄激素血症参与PCOS 的病理过程[8]。本研究结果发现，PCOS 患者血清Galectin-3 水平与BMI、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、IL-6、CRP 均呈正相关，IL-6 水平与BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、CRP 及Galectin-3 水 平 呈 正 相 关，CRP 水 平 与BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL、T、Galectin-3 及IL-6水平呈正相关。多项研究表明，PCOS 患者血清Galectin-3 水平显著升高，且与肥胖、糖代谢、高雄激素血症、慢性低度炎症和IR 密切相关，Galectin-3 可以作为Toll 样受体4（TLR4）的配体，激活TLR4/核因子κB 途径，释放IL-6、转化生长因子β1、白介素-10 等炎症因子，导致慢性低度炎症，可以抑制下游胰岛素信号传导，导致IR，可能是参与PCOS 发生发展的重要因子[4-5，9，11-13]。吴锐等[5]研究结果表明，PCOS 患者Galectin-3 水平与CRP、IL-6 水平呈正相关。IL-6在PCOS 患者体内异常表达，且与高雄激素血症、肥胖和IR 存在密切联系[10，14-15]。CRP 水平在PCOS 患者血清中升高，可在IL-6 刺激下由肝脏产生，有证据表明，CRP 与IR、体质量和脂肪量呈正相关[16]。

中医认为PCOS 属“月经病”“闭经”“不孕”等范畴，其病位在肾，与肝、脾相关，以肾虚血瘀为基本病机，肾者主水，肾阳不足，无以运化水湿，聚而成痰，日久成瘀，痰瘀互结，发为炎症，阻塞胞脉，则天癸失序，卵子生长发育障碍，月事失期，乃至不孕。因此，临床治疗中应当以补肾活血为主。补肾化瘀方（毓麟珠合芎归二陈汤加减）中含有菟丝子、杜仲、枸杞子、炒当归、丹参、川芎、生地黄、炒党参、炒苍术、茯苓、陈皮、浙贝母、夏枯草、香附、甘草，取毓麟珠补益气血，温养肝肾，强固冲任，调经助孕之意。方中去毓麟珠之鹿角霜、川椒，以防药性过于温燥；去白芍，改熟地为生地以防滋腻碍胃，加枸杞子，同杜仲、菟丝子合用，共奏补益肝肾，养阴生津之效；加丹参、香附，同当归、川芎合用，起养血行气，活血化瘀之能；改白术为苍术，调人参为党参，加陈皮，合以茯苓，四者合用，健脾助运以化痰湿；加浙贝、夏枯草消肿散结；佐以甘草调和诸药。诸药合用，共奏补肾活血，化痰散结之效。

本研究显示，与对照组比较，治疗组治疗后排卵率明显较高，中医证候积分降低更为显著，提示补肾化瘀方治疗肾虚血瘀型PCOS 患者，方药对证，故可有效缓解临床症状，改善排卵，取得较为满意的疗效。在妊娠率方面，治疗组与对照组差异无统计学意义，考虑与研究缺乏大数据支持，且部分患者无生育要求相关。在糖脂代谢及性激素方面，两种治疗方案均能显著降低FPG、FINS 和HOMA-IR 水平，但补肾化瘀方更有效降低LH、T、LH/FSH、TG、TC 及LDL 水平，提高HDL 水平，这与张丽等[17]研究结果基本一致，提示补肾化瘀方可纠正肾虚血瘀型PCOS 患者性激素、糖脂代谢紊乱状态。已有研究发现，补肾活血法联合西药治疗可降低PCOS 患者IL-6、IL-8、CRP 等促炎细胞因子浓度[18-19]；本研究显示，两种治疗方案均能降低Galectin-3、IL-6 及CRP 水平，其中治疗组降低更为显著，提示补肾化瘀方可有效清除炎症因子，改善慢性炎症状态，结合补肾化瘀方可降低T、TG、TC 及LDL 水平，降低HOMA-IR 值，推测其可能通过改善慢性炎症微环境，继而改善IR、高雄激素血症及脂代谢，从而在临床上发挥治疗PCOS 的作用。

综上所述，采用补肾化瘀方治疗肾虚血瘀型PCOS 患者临床疗效佳，可有效缓解临床症状，降低血清炎症指标Galectin-3、IL-6 及CRP 水平，改善糖脂代谢紊乱，调节性激素水平，促进排卵。