血清CTRP9 VASH-1 对妊娠期高血压疾病患者早期肾损伤的评估价值

郝媛媛 杜 巍 王建美

妊娠期高血压疾病（hypertensive disorder complicating pregnancy，HDCP）是一系列涉及妊娠和高血压的疾病，主要临床表现包括血压升高、水肿、尿蛋白和系统性多器官损伤等，严重时甚至可能发生昏迷和抽搐，对母亲和婴儿的健康造成严重威胁［1-2］。肾损伤是HDCP 最常见的并发症之一，可导致孕妇流产、早产及胎儿死亡［3］。由于HDCP 肾损伤早期发病不易被察觉，容易错过最佳治疗时机，故确定HDCP 患者早期肾损伤有效的诊断评估指标，对积极预防和治疗HDCP 患者早期肾损伤具有重要意义。C1q 肿瘤坏死因子相关蛋白9（C1q tumor necrosis factor-related protein 9，CTRP9）是由脂肪组织分泌的新型脂肪因子，在免疫调节、抗炎反应、细胞凋亡、自身免疫、血管系统、体内葡萄糖和脂质代谢等过程中具有重要作用［4］。研究显示，CTRP9 在心肌保护、抑制内膜损伤后血管重塑和保护血管内皮方面发挥重要作用［5-7］。但目前相对较少的研究关注CTRP9 在HDCP 中的作用。血管生成抑制蛋白-1（vasohibin-1，VASH-1）是一种新型抗血管生成因子，主要由内皮细胞产生分泌，可存在于肾小球系膜细胞［8］。研究显示，血清VASH-1 水平可能与肾脏炎症和纤维化相关因子的表达有关，且与糖尿病肾病具有潜在联系［9］。但目前关于CTRP9 和VASH-1 对HDCP患者肾损伤的早期诊断价值尚不明确，故本研究通过对HDCP 患者血清CTRP9、VASH-1 水平进行检测分析，探讨二者对HDCP 患者肾损伤早期的评估价值，期望为该疾病的诊疗提供一定依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2022 年1～12 月河北中石油中心医院产科就诊治疗的HDCP 患者112 例为研究对象，根据是否发生肾损伤，将其分为非肾损伤组（n=52）和肾损伤组（n=60）。另选取同期在本院建立档案且孕检正常孕妇70 例作为对照组。

纳入标准：① HDCP 患者均经临床确诊符合相关诊断标准［10］者；②肾损伤组患者均经临床确诊为肾损伤［11］者；③HDCP 患者均无孕前高血压及肾脏疾病史；④均为单胎自然妊娠者；⑤患者及家属知情且同意。排除标准：①合并胎盘前置、低置以及先兆早产等妊娠期并发症者；②患有免疫系统、血液系统疾病者；③合并糖尿病、甲状腺等内分泌疾病者。本研究经医院伦理委员会审查同意（审批号：2021-0128）。

1.2 方法

1.2.1 资料收集 收集3 组对象年龄、身体质量指数、收缩压、舒张压、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、血尿酸、尿蛋白等基本临床资料。

1.2.2 酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）测定血清CTRP9、VASH-1 水平 采集孕妇清晨空腹静脉血3 mL，离心机（厦门国仪，型号：TDD-5）4 000 r/min 离心12 min，分离血清，-80℃冰箱保存备用。根据人CTRP9 ELISA 试剂盒（上海羽朵生物，货号：YEF24147）、人VASH-1ELISA 试剂盒（上海羽朵生物，货号：YEF17525）说明书配制CTRP9、VASH-1 标准品溶液，解冻血清样本，多功能酶标仪（美国PerkinElmer，型号：EnVision）测定CTRP9、VASH-1 标准品溶液及血清样本在450 nm 处的吸光度，绘制CTRP9、VASH-1 标准品回归曲线。根据CTRP9、VASH-1 标准品回归曲线方程，计算血清样本CTRP9、VASH-1 水平。

1.3 观察指标 ①比较3 组对象基本临床资料；②比较受试者血清CTRP9、VASH-1 水平；③分析血清CTRP9、VASH-1 水平与收缩压、舒张压、TNF-α、血尿酸、尿蛋白水平的相关性；④分析HDCP 患者发生早期肾损伤的影响因素；⑤分析血清CTRP9、VASH-1 水平在预测HDCP 患者发生早期肾损伤中的价值。

1.4 统计学方法 应用SPSS 25.0 软件对数据进行统计分析。符合正态分布的计量资料以表示，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用SNK-q检验；相关性分析采用Pearson 相关分析；采用多因素logistic 回归分析HDCP 患者发生早期肾损伤的影响因素；采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评价血清CTRP9、VASH-1 水平在预测HDCP 患者发生早期肾损伤中的价值。以P<0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组对象一般资料比较 3 组对象收缩压、舒张压、TNF-α、血尿酸、尿蛋白进行比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。肾损伤组收缩压、舒张压、TNF-α、血尿酸、尿蛋白均高于非肾损伤组和对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；非肾损伤组收缩压、舒张压、TNF-α、血尿酸均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 3组对象一般资料比较（）

表1 3组对象一般资料比较（）

注：TNF-α为肿瘤坏死因子α；与对照组比较，①P＜0.05；与非肾损伤组比较，②P＜0.05。

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2.2 3 组对象血清CTRP9、VASH-1 水平比较 3 组对象血清CTRP9、VASH-1 水平进行比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。肾损伤组血清CTRP9 水平低于对照组和非肾损伤组，非肾损伤组CTRP9 水平低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；肾损伤组血清VASH-1 水平高于对照组和非肾损伤组，非肾损伤组VASH-1 水平高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 3组对象血清CTRP9、VASH-1水平比较（）

表2 3组对象血清CTRP9、VASH-1水平比较（）

注：CTRP9为C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9；VASH-1为血管生成抑制蛋白-1；与对照组比较，①P＜0.05；与非肾损伤组比较，②P＜0.05。

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2.3 血清CTRP9、VASH-1 水平与临床指标的相关性分析 Pearson 相关分析结果显示，发生早期肾损伤HDCP 患者血清CTRP9 水平与收缩压、舒张压、TNFα、血尿酸、尿蛋白水平均呈负相关（P<0.05）；患者血清VASH-1 水平与收缩压、舒张压、TNF-α、血尿酸、尿蛋白水平均呈正相关（P<0.05）。见表3。

表3 血清CTRP9、VASH-1水平与临床指标相关分析（n=60）

2.4 HDCP 患者发生早期肾损伤的影响因素的多因素logistic 回归分析 以HDCP 患者是否发生早期肾损伤（是=1，否=0）为因变量，以血清CTRP9、VASH-1、收缩压、舒张压、TNF-α、血尿酸和尿蛋白水平为自变量，采用逐步向前法进行多因素logistic 回归分析。结果显示，高水平CTRP9 为HDCP 患者发生肾损伤的独立保护因素（P<0.05）；高水平VASH-1、TNF-α、血尿酸、尿蛋白均为HDCP 患者发生肾损伤的独立危险因素（P<0.05）。见表4。

表4 HDCP患者发生早期肾损伤的影响因素的多因素logistic回归分析

2.5 血清CTRP9、VASH-1 水平在预测HDCP 患者发生早期肾损伤中的价值 以血清CTRP9、VASH-1 水平为检验变量，以HDCP 患者是否发生早期肾损伤为状态变量（是=1，否=0），绘制ROC 曲线。结果显示：血清CTRP9 预测HDCP 患者发生早期肾损伤的曲线下面积（area under the curve，AUC）为0.873（95%CI：0.811～0.935），截断值为141.58 pg/mL，特异度为80.77%，灵敏度为75.00%；血清VASH-1 水平预测HDCP 患者发生早期肾损伤的AUC 为0.896（95%CI：0.838～0.953），截断值为635.53 ng/L，特异度为84.62%，灵敏度为80.00%。血清CTRP9、VASH-1 联合预测HDCP 患者是否发生早期肾损伤的AUC 为0.955（95%CI：0.921～0.989），均优于各自单独预测（Z=2.319，P=0.020；Z=1.755，P=0.079），特异度为92.31%，灵敏度为86.67%。见图1。

图1 血清CTRP9、VASH-1 水平预测HDCP 患者发生早期肾损伤的ROC曲线

3 讨论

HDCP 是孕期孕产妇死亡的5 大原因之一，在中国发病率约为9%［12］。研究认为，HDCP 发病可能原因是免疫系统失衡、胎盘浅着床、侵入子宫肌层的滋养层细胞异常、血管内筛分细胞损伤、遗传因素等［13-14］，但其具体发病机制目前尚不清楚，且由于在HDCP 期间会发生尿蛋白水平上升而导致患者发生肾损伤，因此确定HDCP 患者早期肾损伤有效的诊断评估指标，对积极预防和治疗HDCP 患者早期肾损伤具有重要意义。

CTRP9 是一种抗炎，抗氧化，血管舒张和动脉粥样硬化保护脂肪细胞因子，具有与脂联素相似的代谢调节功能［15］。研究显示，CTRP9 过表达减轻了细胞活性和凋亡的损伤，减少了炎症和细胞迁移能力受损；CTRP9 通过抑制肾小球和肾小管糖原积累和纤维化，缓解高血糖介导的氧化应激和细胞凋亡；CTRP9 可抑制促炎因子TNF-α 释放来减少细胞凋亡，并减少炎症［16-18］。本研究结果发现，肾损伤HDCP 患者血清CTRP9 水平低于对照组和非肾损伤患者，且早期肾损伤HDCP 患者血清CTRP9 水平与收缩压、舒张压、TNF-α、血尿酸、尿蛋白水平均呈负相关，推测可能由于CTRP9 水平下调，导致TNF-α 水平上调，炎症反应发生，促进患者肾损伤过程［17］。进一步研究发现，高水平CTRP9 为HDCP 患者发生肾损伤的独立保护因素，血清CTRP9 预测HDCP 患者发生早期肾损伤的AUC为0.873，截断值为141.58 pg/mL，特异度为80.77 %，灵敏度为75.00 %，提示通过上调CTRP9 水平可能能够抑制肾损伤发生，CTRP9 在评估HDCP 患者发生肾损伤中具有一定价值。

VASH-1 通常作为血管内皮细胞血管生成的负反馈调节剂起作用，能够在生理和病理条件下抑制血管生成［19］。研究显示，患有间质性肺疾病的系统性硬化症患者血清VASH-1 水平较对照者显着升高［8］。糖尿病肾病患者血清VASH-1 水平显着升高，且随其病情加重而逐渐上调［9］。本研究结果发现，肾损伤组患者血清VASH-1 水平高于对照组和非肾损伤组，与Liu等［20］研究结果相似。患者血清VASH-1 水平与收缩压、舒张压、TNF-α、血尿酸、尿蛋白水平均呈正相关，且高水平VASH-1 为HDCP 患者发生肾损伤的独立危险因素。ROC 分析发现，血清VASH-1 水平预测HDCP 患者发生早期肾损伤的AUC 为0.896，截断值为635.53 ng/L，特异度为84.62 %，灵敏度为80.00%。进一步研究发现，血清CTRP9、VASH-1 联合预测HDCP 患者是否发生早期肾损伤的AUC 为0.955，均优于各自单独预测，且特异度为92.31 %，灵敏度为86.67%，提示CTRP9、VASH-1 联合在评估HDCP 患者早期肾损伤中具有一定潜在价值。

综上所述，发生早期肾损伤HDCP 患者血清CTRP9 水平降低，血清VASH-1 水平升高，二者在预测评估HDCP 患者发生早期肾损伤中具有一定价值。但本研究样本数量有限，还需扩大样本进行进一步验证CTRP9、VASH-1 水平在HDCP 患者发生早期肾损伤中的临床价值，并深入探究其作用机制。