青海省西宁市大通县包虫病感染状况调查

顾冬花

（青海省大通县畜牧兽医站，青海 大通 810100）

包虫病又名棘球蚴病，是由寄生于犬、狼、狐等肉食动物小肠内的棘球绦虫的中绦期幼虫—棘球蚴感染中间宿主而引起的一种人畜共患病。该病在全球范围内广泛传播，是严重危害人畜健康的寄生虫病，不但阻碍畜牧业生产发展，而且还严重影响人类的身体健康。本病有人类“第二癌症”之称[1]，危害严重。包虫病在许多国家导致严重公共卫生问题和经济损失，包虫病在我国西北大部分地区已达到了较高的流行水平[2]，主要流行于青海、甘肃、四川、新疆、西藏、内蒙等西部地区的七个省（自治区）的牧区和半牧区[3]。农业部、卫生部等十四个部委联合印发了《防治包虫病行动计划（2016-2020》，这是多个部委针对于单一疫病提出防治计划的首例。2020年青海省对包虫病防治又提出了新的计划和要求。

青海省西宁市大通县地处青海省东部农业区北部，属省会西宁市辖县，全县总面积3090 km2，辖20个乡镇，共41万人，物产资源丰富，可利用草场1.56×105hm2，林地面积103 hm2，森林覆盖率26.4%，自然环境多样性，经济结构地域差异较大，外川片区长宁镇和桥头镇以工业、农业为主；东峡镇和城关镇以农业、牧业为主。畜牧业的收入在本县占较高的比例，有的地区畜牧业收入远远超过了其他收入成为主要经济来源。据徐海抚等[4]测定，在同等饲养条件下，由于棘球蚴病的感染造成绵羊体重下降3.01 kg、羊毛产量下降0.2 kg。因此，加强包虫病防治对于促进畜牧业稳定发展，保障人体健康，维护公共卫生安全尤为重要。大通县自2015年以来，通过对家畜包虫病感染情况的调查和终末宿主阳性率的检测，基本掌握了本县家畜、犬及人包虫病感染情况，为今后进一步防治包虫病提供了数据参考。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 仪器设备 37 ℃ 恒温培养箱、酶标仪均购自上海捷呈实验仪器有限公司;12道微量移液器、单道微量移液器购自大龙仪器有限公司。

1.1.2 检测试剂 包虫病犬粪抗原检测间接ELISA试剂盒购自深圳康百得生物科技有限公司。

1.1.3 样品来源 4084份犬粪样品均随机采自散养户家中驱虫后新鲜犬粪，于2016-2022年春秋两季集中检测时间，样品采完后立即送到实验室，-70 ℃ 灭活1周后开始检测。

1.2 方法

1.2.1 抽样方法 （1）中间宿主调查。每年利用牛、羊屠宰季，对全县不同区域屠宰牛羊剖检脏器（被检脏器有肝、肺、肾、脾以及胃肠），在屠宰过程中随机抽样检查，主要以眼观、触摸、切片的方法，计算感染牛羊阳性数和阳性率。（2）人员感染调查。根据县卫生健康委员会的反馈，各乡镇卫生院按照片区进行B超筛查，发现阳性报告需省级卫生部门进行复诊，最后根据诊断结果进行手术或药物治疗，各乡镇卫生院工作人员对患者进行跟踪回访，随时掌握治疗情况。（3）终末宿主调查。对犬采用犬粪抗原检测，每年5月、10月集中采样检测2次，检测方法采用间接ELISA法，对检测结果为阳性的样品，剖检采样犬，进一步确诊检测结果。

1.2.2 检测方法与结果判定 （1）洗涤液配制。用蒸馏水或去离子水将洗涤液按1:10稀释，充分混匀即为工作浓度洗涤液。（2）样品稀释液配制。用蒸馏水或去离子水将洗涤液按1:1稀释，充分混匀即为工作浓度样品稀释液。（3）样品处理。犬粪样品需要预先低温（-70 ℃ 以下）冷冻7 d以上，以灭活虫卵。称取1 g犬粪，加入1 mL工作浓度样品稀释液，充分搅拌混均，静止10 min，再3000 rpm离心10 min，取上清液待检。（4）加样反应。样品孔，每孔加入100 uL待检样品；阴性对照两孔，每孔仅加100 uL阴性样品；阳性对照两孔，每孔仅加100 uL阳性样品。盖好封板膜，37 ℃ 避光反应30 min。（5）洗板。甩去孔内液体，每孔注满工作浓度洗涤液洗板6次，每次均需静止1 min；最后一次甩净，拍干。（6）加酶反应。每孔加酶结合物100 uL，盖好封板膜，37 ℃ 避光反应30 min。甩去孔内液体，如上洗板，拍干。（7）显色反应。按所需用量，临用前取等体积底物和显色剂充分混匀后每孔加100 uL，盖好封板膜，37 ℃ 避光反应10 min。（8）终止反应。加终止液50 uL，用酶标仪在450 nm波长下，读取OD值。（9）参考值。COV=阴性对照平均OD值×2.1（阴性对照孔OD值＜0.15时按0.15计）。阴性对照孔OD值≤0.3（若大于0.3则实验无效）；阳性对照孔OD值≥0.5（若小于0.5则实验无效）。结果判定：样品OD值≥COV，判为包虫抗原阳性；样品OD值＜COV，判为包虫抗原阴性。

2 结果

2.1 牛、羊、犬包虫病感染情况调查结果

2015年牛羊棘球蚴感染较为严重，感染主要在肝脏，其次肺脏（经调查这部分屠宰羊主要来自海晏县），牛的感染率为8%，羊感染率为16.67%。2016年牛的感染率为0.99%，羊感染率为7.43%。2017年牛的感染率为0，羊感染率为0.74%，感染强度为3.35%。2018年牛的感染率为0，羊感染率为0.65%，感染强度为1.56%。从2019年至2022年牛羊调查结果均为阴性。牛羊两者的感染强度相比，羊的感染率高于牛的感染率，这与羊分布区域有关，2015年检查的阳性牛中4头来自海南州，2016年调查的羊大部分来自海晏县。从此表1可见牛羊感染率每年逐渐下降，说明大通县牛羊包虫病防控已取得一定成效。

表1 牛、羊、犬包虫病感染情况调查结果

2.2 犬粪抗原检测结果

犬粪抗原检测2015年699份，阳性率12.3%；2016年1093份，阳性率13.4%；2017年556份，阳性率9.9%；2018年551份，阳性率3.4%；2019年622份，阳性率2.7%；2020年569份，阳性率3.5%；2021年513份，阳性率1.6%，2022年180份，阳性率3.3%。粪抗原阳性率呈逐年下降趋势，犬剖检74只，犬下水99付，结果均为阴性。

2.3 人包虫病感染情况调查结果

人包虫病2016-2021年共调查464807人，阳性患者58人，其中药物治疗40人，手术治疗29人（表2）。2016年调查310428人，阳性患者6人；2017年调查68373人，阳性患者19人；2018年调查73621人，阳性患者15人；2019年调查2018人，患者6人；2020年调查4160人，患者7人；2021年调查6207人，患者5人。这6年调查数据显示，人的感染率有所上升，各级部门要引起高度重视。

表2 人感染情况调查

3 讨论与结论

就以上调查结果而言，大通县中间畜主牛羊和人包虫病均有不同程度感染，虽然感染率较低，但包虫病防控任务依然很艰巨，今后工作中应继续按照上级业务部门的防控要求，完成犬驱虫、粪抗原检测、犬剖检、牛羊剖检等工作要求，同时针对不同宿主对该病的传播途径开展不同防控措施。（1）人的感染主要是对包虫病知识了解少，缺乏防护意识，因此，针对不同人群加强健康教育、宣传培训，普及包虫病防控知识，提高全民的防范意识，根除以感染病畜内脏喂犬和乱抛的陋习。（2）本县草山放牧牛羊及从海晏等外地调入的草山牛羊包虫病感染率较高，主要是由于野生犬科动物、放牧犬与牛羊形成反复循环感染的可能较大，因此，今后加强野生犬科动物感染情况的调查，切断传播途径，预防牛羊感染，对调入牛羊实行区域化养殖。（3）加强屠宰检疫，严格执法，对检出的患病脏器100%无害化处理，犬进行拴养，实行定期驱虫，月月投药，驱虫后5 d粪便无害化处理，预防家犬与牛羊间的循环感染，逐步从各个环节根除包虫病的存在，最终实现包虫病净化。