T2DM 患者尿β2-MG 及血清OST、25（OH）D3 水平与糖尿病肾病发病风险的关系

郭玲 丁静贤

糖尿病肾病（diabetic kidney disease，DKD）是因糖尿病引起肾损伤的慢性微血管疾病，是2 型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）最严重的并发症之一。DKD 不仅会引起患者进展为终末期肾病，亦显著增加患者发生心血管疾病及死亡的风险，严重威胁患者生存质量及生命健康［1］。DKD病程进展缓慢，随着疾病发展，肾功能会受到无法逆转的损伤，但在疾病早期经过治疗，肾脏损害可以逆转［2］。因此，早期诊断及干预DKD 对于促进疾病转归至关重要。24 h 尿蛋白排泄率及肾小球过滤估计值（Glomerular filtration rate，eGFR）是评估DKD 患者肾功能与疾病分期的常用指标，但其对DKD 早期诊断效果有限。有文献报道［3］，尿β2微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）在DKD 患者中的表达高于单纯T2DM 患者及健康人群。血清骨钙素（Osteocalcin，OST）及25 羟基维生素D3［25 hydroxyvitamin D3，25（OH）D3］均是骨代谢指标，其表达水平与早期肾损伤有关［4］。本研究将通过测定DKD 患者上述指标水平，分析上述指标与DKD 发病风险的关系，以期为T2DM 患者早期发现及预防DKD 提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018 年1 月至2022 年7 月常州市武进中医医院收治的DKD 患者112 例（DKD 组）、单纯T2DM 患者53 例（T2DM 组）、同期在医院体检的健康志愿者49 名（对照组）作为研究对象。本研究所有研究对象均知情同意，且已签署知情同意书。本研究通过常州市武进中医医院医学伦理委员会批准后开展。

纳入标准：①T2DM 诊断符合《中国2 型糖尿病防治指南（2020）》［5］的关于T2DM 确诊标准；②DKD 诊断符合《中国糖尿病肾脏疾病防治临床指南》［6］的关于DKD 确诊标准；③健康志愿者血糖指标、肾功能指标正常；④无阅读及沟通能力障碍；⑤临床资料完整。排除标准：①Ⅰ型糖尿病、妊娠期糖尿病等其他糖尿病分型；②合并泌尿系统感染或梗阻疾病；③合并心、肺等重要器官衰竭者；④其他疾病引起的肾功能异常；⑤近期服用肾毒性药物；⑥合并恶性肿瘤、内分泌疾病或血液系统疾病。

1.2 方法

1.2.1 一般临床资料收集

收集所有研究对象性别、年龄、糖尿病病程、身高、体重等一般资料，并计算体质指数（Body mass index，BMI）。

1.2.2 标本收集及处理

采集所有受检者清晨空腹血液3～5 mL，离心（3 000 r/min，10 min，离心半径：10 cm）后取上血清，收集受检者晨起中段尿离心处理（2 000 r/min，10 min，离心半径：8 cm）后取上清液，低温保存待检。

1.2.3 检测方法

以免疫比浊法测定β2-MG 含量，酶联免疫试剂盒购自美国西门子医疗系统有限公司；使用全自动生化仪（型号：C701，厂家：德国罗氏）检测血清血清肌酐（Serum creatinine，Scr）及尿素氮（Urea nitrogen，BUN）水平；根据慢性肾脏病流行病学合作研究公式（Chronic kidney disease epidemiology collaboration，CKD-EPI）［7］通过Scr 水平计算eGFR水平；使用全自动电化学发光免疫分析仪（德国罗氏公司）及其配套试剂检测血清OST 及25（OH）D3 水平。所有检测均按照试剂盒说明书操作。

1.2.4 统计学处理

使用SPSS 23.0 统计学软件对数据进行分析处理，计量资料以（）表示，组间两两比较采用t检验，多组间比较采用F检验；采用Pearson 相关模型分析尿β2-MG、血清OST、25（OH）D3 与肾功能指标的相关性；采用Logistic 回归模型分析影响DKD 的因素；绘制受试者工作曲线（ROC）分析尿β2-MG、血清OST、25（OH）D3 对DKD 的预测价值。以P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三组一般临床资料及实验室指标比较

三组性别、年龄、BMI、TG、TC 等指标比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；尿β2-MG、Scr 及BUN水平比较，DKD 组＞T2DM 组＞对照组，eGFR、血清OST 及25（OH）D3 水平比较，DKD 组＜T2DM 组＜对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 三组一般资料及实验室指标比较［n（%），（）］Table 1 Comparison of general clinical data and laboratory indexes among the three groups［n（%），（）］

注：a表示与对照组比较，P＜0.05；b表示与T2DM 组比较，P＜0.05。

2.2 DKD 患者尿β2-MG、血清OST、25（OH）D3与肾功能指标的相关性

Pearson 相关性模型分析显示，β2-MG 水平与Scr、BUN 水平呈正相关，与eGFR 水平呈负相关（P均＜0.05）；血清OST 及25（OH）D3 与Scr 及BUN 呈负相关，与eGFR 呈正相关（P均＜0.05）。见表2。

表2 DKD 患者尿β2-MG、血清OST、25（OH）D3 与肾功能指标的相关性分析Table 2 Correlation analysis of urinary β2-MG，serum OST，25（OH）D3 and renal function indexes in DKD patients

2.3 DKD 患者危险因素的多因素Logistic 回归模型分析

结果显示，Scr、BUN、β2-MG、血清OST 及25（OH）D3 是DKD 患者的独立影响因素（P均＜0.05）。见表3。

表3 DKD 患者危险因素的多因素Logistic 回归分析Table 3 Multivariate Logistic regression analysis of risk factors in patients with DKD

2.4 尿β2-MG、血清OST 及25（OH）D3 及联合检测对DKD 的预测价值

尿β2-MG、血清OST及25（OH）D3预测DKD的下曲线面积（AUC）分别为0.831、0.894、0.763，联合检测为0.936，高于单一检测（P＜0.05）。见表4、图1。

图1 ROC 曲线Fig. 1 The ROC curve

3 讨论

T2DM 是一种以血糖持续升高为主要特征的内分泌疾病，机体在长期高血糖状态下会使肾小球系膜细胞释放大量活性氧（reactive oxygen species，ROS）基团，从而引起肾小球系膜细胞死亡，导致肾功能障碍，最终导致DKD 发生［8］。目前，临床上通常将微量白蛋白尿作为诊断DKD 的主要依据，但有研究指出，部分T2DM 患者在出现白蛋白尿之前就已经有肾小球滤过率下降趋势［9］，此外，DKD 起病隐匿，在糖尿病期持续数十年才达到发病高峰期，出现蛋白尿。因此，应选用更灵敏的指标对DKD 作出诊断，并及时进行治疗。

β2-MG 是一种小分子蛋白质，可通过肾小球过滤及近端肾小管吸收后分解成氨基酸，其在健康人体内合成及释放过程稳定，而肾病患者肾小球过滤功能及肾小管功能受损，易引起β2-MG 浓度异常升高［10］。血清OST 是一种活性多肽，参与调节骨钙代谢，可在一定程度上反映成骨细胞活性，其对诊断骨质疏松等病症有较好的特异度［11］。25（OH）D3是反映机体内维生素D 水平的活性形式，其作用于肾脏、小肠等靶器官，可以调节钙磷水平、骨骼代谢及刺激成骨细胞活动能力，对肾脏具有一定的保护作用［12］。本研究结果显示，DKD 组β2-MG 水平高于对照组和T2DM 组，血清OST 及25（OH）D3 水平低于对照组及T2DM 组。分析其机制可能与以下几点有关，其一，在肾功能出现损伤时会导致β2-MG 分解代谢受到抑制，从而引起机体循环内β2-MG 水平迅速升高；其二，糖尿病患者在机体长期高血糖刺激下会产生大量有毒代谢物质，引起血管功能异常，进而致使骨形成减少及成骨活性降低，从而导致血清OST 合成减少［13］；其三，由于DKD 患者肾功能不同程度的损伤，致使肾脏1α 羟化酶活性降低，DKD 患者eGFR 水平下降，导致血磷无法排出体内，使体内血磷水平升高，抑制近曲小管，导致25（OH）D3 合成受阻。

周红军等［14］认为，β2-MG 是早期T2DM 患者肾损伤的敏感标志物，其水平随肾功能损害程度加深而升高。这与本研究中DKD 患者β2-MG 水平随Scr、BUN 水平升高及eGFR 水平降低而升高的结果不尽相同。本研究结果显示，DKD 患者血清OST 及25（OH）D3 水平与Scr 及BUN 水平呈负相关，与eGFR 水平呈正相关，表明血清OST 及25（OH）D3 对DKD 具有保护作用，研究结果与王英彪等［15］一致。分析其对糖尿病微血管病变的保护机制可能是：血清OST 在通过成骨细胞内质网蛋白质羧化后产生变化，使羟基磷灰石晶体表面钙离子亲和力增加，进而减少微血管钙化［16］；而25（OH）D3 通过抑制转化生长因子-β 水平及保护肾小球滤过屏障的足细胞，减少了糖尿病肾病肾脏损害。

多因素Logistic 分析显示，β2-MG、血清OST及25（OH）D3 是DKD 患者的独立影响因素，提示上述指标在DKD 发生及发展过程中起重要作用。此外，Scr 及BUN 亦是DKD 的影响因素，这可能与高Scr 及BUN 水平会造成肾小管上皮细胞纤维化及肾小球硬化，从而导致肾功能损伤有关。ROC 曲线结果显示，尿β2-MG、血清OST 及25（OH）D3 预测DKD 的下曲线面积（AUC）分别为0.813、0.712、0.739，三者联合检测AUC 为0.936，表明联合检测三者水平对于临床诊断DKD 有较好的预测价值，可为DKD 的诊断及治疗提供思路。

综上所述，T2DM 患者尿β2-MG、血清OST 及25（OH）D3 水平与肾功能密切相关，并参与DKD的发病机制，对诊断DKD 具有应用价值。