规模猪场开展常态化非洲猪瘟检测的做法与体会

李忠辉 建宁县伊家乡畜牧水产站 福建建宁 354500

非洲猪瘟防控常态化时期， 规模猪场要夯实非洲猪瘟防控基础，保障规模猪场正常生产，最重要的是构建完善的生物安全体系，加强生产管理、调运监管、检疫检验、疫病监测、病死猪无害化处理和粪污资源化利用等闭环管理。 在多年的防控非洲猪瘟的生产实践中体会到，在做好生物安全的基础上，规模猪场建设自检实验室，开展非洲猪瘟常态化检测，对做好非洲猪瘟防控起到了重要的作用。

1 开展规模猪场常态化检测的主要作用

1.1 风险评估与风险排查 猪场主动开展非洲猪瘟检测，检测样品出阳性结果是代表核酸阳性，虽然不能判断它具有活性或具有感染性， 但能够表明病原的感染痕迹；检测核酸阴性结果，最起码能说明对环境的清理、清洗、消毒起到了一定作用；如果环境检测核酸阳性，说明清理、清洗、消毒工作是不彻底的。如果没有检出非洲猪瘟病毒，说明可以继续沿用现有方案“严防死守”，使自己心中有底气，继续养殖生产计划。 猪场不开展检测，猪未发病，算是侥幸逃过，但不能保证“明天”猪不得病；一旦得病，无药可治、无计可施，而且可能大面积污染、大范围感染，精准清除也不可能了，面临的是全军覆没的风险。

1.2 做到早发现与早处理 据报道，猪感染非洲猪瘟病毒后， 一般2～3 d 血液病毒核酸检测阳性，3～4 d 出现发热等症状，4～5 d 口腔及肛拭子样品病毒核酸检测呈阳性，6～10 d 感染猪大部分发病死亡，同群接触猪同样全部发病、死亡。非洲猪瘟强毒株感染、发病、排毒，随着病程的发展，排毒量增加，Ct 值减小，这也是非洲猪瘟早期检测和精准清除的基础。经过几年实践发现，非洲猪瘟传播是有一个过程的，一般它的潜伏期就是预警预报， 早期预警预防通常为3～15 d 或更长，目的是检测出阳性后，在还没有感染到其它健康猪只时进行有效隔离。 通过定期抽检检出非洲猪瘟感染猪，采取适当措施，无害化处理患猪，并在短时间内转移健康猪只，早发现、早精准清除，将损失降到最低。

静默生产与精准清除的依据。实践中，一些猪场在发现异常猪或者在猪死亡后进行检测， 结果非洲猪瘟阳性，这时为时已晚。只有在猪场生产非常平稳的状况下，按常态化监测计划，对猪群进行抽查，即制定一套筛查方法， 按照一定的抽样比例对正常猪群进行监测。一旦发现问题立即进行彻底筛查，全场静默生产，发现异常情况，及时采取相应措施，最大程度减少损失。

2 常态化非洲猪瘟检测方案

2.1 检测频率 常态化非洲猪瘟检测频率，可根据不同环节风险评估结果及周边疫情情况， 结合本场实际确定，对高风险区域频率要高些。如引种、车辆、精液，要求每批次均进行采样检测；采购饲料、物资产品等，实行定期监测，检测频率可按每月或每周进行；每周对猪群、圈舍、仓库、药房、通道等区域进行采样检测。

2.2 检测采样重点 规模猪场的非洲猪瘟风险点大小可以依次划分为引种（精液）、运猪车、人员、饲料、物品。首先，对于实行自繁自养的规模猪场，调运生猪的车辆是风险最高的因素。 据全国非洲猪瘟疫情暴发以来有关流行病学调查结果显示， 生猪运输车辆，是疫情传播扩散的首要因素；其次，由于人员和物资进入猪场，也是引发疫情的重要原因。做好对生猪运输车辆以及进入猪场人员和物资的检测，是常态化非洲猪瘟检测的重点。

2.3 检测采样方案

2.3.1 猪场外围环境采样 运猪车辆： 对车辆前中后、上下、里外采集环境拭子，不少于10 个点。 车辆洗消中心：主要采集地面、工作人员身上（包括衣物、手臂、鞋底）等环境拭子，不少于8 个点。 售猪中转区：主要采集地面、中转台栏杆等环境拭子，不少于8 个点。病死猪及无害处理区：每头病死猪鼻肛拭子各1 份；同时采集地面、工作人员身上等环境拭子，不少于8 个点。 门卫值班室： 主要采集地面和门把等环境拭子，不少于4 个点。 物品消毒间：主要采集地面和物品表面等环境拭子，不少于4 个点。饲料运输车：主要采集车辆外围、司机身上等环境拭子，不少于8 个点。进场人员：主要采集人员身上及行李表面等环境拭子，各1 份。

2.3.2 猪场缓冲区环境采样 食堂厨房：地面、案板采样，不少于5 个点。办公区：地面采样，不少于3 个点。员工宿舍：地面采样，每房间不少于3 个点。场区环境：地面采样，不少于10 个点。食材：外包装采样，不少于3 份。

2.3.3 猪场内部环境采样 兽医室：地面采样，不少于3 个点。 饲料仓库：地面采样，不少于5 个点。 休息间：地面采样，不少于3 个点。生产区员工鞋靴：鞋靴外周拭子采样，取样比例20%。 猪舍通道：地面采样，不少于10 个点。 死亡母猪：猪鼻肛拭子采样，每猪必采1 份。 残猪、弱猪：鼻肛拭子采样，每猪1 份。

2.4 采样注意事项

2.4.1 样品的种类 对可疑猪、病死猪、残猪采样，可采集深部咽拭子、前腔静脉或尾根抗凝血、口鼻拭子等；对分娩母猪，应采集脐带血、胎衣；对死胎和流产胎儿，应采集淋巴结、脾脏等组织样品。猪群转群、分娩、免疫等应激会促进非洲猪瘟病毒的复制，可在猪群受到应激刺激后2～3 d 内及时采咽拭子、 尾根血、胎衣液等样品进行检测，以提高检出率。

2.4.2 样品混样检测 同一采样对象可混样检测，混样数量尽量不要超过10 个。

3 检测结果的应用

实验室检测是生物安全体系的重要内容， 投入人力、物力开展检测，目的是预警风险，查找漏洞，发现问题，解决问题。 如车辆样本为检测阳性，车辆必须隔离停运，按规程规范消毒，再进行检测评估；外来人员及行李样本检测阳性的， 应当拒绝相关人员及物品进入，并对污染场所严格消毒；猪场内部样品检测阳性的，包括兽医室、饲料仓库、休息间、生产区员工鞋（衣服）、猪舍通道、残猪、弱猪、病死猪、病死猪无害处理区等，应立即启动相关防控应急预案。

4 体 会

4.1 规范建设企业自检实验室 一是实验室应建在生产场区之外，根据所使用的检测方法，确定样品处理室（含核酸提取）、试剂准备室（含体系配制）和扩增室等功能的室内布局；二是配齐仪器设备，非洲猪瘟常态化检测实验室必须配备生物安全柜、PCR仪、核酸提取仪、离心机、高压灭菌锅等；三是要加强检测人员的管理，必须配备专职的检测人员，最好要具有兽医、生物医学或者相关专业的学习背景，接受过检测工作培训； 四是要做好生物安全防护和生物安全管理技术培训工作，定期参加实验室开展比对。

4.2 检测结果要与猪群生产数据、临床表现结合起来进行分析 非洲猪瘟的检测只针对采样时的状态， 检测结果可能受采样质量低、 实验室检测不规范、检测试剂盒不敏感、实验室污染、操作失误等因素影响，因此，当检测结果与猪群临床表现和生产数据等不相符时，要重新进行检测复核。