两种不同猪瘟疫苗对育肥猪的免疫效果比较

张 宁,佘 桐,李 旭,王遵宝,韩永刚,李 宏

(1.陕西省汉中市汉台区畜牧兽医技术推广中心,陕西 汉中 723000;2.陕西省汉中市动物疫病预防控制中心;3.陕西省留坝县畜牧兽医技术推广中心;4.新疆天康生物股份有限公司;5.陕西省畜牧技术推广总站)

猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起猪的一种高致死性和接触性传染病。当猪群感染猪瘟病毒以后,自身免疫机能受到严重破坏,随之继发各种细菌、病毒性疾病。该病的发生严重影响着生猪的生长,危害生猪的健康,对养殖业造成巨大的经济损失。目前市场上猪瘟疫苗种类繁多,其中猪瘟C株活疫苗是目前使用最多的疫苗品种,其具有抗原全面、成本低、免疫保护率高,且可诱发细胞免疫的优点,对我国猪瘟防控起到了重要的历史作用。但由于难以完全阻断繁育猪群中猪瘟病毒的垂直传播和水平传播,致使猪群猪瘟持续带毒和免疫耐受现象层出不穷,并导致猪瘟野毒在我国长期存在,一直未被彻底净化。而猪瘟E2亚单位疫苗相比于传统的猪瘟C株活疫苗可区分疫苗毒和野毒感染,为猪瘟净化提供新的思路。为做好猪瘟防控实现全面净化,准确了解猪瘟病毒E2亚单位疫苗与传统猪瘟C株弱毒疫苗(脾淋源)对育肥猪免疫后的免疫效果及生产成绩影响。

本试验选取了汉中某代养猪场一批外购保育猪分别免疫接种该两种疫苗,通过临床观察和ELISA试剂盒评估该猪群生长状况和猪瘟抗体水平,为猪场筛选疫苗,节本增收,提高生产效益提供了参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物及疫苗

28～35日龄已免疫过猪瘟活疫苗(脾淋源)的保育猪;猪瘟E2基因工程亚单位疫苗;猪瘟C株活疫苗(脾淋源)。

1.2 主要试剂及仪器设备

IDEXX猪瘟病毒抗体检测试剂盒(美国,Cat NO.99-43220);sunrise酶标仪;8道微量移液枪(比克曼),离心机。

1.3 试验方法

1.3.1 免疫程序 选择陕西省汉中市某规模化养殖场进行代养的外购自河南省濮阳市的一批已接种过猪瘟活疫苗的断奶仔猪,将所有仔猪分为A、B、C三组,A、B组随机选取体重相近的育肥猪不少于800头;C组选留体重相近的育肥猪60头。于45日龄时,对A组免疫E2亚单位疫苗,2 mL/头;对B组免疫猪瘟活疫苗(脾淋源),60日龄加强免疫一次,2头份/次;C组为对照组未进行加强免疫。

1.3.2 临床观察 通过称重、拍照等方法观察记录该批育肥猪免疫前后生长发育、精神状态及发病状况。统计、分析该批育肥猪的成活率、料肉比和日增重等,用于综合评价不同猪瘟疫苗对外购育肥猪生产成绩的改善作用。

1.3.3 采血及猪瘟病毒抗体检测 在100日龄时,进行前腔静脉采血,每组采集10～15份,每份2～4 mL,分离血清后用猪瘟病毒抗体检测试剂盒进行检测,操作步骤见说明书,对检测结果进行统计分析抗体阳性率、阻断率和离散度。

1.3.4 判断标准 在450 nm处读取每个样品的OD值,当阴性对照OD值>0.5且阳性对照阻断率>50%时,试验成立。样品阻断率=(阴性对照平均OD450值-样品OD450)/阴性对照平均 OD450×100%。计算每个样品的阻断率,若阻断率%≤30为阴性(无猪瘟抗体存在),30<阻断率%<40为可疑,阻断率%≥40为阳性。

1.4 数据分析

使用SPSS软件对数据进行统计分析,计算各组数据的差异。

2 试验结果

2.1 免疫后猪群健康状态和生长指标监测记录

临床观察为免疫猪瘟E2亚单位疫苗的试验猪健康状态明显好于免疫猪瘟活疫苗的猪,表现为体表光滑、呈粉红色,生长良好;而免疫猪瘟活疫苗的猪在免疫后一定阶段内被毛粗糙,皮肤苍白,此后恢复。由表1可知,免疫E2亚单位疫苗的猪的成活率较免疫猪瘟活疫苗的猪的成活率提高了5.9个百分点,日增重提高16.3 g,料肉比低于免疫猪瘟活疫苗的猪。

表1 试验猪群生长情况监测结果

2.2 猪瘟抗体检测结果

在育肥猪100日龄时,分别从A、B、C三组抽取10、15、12份血液样品。检测结果如图1所示,A组(E2亚单位疫苗)、B组(猪瘟活疫苗)和C组(未免疫)抗体阳性率分别为100%、80%、16.7%;抗体平均阻断率分别为86.5%、53.3%、27.4%;离散度分别为10.4%、19.0%、26.7%。表明免疫猪瘟E2亚单位疫苗组的抗体效价明显高于免疫猪瘟活疫苗组,且离散度较低,抗体整齐度较高。

图1 A、B、C三组育肥猪猪瘟抗体检测结果

2.3 猪瘟E2亚单位疫苗和猪瘟活疫苗间检测结果对比分析

由表2可知,C组(对照组)和A、B组之间差异极显著(P<0.01),A组和B组之间差异极显著(P<0.001)。

表2 猪瘟E2亚单位疫苗和猪瘟活苗间检测结果对比分析

3 讨论与小结

疫苗的种类是影响免疫效果的主要因素,选择优质的疫苗加上合理的免疫程序对于猪场的防疫起到关键性作用。一般来说,对于育肥猪的猪瘟免疫程序为28～35日龄进行首次免疫,间隔一个月加强免疫一次。为考虑到母源抗体的干扰在对仔猪免疫前需检测其母源抗体水平,从而确定仔猪的最佳首免日龄。有研究表明母猪免疫一次猪瘟E2亚单位疫苗就可有效提高猪瘟血清抗体阻断率及抗体的整齐度,有助于确定仔猪首免日龄,有效减少了母源抗体干扰。

本试验中,A、B、C三组试验猪在试验前已免疫过一次猪瘟活疫苗,B组相比于C组多进行了猪瘟活疫苗的两次加强免疫,经T检验可知C组(对照组)和B组之间差异极显著(P<0.01),说明猪瘟活疫苗须加强免疫以后才能产生较好的保护力,只免疫一针达不到对猪群的免疫保护作用,与之前研究一致。疫苗免疫是动物疫病防控的有效手段,但在动物强制免疫过程中,常因注射疫苗出现免疫应激反应,表现为厌食、代谢紊乱、过敏、生长缓慢,严重者会导致死亡,造成经济损失。本研究结果表明E2基因亚单位疫苗只需免疫一针便可达到较强的免疫保护作用直至猪群出栏,有助于减少因免疫应激而对养殖场带来经济损失,从而提升生产成绩。影响猪瘟免疫效果的因素除了免疫程序、疫苗本身的质量外还有猪的免疫抑制。近年来,随着规模化养猪发展,猪病感染的形势越来越复杂,多数猪病发生感染都是由两种或两种以上的病原体引起的混合感染。混合感染增加了猪只的发病率和死亡率,加大了临床上对疫病的防控难度,给养殖户造成较大的经济损失。猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和猪圆环病毒病2型(PCV2)均属于免疫抑制性疾病,该两种疫病均可显著抑制猪瘟疫苗的免疫效果,从而加大猪场对猪瘟的防控压力。刘武刚等人研究发现E2亚单位疫苗可以突破免疫抑制的影响,免受猪蓝耳病及圆环病毒病感染的干扰,稳定的提高猪瘟抗体水平,使个体得到有效保护,防止了猪瘟免疫失败。

本研究通过临床观察和抗体检测结果分析可知两种疫苗均能刺激机体产生抗体,且E2亚单位疫苗产生的猪瘟抗体水平保护率(100%)高于猪瘟活疫苗(80%),均高于我国农业部动物疾病强制免疫计划中猪群70.0%的合格率要求,说明两种猪瘟疫苗均能提高免疫猪的猪瘟抗体水平,使育肥猪获得良好的保护力,但E2亚单位疫苗相比于猪瘟活疫苗的免疫效果更好,免疫猪群后具有较高的抗体阳性率和抗体平均阻断率,降低了离散度。对猪场而言,选择稳定、较高的猪瘟抗体水平有利于提高猪群有效保护,提高生产成绩。高保护力高的E2亚单位疫苗能提高了育肥猪的成活率和日增重,并获得了较低的料肉比。

综上分析,该育肥猪群中猪瘟E2亚单位疫苗的免疫效果明显优于猪瘟活疫苗(脾淋源),且有助于改善育肥猪的生产成绩、并降低料肉比,是猪场育肥猪群进行猪瘟免疫时可优先选择的疫苗种类。