血清Betatrophin对2型糖尿病合并代谢相关脂肪性肝病预测价值的研究

李 娟，徐家新，王 春，王艳秋，周路路

（1.蚌埠医学院第二附属医院 内分泌科，安徽蚌埠 233040；2.蚌埠医学院第一附属医院儿科）

代谢相关脂肪性肝病（metabolic associated fatty liver disease，MAFLD）是一组与代谢障碍相关的高度异质性疾病，患病率全球已高达25%[1]，其患病率与2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）等代谢性疾病上升幅度一致，对人类健康危害极大。胰岛素抵抗是T2DM 和MAFLD共同的病理生理基础，也是主要危险因素。MAFLD与糖尿病伴随，可以预测2型糖尿病发生[2]，同时存在明显增加预后不良风险。

血管生成素样蛋白家族是一种新的糖蛋白家族，Betatrophin又称为血管生成素样蛋白8（ANGPTL8），主要在人类和小鼠的肝脏表达，并且在脂肪组织中高度富集。一些研究[3,4]表明，Betatrophin在胰岛素抵抗、糖脂代谢和激素调节中起重要作用。以往研究大多为血清Betatrophin水平与T2DM或MAFLD之间的相关性，Betatrophin与T2DM合并MAFLD关系的研究国内少有报道，目前两者合并症临床发病率较高，机制尚未阐明。故本研究观察Betatrophin水平在T2DM合并MAFLD患者体内的变化，探讨其对疾病的预测价值，分析可能的机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2021年1月～2021年11月于蚌埠医学院第二附属医院内分泌科住院的T2DM患者58例，其中男31例，女27例，均符合《中国2 型糖尿病防治指南(2020年版)》糖尿病诊断标准。MAFLD诊断标准参照2018年《非酒精性脂肪性肝病防治指南》和2020年《MAFLD新定义的国际专家共识声明》[5]。排除标准：高渗高血糖综合征、糖尿病酮症酸中毒、1型糖尿病、低血糖昏迷、肝肾功能严重异常、严重感染、大量饮酒史（男>140 g/周，女>70 g/周）、病毒性及自身免疫性肝炎、恶性肿瘤病史、甲状腺功能异常、其他自身免疫性疾病史，以及近1个月内服用过二甲双胍、钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂、胰高血糖素样肽1受体激动剂、噻唑烷二酮类药物的患者。T2DM患者按照是否合并MAFLD分为T2DM合并MAFLD组（T2DM+MAFLD，n＝38），男性19例，女性19例，平均年龄（54.37±13.55）岁，单纯T2DM组（T2DM，n＝20），男性12例，女性8例，平均年龄（57.40±8.56）岁。选取同期体检健康者为正常对照组（NC，n＝20），男性9例，女性11例，平均年龄（57.05±8.85）岁。组间性别和年龄比较无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 方法

所有研究对象禁食8 h以上，于第二天清晨空腹抽取静脉血5 mL，置于双凝管中，离心后收集上清液，测定血清Betatrophin水平采用酶联免疫分析法，同时测定ALT、FPG、HbA1c、FIns、TG、TC、LDL-C、HDL-C浓度，化学发光法、均相酶比色法、GOD 法、GPO酶法检测，反映胰岛素抵抗用稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）表示，HOMA-IR＝FPG×FIns/22.5。然后记录年龄、身高、体重，计算体重指数（body mass index，BMI），测量血压。所有研究对象在我院彩超室行空腹腹部彩超检查。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 病例组和对照组的相关指标及Betatrophin比较

病例组与对照组相比，BMI、ALT、FPG、HOMA-IR、HbA1c、TG、LDL-C、Betatrophin高于对照组，HDL-C低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 病例组和对照组相关指标及Betatrophin比较

2.2 3组之间的相关指标及Betatrophin的比较

3组之间在BMI、ALT、FPG、HOMA-IR、HbA1c、TG、LDL-C、HDL-C、Betatrophin存在差异，有统计学意义（P＜0.05）。

3组间两两进行比较。单纯T2DM组与对照组：BMI、FPG、HbA1c、LDL-C、HDL-C、Betatrophin差异有统计学意义（P＜0.05）。T2DM合并MAFLD组与对照组：BMI、ALT、FPG、HOMA-IR、HbA1c、TG、LDL-C、HDL-C、Betatrophin差异有统计学意义（P＜0.05）。T2DM合并MAFLD组与单纯T2DM组： BMI、HOMA-IR、HbA1c、TG、Betatrophin差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 3组相关指标及Betatrophin的比较

2.3 血清Betatrophin水平与2型糖尿病患者中各指标之间关系

Betatrophin在58例2型糖尿病患者中，与TG呈显著正相关，（r=0.318，P=0.015），与性别、年龄、BMI、ALT、FPG、HOMA-IR、HbA1C、TC、LDL-C、HDL-C均无相关性。见表3。

表3 血清Betatrophin水平与各指标之间关系

2.4 Logistic回归分析T2DM合并MAFLD的影响因素

以单纯T2DM与T2DM合并MAFLD组为因变量，BMI、HOMA-IR、HbA1c、TG、Betatrophin为自变量进行分析，结果显示，TG和Betatrophin对T2DM合并MAFLD的发生差异有统计学意义（P＜0.05），TG和Betatrophin是T2DM合并MAFLD的独立影响因素，对其有预测价值。

3 讨论

代谢相关脂肪性肝病已成为当前全球第一大慢性肝病，全因死亡率显著升高，已经造成了严重的损害，但其潜在的病理机制尚未完全阐明，缺乏有效的治疗药物。最近的一项研究发现，MAFLD越来越被视为一种代谢紊乱，不仅被认为是代谢综合征中肝脏表现，而且被认为早于代谢综合征和2型糖尿病的发生发展，其中胰岛素抵抗可能起主要作用[6]。本研究中显示，T2DM合并MAFLD组胰岛素抵抗更加明显，说明胰岛素抵抗参与其中。既往研究统计已确诊的T2DM中MAFLD的患病率约为57%~80%[7-9]，甚至更高[10]。本研究显示，T2DM中约66%患者合并MAFLD，进一步证实了两者合并存在临床常见。有研究证明，T2DM合并MAFLD形成肝脏炎症及纤维化的进展加速[11]。鉴于MAFLD和T2DM关系密切及危害性，目前缺乏有效快捷的检查方法，需要可靠的生物标志物来识别和发现疾病进展，对患者的治疗和预后有着重要临床意义。

Betatrophin通过与ANGPTL3和ANGPTL4相互作用来调节甘油三酯代谢，以抑制脂蛋白脂肪酶活性[12-14]。这进一步表明Betatrophin与脂质代谢密切相关，可能是T2DM等代谢综合征的重要环节。Yue等人[15]发现，Betatrophin与T2DM患者的病程、胰岛功能以及胰岛素抵抗程度呈正相关。另有研究[16]发现，Betatrophin水平在新诊断的T2DM患者中显著升高，与血糖、胰岛素抵抗升高幅度相一致。Gao等[17]研究显示新诊断T2DM患者Betatrophin水平升高，与甘油三酯及餐后血糖呈正相关，Betatrophin可能参与葡萄糖和甘油三酯代谢。我们在研究T2DM患者与健康对照组相关指标比较中发现，T2DM患者体内BMI、ALT、FPG、HOMA-IR、HbA1c、TG、LDL-C、Betatrophin高于对照组，HDL-C低于对照组，Betatrophin与血糖、血脂、胰岛素抵抗存在相关性。推测可能原因，T2DM患者主要以胰岛素抵抗为主，Betatrophin的升高可增强胰岛素介导的葡萄糖摄取，抑制肝糖输出，减轻胰岛素抵抗从而改善血糖水平。Betatrophin也可能通过与ANGPLT3的相互作用调节了血脂和血糖[18]。

2016年Lee等人[19]首次证明，NAFLD患者的血清Betatrophin水平明显高于对照组，血清Betatrophin浓度与血糖、TG、HOMA-IR水平呈正相关。人类研究结果得到了动物实验的支持，这意味着Betatrophin可能是NAFLD的新型生物标志物。随后Wen等[20]研究结果表明，血清Betatrophin在NAFLD患者中增加，脂肪的积累可能间接反映了疾病的进展。2021年Yani等人[21]汇总和分析了过去15年中对ANGPTL和MAFLD的临床研究，结果显示MAFLD患者的Betatrophin水平明显高于健康个体，Betatrophin可以作为MAFLD早期阶段诊断的关键指标，同时还可以在一定程度上反映MAFLD的进展。我们的研究结果显示，合并MAFLD患者的Betatrophin、BMI、HbA1c、TG和胰岛素抵抗指数水平明显高于未合并的单纯T2DM组。高脂血症或脂毒性可以激活内质网（endoplasmic reticulum，ER）应激，从而导致胰岛素抵抗促进T2DM和MAFLD的发展，分析上述的研究结果可以解释，MAFLD或T2DM受试者中Betatrophin水平升高的潜在机制可能激活了ER应激[21]。

近期研究Betatrophin与NAFLD的早期组织学相关性结果表明，在NAFLD的早期阶段Betatrophin水平显著增加，是疾病的独立预测因子[22]。在研究中，血清甘油三酯和空腹血糖水平似乎是Betatrophin水平的显著阳性预测因子。我们对影响T2DM合并MAFLD患者的多因素回归分析及以上指标的相关性分析结果发现，Betatrophin与TG是T2DM合并MAFLD发病的独立影响因素。相关性分析发现，Betatrophin与TG呈正相关，具有一定的预测价值。

综上，Betatrophin与血糖、血脂、胰岛素抵抗及MAFLD密切相关，是T2DM合并MAFLD发病的独立影响因素，具有一定的预测价值；检测方法相对快速便捷，早期检测该指标可以作为疾病发生和发展趋势的潜在指标，可能是用作疾病诊断的新型生物标志物。