董淑红,张海涛,陈永亮,吕颜枝,薛 忠
(徐州生物工程职业技术学院,江苏徐州 221006)
为做好动物源性食品安全工作,遏制动物源细菌耐药等问题,我国在2020 年正式实施饲料禁抗。植物精油是一类从植物中提取的次生代谢物质,主要成分是单萜和倍半萜类化合物,以及含有多种生物活性化学物质的苯丙类化合物,具有可挥发和抗水解(毛红霞等,2012),无毒、无副作用、无耐药性、无残留等特点,是一种具有发展前景的天然饲料添加剂(薛萍,2020)。茶树精油是植物体内的次生代谢产物,储存于分泌细胞中,具有挥发性和芳香气味,有很强的抑菌和杀菌能力(周洪彬等,2020)。本试验研究日粮中茶树精油对白羽肉鸡免疫功能和血清生化指标的影响,旨为肉鸡安全健康养殖提供参考。
1.1 试验材料 试验用茶树精油原液,由天津中澳嘉喜诺生物科技有限公司提供,主要成分为35% 4- 松油醇。试验肉仔鸡购由徐州益客食品有限公司提供。
1.2 试验设计与饲养管理 试验将200 只1 日龄体重相近、健康的爱拔益加白羽肉鸡随机分为4 组,每组5 个重复,每个重复10 只鸡。4 个处理组分别饲喂基础日粮(对照组),基础日粮+200 mg/kg(试验Ⅰ组)、500 mg/kg(试验Ⅱ组)和800 mg/kg(试验Ⅲ组)的茶树精油,试验分为1 ~21 d 和22 ~42 d 两个阶段,共42 d。基础日粮组成及营养水平见表1,茶树精油先添加于少量饲料中,搅拌均匀后再逐渐按比例添加,每天现拌现喂。
表1 基础日粮组成及营养水平(干物质基础)
试验于2022 年9 ~11 月在徐州生物工程职业技术学院动物工程学院进行,试验鸡使用立式鸡笼饲养,育雏前鸡舍彻底清扫、冲刷和消毒,控制舍内温湿度,自然采光和人工照明相结合,鸡群自由采食和饮水,按常规程序进行免疫,每天详细记录鸡只行为及饲料消耗等情况。
1.3 测定指标和方法
1.3.1 免疫器官指数 21 和42 日龄时,每组随机抽取体重相近且健康的肉鸡10 只,空腹屠宰后取出脾脏、胸腺和法氏囊,按照公式计算各免疫器官与体重之间的相对重量。
免疫器官指数(g/kg)=免疫器官鲜重(g)/ 活体重(kg)。
1.3.2 免疫球蛋白和溶菌酶 42 日龄,每组随机抽取体重相近且健康的肉鸡10 只,翅静脉采血5 mL,12000 转/min 离心1 min 分离血清,后置于-20℃冰箱中保存,采用酶联免疫吸附法测定免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)和溶菌酶含量,试剂盒购自南京建成生物工程研究所,各指标由徐州市铜山区家禽技术指导站协助完成。
1.3.3 血清生化指标 42 日龄时翅静脉采血,离心获得血清后,采用全自动生化分析仪检测血清中的总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮、碱性磷酸酶、钙、无机磷、甘油三酯和胆固醇的含量。
1.4 数据统计与分析 试验数据采用SPSS 20.0软件进行单因子方差分析,采用Duncan's 法进行多重比较,试验结果用“平均值± 标准误”表示,P<0.05 表示组间差异显著。
2.1 日粮中添加茶树精油对白羽肉鸡免疫器官指数的影响 由表2 可知,21 日龄时,各试验组肉鸡的免疫器官指数与对照组相比差异不显著(P>0.05);试验Ⅰ~Ⅲ组42 日龄时肉鸡法氏囊指数显著高于对照组(P<0.05),日粮中添加茶树精油对肉鸡的脾脏指数和胸腺指数差异不显著(P>0.05)。
表2 日粮中添加茶树精油对白羽肉鸡免疫器官指数的影响g/kg
2.2 日粮中添加茶树精油对白羽肉鸡免疫球蛋白和溶菌酶的影响 由表3 可知,在42 日龄时,试验Ⅱ组IgA 的含量比对照组显著提高1.03mg/mL(P<0.05),试验Ⅱ组IgG 含量显著高于对照组和试验Ⅰ组(P<0.05),与试验Ⅲ组差异不显著(P>0.05);对照组和试验各组的IgM 含量和溶菌酶活力差异均不显著(P>0.05)。
表3 茶树精油对42d 白羽肉鸡免疫球蛋白和溶菌酶的影响
2.3 日粮中添加茶树精油对白羽肉鸡血清生化指标的影响 由表4 可知,各组肉鸡血清总蛋白、白蛋白、总胆红素、无机磷、甘油三酯和胆固醇的含量均差异不显著(P>0.05);试验Ⅰ组球蛋白含量显著高于试验Ⅱ和Ⅲ组(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05);试验Ⅱ组尿素氮的含量显著低于对照组(P<0.05);试验各组的碱性磷酸酶活性和对照组相比均有提高,其中试验Ⅱ组的碱性磷酸酶活性显著高于对照组(P<0.05);试验各组的钙含量均高于对照组,其中试验Ⅱ组与对照组相比差异显著(P<0.05)。
表4 日粮中添加茶树精油对白羽肉鸡血清生化指标的影响
3.1 饲料中添加茶树精油对白羽肉鸡免疫器官指数的影响 肉鸡免疫器官的发育指数是评价肉鸡免疫器官发育好坏的重要参考,是宏观观测肉鸡免疫功能的重要指标(王亚锴,2015)。研究表明,肉仔鸡胸腺和法氏囊指数在18 日龄时达到最大,脾脏在35 日龄达到最大(王锡乐等,2004)。Amad 等(2011)研究发现,日粮中添加植物精油可提高肉仔鸡脾脏、肾脏、心脏指数。肉鸡日粮中添加茶树精油能促进肉鸡胸腺、法氏囊、脾脏的发育,但不同饲喂周期其促进作用存在差异。
3.2 茶树精油对白羽肉鸡免疫球蛋白和溶菌酶的影响 本研究发现,不同水平的茶树精油能提高白羽肉鸡42 日龄时血清中IgA、IgG、IgM 含量,增强体液免疫机能。Mathlouthi 等(2012)研究表明,牛至精油对肉鸡42 d 血清IgG 无显著影响,但有提高趋势。朱晓磊(2014)研究发现,在麻花鸡日粮中添加0.25 mg/kg 百里香精油(主要成分为香荆芥酚、百里酚等)可显著提高肉鸡血清IgA、IgG 和IgM 含量。周美玲等(2014)研究发现,与对照组相比,紫苏精油可以显著提高小鼠免疫血清中溶菌酶含量,说明植物精油可以提高机体的免疫水平,增强肉鸡的血清杀菌能力。
3.3 茶树精油对白羽肉鸡血清生化指标的影响 血清生化指标是检验机体生理机能的重要参照,对临床诊断具有重要意义(杨恒伟等,2010)。研究表明,日粮中添加适量的百里香精油可显著提高麻花鸡前期血清中总蛋白和球蛋白含量(朱晓磊,2014),在本试验中,各试验组的总蛋白与白蛋白含量均有增加趋势。孙海涛等(2018)研究发现,牛至油能显著降低血清尿素氮含量,本试验结果为尿素氮含量在添加油茶树精油后有降低,但无显著降低趋势。胆红素是肝脏代谢的重要物质,如果肝细胞功能障碍会导致血液中的胆红素升高(夏梦芳,2017),本试验在日粮中添加茶树精油后,试验组胆红素含量均低于对照组。碱性磷酸酶由成骨细胞和肝胆合成分泌,能反映骨组织的新陈代谢情况(张勇等,2016),在本试验中,与对照组相比,其他各组血清碱性磷酸酶的活性均有提高,说明在适当剂量下使用茶树精油对肉鸡骨骼发育有一定作用。
茶树精油能增强肉鸡免疫能力,提高血清中白蛋白与总蛋白的含量,增强血清碱性磷酸酶活性,综合试验结果,茶树精油在肉鸡日粮中适宜添加量为500 mg/kg,可为肉鸡应用提供参考。