急性冠脉综合征患者血清miR-130a、AngⅡ水平与冠状动脉病变程度的关系*

冯天保,刘宏颖,方 媛,张 阳,闻志军,李 臻

遵化市人民医院心血管内科,河北唐山 064200

急性冠脉综合征(ACS)是一种致残率高、起病急的心血管病变,也是引发心血管疾病死亡的重要因素[1-2]。目前认为ACS发生发展与动脉粥样硬化、血管内皮功能紊乱及微小RNA(miRNA)异常表达等相关[3-5]。研究发现,miR-130a在冠心病患者中水平较高,其有望成为评估冠心病严重程度的辅助指标[6]。另外,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在ACS患者血浆中水平较高,其具有评估ACS患者病情严重程度的潜在价值[7]。李丽等[8]研究发现,miR-130a可调控AngⅡ表达从而影响心肌细胞纤维化进程。推测血清miR-130a、AngⅡ水平与ACS患者冠状动脉病变程度相关。因此,本研究通过测定miR-130a、AngⅡ在ACS患者血清中的水平,旨在分析miR-130a、AngⅡ与冠状动脉病变程度的关系及其诊断ACS的价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2021年1月至2023年2月本院收治的ACS患者160例作为ACS组,其中男85例、女75例,年龄45～78岁,平均(60.89±10.87)岁。纳入标准:(1)患者符合ACS诊断标准[9];(2)年龄>18岁。排除标准:(1)有精神疾病或恶性肿瘤者;(2)合并脏器功能不全、自身免疫性疾病或感染性疾病者;(3)妊娠期女性。同期另纳入160例本院的体检健康者作为对照组,男78例、女82例,年龄45～78岁,平均(59.87±10.67)岁。本研究所有受试者均签署知情同意书,由医院伦理委员会批准(审批号:临床L2020第54号)。

1.2方法

1.2.1临床资料收集 收集所有受试者性别、年龄、心率、体重指数(BMI)、高血压史、糖尿病史。

1.2.2血清标本采集 收集ACS患者入院后次日、体检健康者体检当日清晨空腹静脉血6 mL,静置16 min后,4 600 r/min离心11 min,分离血清,均分为两部分装到新的收集管中保存于-80 ℃冰箱备用。

1.2.3血清miR-130a水平检测 取血清标本,低温融化,使用Trizol试剂盒(批号2171841,杭州翠鸟生物试剂有限公司)提取总RNA,利用逆转录试剂盒(批号SJ65921,邯郸市亚星生物科技有限公司)逆转录为cDNA。应用PCR试剂盒(批号2180765,杭州翠鸟生物试剂有限公司)及荧光定量PCR仪(型号CG-05,广州隽沐生物科技有限公司)进行扩增、检测。反应体系参照PCR试剂盒进行配置,荧光定量PCR程序设定为:94 ℃ 3 min,93 ℃ 31 s、62 ℃ 28 s、71 ℃ 16 s 40个循环,72 ℃延伸4 min。以GAPDH为内参,引物由大连美仑生物科技公司设计、合成,引物序列见表1,采用2-ΔΔCt计算分析血清miR-130a水平。

表1 引物序列

1.2.4血清AngⅡ水平测定 采用人AngⅡ酶联免疫吸附试验试剂盒(批号EH26272,江苏艾玮得生物科技有限公司)配制AngⅡ的标准样品溶液,同时解冻血清,酶标仪(型号Chromate 4300,广州测迪生物科技有限公司)测定血清AngⅡ标准品溶液在450 nm处的吸光度,绘制AngⅡ的标准回归曲线,结合AngⅡ的标准回归方程,计算血清AngⅡ水平。

1.2.5冠状动脉病变程度评价 利用Judkin′s法多体位投照对ACS患者行冠状动脉造影检查,将冠状动脉血管分为15段,按Gensini积分系统和冠状动脉血管图像分段评价标准来评定各冠状动脉分支血管病变程度,计算总Gensini评分[10]。依据ACS患者的总Gensini评分将其分为轻度组57例(0～<31分)、中度组54例(31～<60分)、重度组49例(≥60分)[11]。

2 结 果

2.1对照组、ACS组临床资料比较 对照组、ACS组性别、年龄、心率、BMI比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,ACS组高血压史、糖尿病史比例升高(P<0.05)。见表2。

表2 对照组、ACS组临床资料比较(n/n或

2.2对照组、ACS组血清miR-130a、AngⅡ水平比较 与对照组比较,ACS组患者血清miR-130a、AngⅡ水平升高(P<0.05)。见表3。

表3 对照组、ACS组血清miR-130a、AngⅡ水平比较

2.3不同病变程度ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平比较 轻度组、中度组、重度组ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平依次升高(P<0.05)。见表4。

表4 不同病变程度ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平比较

2.4ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平的相关性分析 Pearson相关分析结果显示,ACS患者血清miR-130a水平与AngⅡ呈正相关(r=0.584,P<0.001)。

2.5影响ACS发生的多因素Logistic回归分析 以ACS发生为因变量,以高血压史、糖尿病史及血清miR-130a、AngⅡ水平为自变量进行多因素Logistic回归分析,结果显示有高血压史、糖尿病史及血清miR-130a、AngⅡ水平升高是影响ACS发生的独立危险因素(P<0.05)。见表5。

表5 影响ACS发生的多因素Logistic回归分析

2.6血清miR-130a、AngⅡ水平对中度ACS的诊断价值 ROC曲线分析结果显示,血清miR-130a、AngⅡ及二者联合诊断中度ACS的曲线下面积(AUC)分别为0.728、0.823、0.885,相较于血清miR-130a、AngⅡ水平单独诊断的AUC,二者联合诊断的AUC更高(Z=3.276、P=0.001,Z=2.226、P=0.026)。见表6、图1。

图1 血清miR-130a、AngⅡ水平及二者联合诊断中度ACS的ROC曲线

表6 血清miR-130a、AngⅡ水平对中度ACS的诊断价值

2.7血清miR-130a、AngⅡ水平对重度ACS的诊断价值 ROC曲线分析结果显示,血清miR-130、AngⅡ及二者联合诊断重度ACS的AUC分别为0.731、0.730、0.825,相较于血清miR-130a、AngⅡ水平单独诊断的AUC,二者联合诊断的AUC更高(Z=2.214、P=0.027,Z=2.457、P=0.014)。见表7、图2。

图2 血清miR-130a、AngⅡ水平及二者联合诊断重度ACS的ROC曲线

表7 血清miR-130a、AngⅡ水平对重度ACS的诊断价值

3 讨 论

ACS是由心肌缺血引发的一种心血管疾病,其致死率高,严重威胁人类健康,及早发现并给予治疗对提高ACS患者预后效果具有重要意义[12-13]。血液生化标志物有较高的灵敏度、特异度,通过测定特殊的标志物用于评估ACS病情发展程度或预测有关主要不良心血管事件的发生,改善预后有积极意义。

miRNA可通过调控有关基因表达进而调控细胞凋亡、参与炎症反应、影响血管内皮损伤,是理想的生物标志物,且许多miRNA与ACS相关[14-15]。其中,miR-130a与血管内皮细胞损伤、心脏发育、心肌纤维化、心律失常、心肌梗死等现象关系密切[16-17]。另外,miR-130a在急性缺血性脑卒中大鼠脑组织中呈高表达,其可能通过靶向调控有关基因表达,进而调节血管生成[18]。BARRACLOUGH等[19]发现,高水平的miR-130a会增加ACS发生的风险,而经秋水仙碱治疗后,可使ACS患者中升高的miR-130a恢复到与健康者相似的水平。本研究发现,与体检健康者比较,ACS患者血清miR-130a水平较高,这与谢岩等[6]和BARRACLOUGH等[19]报道的miR-130a的水平变化趋势一致。本研究还发现,血清miR-130a水平随ACS患者冠状动脉病变程度加重而呈升高趋势,推测miR-130a可能通过调节相关信号通路和基因表达影响心肌细胞增殖、凋亡和血管生成,造成血管内皮功能障碍,从而在ACS病理变化中起作用,但其具体机制仍需进一步研究证实。此外,本研究探讨了血清miR-130a对ACS冠状动脉病变程度的诊断价值,结果显示,血清miR-130a诊断中、重度ACS的AUC分别为0.728、0.731,提示血清miR-130a对ACS中、重度分级有一定诊断价值,测定血清miR-130a水平有助于临床及时诊断ACS冠状动脉病变程度。

AngⅡ可影响心肌纤维化、细胞增殖、凋亡,促进血管内氧化应激,进而造成内皮功能障碍,调节血管收缩功能,促进炎症细胞浸润,诱发炎症反应,促使易损斑块形成,造成血栓,影响冠心病等心血管病变进程[20-21]。有研究发现,AngⅡ在ACS患者血清中呈高水平,其可作为判断ACS危险分层和预后预测的辅助指标[22]。本研究结果显示,与体检健康者比较,ACS患者血清AngⅡ水平升高,与秦曙光等[22]的研究结果相似,并且ACS患者冠状动脉病变程度越高血清AngⅡ水平越高,提示血清AngⅡ可能与ACS冠状动脉病变程度有关。同时,本研究探讨了血清AngⅡ对ACS冠状动脉病变程度的诊断价值,结果显示,血清AngⅡ诊断中、重度ACS的AUC分别为0.823、0.730,提示血清AngⅡ可作为诊断ACS冠状动脉病变程度的潜在指标。

余明等[23]研究显示,miR-130a可通过调控AngⅡ表达进而调节心血管疾病进展。本研究结果显示,ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平呈正相关,且血清miR-130a水平与AngⅡ升高是影响ACS发生的独立危险因素,提示血清miR-130a、AngⅡ水平可能共同参与ACS病变过程,二者高水平可能更容易诱发ACS的发生,但其机制有待深入研究证实。进一步研究发现,血清miR-130a、AngⅡ水平联合诊断中、重度ACS的AUC分别为0.885、0.825,提示血清miR-130a、AngⅡ联合对ACS中、重度分级有较好的诊断价值,可更好地诊断ACS冠状动脉病变程度,且优于单一指标,有一定临床参考价值。

综上所述,ACS患者血清miR-130a、AngⅡ水平较高,二者水平呈正相关,均与ACS冠状动脉病变程度有关,二者联合对冠状动脉病变程度具有较高诊断价值。但本研究样本较少,研究结果有一定局限性,后期仍需扩大样本,从多角度探究血清miR-130a、AngⅡ水平在ACS发生发展过程中的作用机制。