调脾增食颗粒对幼龄厌食大鼠血浆β-EP及CCK-8的影响

梁 雪,李会影,于映霞

(吉林省中医药科学院·吉林 长春 130021)

小儿厌食症是儿科常见的脾胃系统疾病,指小儿较长时间见食不贪、食欲不振、甚至拒食的一种病症[1]。调脾增食颗粒是本院儿科治疗小儿厌食症的临床经验方,临床应用疗效确切。本研究旨在探讨调脾增食颗粒对幼龄厌食模型大鼠血浆β-内腓肽(β-EP)及胆囊收缩素(CCK-8)的影响,为将其开发为中药新药提供实验数据。

1 实验材料

1.1 药物 调脾增食颗粒由鸡内金、藿香、神曲、麦芽、山楂、砂仁等中药组成;性状：棕褐色颗粒,味微苦;批号：20221024;由吉林省中医药科学院制剂室生产;每g药膏相当于3.02 g生药。健胃消食片：江中药业股份有限公司;批号：23052072。

1.2 实验动物 封闭群,35～40日龄健康幼龄SD大鼠,SPF级,雌雄各半,体质量60～80 g,由辽宁长生生物技术股份有限公司提供;实验动物生产许可证号：SCXK-(辽)2020-0001,实验动物使用许可证号：SYXK(吉)2022-0004。

1.3 试剂和仪器 β内啡肽(β-EP)试剂盒及CCK-8细胞活力检测试剂盒：南京建成生物工程研究所。ST-360酶标仪：上海科华实验系统有限公司。

2 实验方法

2.1 动物分组、造模及给药 选取60 只幼龄SD大鼠,适应性饲养3 d后,根据体质量,随机分为6 组,正常对照组、模型对照组、调脾增食颗粒高、中、低剂量组及阳性对照组,每组10只。正常对照组喂常规鼠饲料,其余各组采用南京中医药大学汪受传等的造模方法[2],用特制高蛋白高脂饲料(鱼松、奶粉、玉米粉、黄豆粉、白糖、鲜鸡蛋、鲜肥猪肉按1∶1∶2∶1∶1∶1.8∶2 比例配制),喂饲幼龄大鼠7 d,建立厌食症大鼠模型。摄食量低于正常对照组大鼠摄食量的 20%～30%、平均体质量低于正常对照组大鼠体质量的10%～15%,表示造模成功。从造模第8 天开始灌胃给药,正常对照组和模型对照组给予蒸馏水,调脾增食颗粒高、中、低剂量组分别以33.86、16.93、8.47 g/(kg·d)灌胃,分别为2 倍临床等效剂量、临床等效剂量及1/2临床等效剂量,阳性对照组大鼠给予健胃消食片0.675 g/(kg·d)灌胃,均连续给药4 周。

2.2 观察指标

2.2.1 进食量 记录大鼠每周进食量。

2.2.2 血浆β-EP及CCK-8检测 给药结束24 h后,采用3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠。采血前每管加抑肽酶 30 uL和10%EDTA-Na30 μL。腹主动脉取血后注入上述管内,充分摇匀并置于-4 ℃的冰箱,3 h内 4 000 r/min 低温离心 10 min,分离血浆,于-70℃保存待测。按照试剂盒说明方法检测大鼠血浆β-EP及CCK-8的含量。

2.3 统计学方法 所有数据均采用SPSS17.0统计学软件进行处理和分析,计量资料以(均数±标准差)表示,多组间比较采用单因素方差分析。以P<0.05为差异具有统计学意义。

3 结果

3.1 各组大鼠进食量比较 见表1。

表1 各组大鼠每周进食量比较周)

3.2 各组大鼠血浆β-EP及CCK-8含量比较 见表2。

表2 各组大鼠血浆β-EP及CCK-8含量比较

4 讨论

小儿厌食症是一种慢性消化功能紊乱综合征,厌食日久,对儿童的生长发育有严重影响。儿童摄食行为与多种肽类激素直接相关;其中,β-内啡肽(β-EP)作为肽类激素,在参与摄食调控的过程中发挥着重要作用[3];胆囊收缩素(CCK-8)也是一种参与胃肠功能调节的重要激素,具有明显的抑制食欲的作用,直接导致病理性的摄食减少[4]。调脾增食颗粒是本院儿科基于化积醒脾法治疗小儿厌食症的临床经验方,方中鸡内金和藿香同为君药,鸡内金味甘,性平,能消食化积,健运脾胃,擅治各种食积;藿香辛,微温,归脾、胃、肺经,醒脾开胃,增进饮食。神曲味甘辛,行散消食,健胃和中;麦芽味甘,性平,行气消食,健脾开胃;山楂酸甘,微温,可消食化积,三者合用,可化谷、面、肉诸积,并助君药以增消食化积、健脾开胃之功。砂仁味辛,性温,气味芳香,可暖肺醒脾,养胃益肾,行气和中;石菖蒲辛苦而温,芳香而散,擅化湿浊、醒脾胃、行气滞、消胀满;陈皮味辛苦,性温,理气醒脾,疏利中、上二焦气机;此三者亦为臣药,共助醒脾开胃之效。当归补血活血,以消瘀滞;佛手入脾胃经,理气和胃;石斛可养脾胃阴津,使诸药辛而不燥;连翘清热散结以消食积之热;共为佐药。诸药合用,使食积去,脾胃复,标本兼治,共奏化积醒脾之功效。该方治疗小儿厌食症疗效确切,受到广大患儿和家长的普遍认可。

本文研究结果表明,调脾增食颗粒高剂量组第3 周和第4 周的进食量明显高于模型对照组,差异具有极显著统计学意义(P<0.01)。调脾增食颗粒中剂量组第3周和第4周的进食量略高于模型对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组比较,调脾增食颗粒高剂量组大鼠的血浆β-EP含量明显升高,CCK-8含量明显降低,差异具有非常显著的统计学意义(P<0.01);调脾增食颗粒中剂量组大鼠的血浆β-EP含量升高及CCK-8含量降低,与模型组差异具有统计学意义(P<0.05)。由此可见,调脾增食颗粒治疗厌食症与调节血浆β-EP及CCK-8的分泌与释放的有关。