外周血miR-4465和miR-6089在亚临床糖尿病性心肌病诊断中的价值

曹丽慧, 孟宪杰, 李会

唐山市人民医院,河北唐山063000

糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)发生于无症状的糖尿病人群中为DCM,其发病率占DCM 50%～70%[1]。迄今为止,DCM仍然没有特异性的诊断方法,其诊断主要依靠超声心动图和灵敏度、特异度不足的血清生物学标志物[2]。研究表明,糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)升高是糖尿病患者一系列并发症的主要风险因素,但其特异度不足[3-7]。因此,寻找灵敏度及特异度较强的生物学标志物,以辅助DCM诊断有重要意义。微小RNA(microRNA,miRNA)是一类内源性非编码单链RNA分子,与许多疾病病理生理过程有关[8]。miR-4465和miR-6089可预防DCM诱导的心室舒张功能障碍[9]。本研究评估外周血miR-4465和miR-6089在DCM中的诊断价值,旨在为临床诊疗提供参考。

1 资料和方法

1.1 病例选择

本研究共选择2021年6月—2022年1月在本院内分泌科门诊就诊的266例亚临床Ⅱ型糖尿病受试者。纳入标准:①年龄>18岁;②确诊为亚临床糖尿病[10];③自愿参与本研究并出具了知情同意书。排除标准:①患者存在冠状动脉粥样硬化性心脏病、心脏瓣膜疾病、心房颤动、高血压或任何其他心脏疾病或相关心衰;②患者存在糖尿病性大血管或微血管并发症,包括视网膜病变、糖尿病性肾病、糖尿病性周围神经病变、糖尿病性周围血管疾病和脑卒中等;③妊娠期哺乳期女性;④其他重要的合并症,包括肿瘤、甲状腺功能障碍、肝肾功能障碍、免疫和风湿性疾病,或严重的精神疾病。所有受试者均签署书面知情同意书。本研究得到了本院医学伦理委员会的审查和批准。

1.2 病例资料收集及分组

糖尿病患者在入组时均采集了完整的病史,从中收集基本信息,如性别、年龄、体质指数和糖尿病病程等。所有患者均接受了全面的体格检查和辅助检查,包括心电图、超声心动图和门控心肌灌注成像等。入组第2天清晨禁食至少8 h后采集外周静脉血。患者有左心室舒张功能障碍的证据但射血分数保持不变,并且没有明显的隐匿性冠状动脉疾病确诊为DCM[11]。266例患者中确诊DCM患者49例(DCM组),余下的随机选取49例非DMC患者为对照组。

1.3 外周血miR-4465和miR-6089水平检测

采用mirVana PARIS提取试剂盒(Ambion,Austin,TX,美国)从200 μL血浆中提取总RNA。采用50 pmol/L Caenorhabditis elegans miR-39 (cel-miR-39)作为参照校正血浆miRNA水平。使用ABI 7900HT实时PCR检测系统(Applied Biosystems,CA,美国)检测miR-4465和miR-6089水平。

1.4 统计学分析

采用IBM SPSS 17.0统计学软件进行分析。计量资料采用组间t检验分析;计数资料采用χ2检验;以多因素Logistic回归分析DCM的危险因素;ROC判断miR-4465和miR-6089对DCM的诊断价值;采用Pearson相关性分析miR-4465、miR-6089的相关性。P<0.05认为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组一般资料和实验室检查结果的比较

DCM组的糖尿病病程和HbA1c高于对照组(P<0.05),外周血miR-4465和miR-6089水平低于对照组(P<0.05;表1)。

表1 两组患者一般资料和实验室检查结果的比较

2.2 多因素Logistic回归分析影响DCM发生的危险因素

以发生DCM为因变量(发生=1,未发生=0),以上指标中将有差异的因素为自变量(糖尿病病程、HbA1c、miR-4465及miR-6089)纳入Logistic回归分析,结果显示糖尿病病程、HbA1c、miR-4465和miR-6089为DCM发生的独立危险因素(P<0.05;表2)。

表2 影响DCM发生的多因素Logistic回归分析

2.3 外周血miR-4465和miR-6089对DCM的诊断价值分析

外周血miR-4465和miR-6089诊断DCM具有良好的价值(图1和表3)。

图1 外周血miR-4465和miR-6089诊断DCM的ROC曲线图

表3 外周血miR-4465和miR-6089诊断DCM的价值

2.4 外周血miR-4465和miR-6089与糖尿病病程、HbA1c的相关性分析

糖尿病病程和HbA1c均与外周血miR-4465和miR-6089呈负相关[对照组:糖尿病病程(r=-0.283,-0.345,P<0.05);HbA1c(r=-0.230,-0.271,P<0.05);DCM组:糖尿病病程(r=-0.428,-0.355,P<0.05);HbA1c(r=-0.275,-0.463,P<0.05)]。

3 讨 论

DCM目前尚无诊断的金标准,其分子机制也尚未完全阐明,且并无特异度的临床症状[12]。目前临床上普遍采用超声心动图来评估糖尿病患者可能存在的心脏功能障碍严重程度[13]。超声心动图检查和特定的血浆生物学标志物检测相结合是目前诊断早期DCM的最佳策略。与正常健康人群相比较,糖尿病患者人群的外周血miR-4465和miR-6089水平显著下调[14]。外周血miR-4465和miR-6089水平也被确定为糖尿病的预测因子[15]。本研究结果显示,DCM患者的外周血miR-4465和miR-6089水平低于对照组患者,且糖尿病病程、HbA1c、miR-4465和miR-6089为糖尿病患者发生DCM的独立危险因素。本研究中所有血液样本都是从无症状的DCM患者和相应对照组人群中收集,在评估外周血miR-4465和miR-6089水平在DCM早期诊断中的价值结果显示,外周血miR-4465和miR-6089的AUC分别为0.882和0.909,具有较好的诊断学价值。

糖尿病患者的左心室舒张功能障碍、主动脉硬化、心肌纤维化和心力衰竭的发生发展与高血糖水平相关[16-17]。因此,HbA1c被确定为糖尿病患者发生心血管疾病的重要风险预测因子。此外,除了血糖的水平和控制情况,糖尿病的持续时间也是糖尿病患者发生心血管疾病以及心衰的重要预测因素[18]。本研究结果显示,糖尿病病程和HbA1c均与外周血miR-4465和miR-6089呈负相关,提示外周血miR-4465和miR-6089可能参与糖尿病的进展,且与单独的参数相比,HbA1c、糖尿病病程和外周血miR-4465、miR-6089水平的组合在早期DCM诊断中可能具有更高的诊断价值。

综上所述,本研究结果显示,外周血miR-4465和miR-6089对于糖尿病患者DCM具有较好的诊断价值。